白介素—33、白介素—37在鼻息肉组织中的表达及意义

薛军芳++++++柴向斌

[摘要] 目的 探讨白介素-33（IL-33）、白介素-37（IL-37）在鼻息肉中的表达及其在鼻息肉中发挥的作用。 方法40例鼻息肉患者的鼻息肉组织及18例鼻中隔偏曲患者的正常鼻黏膜组织为本次研究对象，用免疫组织化学方法分别检测其中IL-33及IL-37的表达情况。 结果 鼻息肉组IL-33阳性率为65.0%，IL-37阳性率为20.0%。正常鼻黏膜组中IL-33阳性率为33.3%，IL-37阳性率为77.8%。 结论 IL-33、IL37与鼻息肉发病密切相关。

[关键词] 鼻息肉；白介素-33；白介素-37；免疫组织化学

[中图分类号] R765.25 [文献标识码] A [文章编号] 1673-9701（2015）12-0009-03

Expression of IL-33，IL-37 in human nasal polyps and clinical significance

XUE Junfang CHAI Xiangbin

Department of Otolaryngology Head and Neck Surgery，First Clinical Medical College of Shanxi Medical University，Taiyuan 030001，China

[Abstract] Objective To investigate the expression of IL-33，IL-37 in nasal polyps tissue，and their relevance to the pathogenesis of human nasal polyps. Methods Immunohistochemistry was used to detect the expression of IL-33，IL-37， in excisional nasal polyps tissue from 40 patients with nasal polyps. In addition，the expression of IL-33，IL-37 was also detected in normal nasal mucosa from 18 patients with the nasal septum deviation. Results In the nasal polyps tissues，IL-33 positive rate was 65.0%，IL-37 positive rate was 20.0%.In the normal nasal mucosa， IL-33 positive rate was 33.3%，IL-37 positive rate was 77.8%. Conclusion IL-33 and IL-37 play an important role in the pathogenesis of nasal polyps.

[Key words] Nasal polyps； IL-33； IL-37； Immunohistochemical

鼻息肉为鼻科常见病，发病率较高，为感染、非感染性炎症，解剖异常、免疫异常、遗传因素等多致病因素导致的疾病实体，其发病机制尚不明确。近来研究表明，许多细胞因子在鼻息肉的发生发展中起重要的作用。IL-33、IL-37为新近发现的隶属于IL-1家族的新型细胞因子，与许多炎症性疾病及免疫性疾病密切相关。本研究应用免疫组织化学方法检测鼻息肉组织及正常鼻黏膜组织中IL-33、IL-37的表达情况，探讨此两种细胞因子在鼻息肉发生中的作用。

1 材料与方法

1.1 材料来源

所取标本均来自2013年10月～ 2014年9月我院住院鼻息肉患者手术标本及鼻中隔偏曲患者正常鼻黏膜标本。所有患者取材前1周内均未使用过任何激素类药物。所有鼻息肉患者术前均已经过鼻窦CT、鼻内窥镜的确认，术后所有鼻息肉组织均经病理证实。其中男20例，女20例；年龄15～67岁。另取18例鼻中隔偏曲患者手术时的中鼻甲头端距上缘3～5 mm 处、2 mm×2 mm大小的黏膜组织作为对照组，其中男 12例，女6例，年龄18～49岁，各组患者均无过敏性鼻炎及其他疾病史。鼻息肉组和正常黏膜组性别、年龄比较均无明显差异（P>0.05），具有可比性。

1.2试剂与检测方法

两组标本以10%的福尔马林固定 24～48 h，常规石蜡包埋。4 μm 厚切片，兔抗人白介素-33抗体（博奥森，北京）工作浓度为 1∶100，兔抗人白介素-37抗体（博奥森，北京）工作浓度为 1∶200。免疫组化染色试剂盒（博奥森，北京）包括：3%H2O2去离子水、封闭用正常山羊血清工作液、生物素二抗工作液、辣根酶标记链霉链霉卵白素工作液。DAB显色，苏木素衬染，封片，显微镜观察。

1.3结果判断

IL-33主要表达于上皮细胞和血管内皮细胞的胞核[1]，胞浆也有少量表达，IL-37主要表达于炎症细胞、上皮细胞的胞浆[2]，胞核也有少量表达，以上两种因子均以胞核及胞浆中出现棕黄色至深棕黄色颗粒为阳性，分析5 个不同视野染色细胞百分数并计算，阳性表达细胞数在0～25%为“+”，26%～50%为“++”，≥51%为“+++”。

1.4统计学处理

所有数据采用 SPSS17.0 统计学软件处理，组间比较采用χ2检验，以P<0.05为差异有统计学意义。

2结果

IL-33主要表达于细胞核中，在细胞浆中也有少量表达，呈棕黄色和深棕黄色（图 1、2）。18 例正常鼻黏膜组 6例为阳性（+），阳性表达率为 33.3%，其中5 例为弱阳性（+），1 例为中度阳性（++）。40 例鼻息肉组26 例阳性，阳性表达率为65%，其中 9 例为弱阳性（+），9 例为中度阳性（++），8例为强阳性（+++）。两组差异具有统计学意义（P<0.05）。见表 1。

IL-37主要表达于细胞浆中，呈棕黄色和深棕黄色（图3、4）。18 例正常鼻黏膜组14例为阳性（+），阳性表达率为 77.8%，其中8例弱阳性（+），5 例为中度阳性（++），1例强阳性（+++）。40 例鼻息肉组8例阳性，阳性表达率为20.0%，其中 5 例弱阳性（+），2 例中度阳性（++），1例强阳性（+++）。两组差异具有统计学意义（P<0.01）。见表1。

3 讨论

鼻息肉作为一种多因素致病的炎症性疾病，其发病机制一直没有统一的认识。目前发现多种细胞因子对鼻息肉的发生有一定作用[3]。近些年来的研究显示，在鼻腔外侧壁有一个不稳定的组织微环境，在某些诱导因子的作用下，能产生、分泌许多不同类型的细胞因子。这些细胞因子不仅可以使血管内皮细胞、上皮细胞、腺细胞和基质细胞增殖，而且可以激活某些细胞和细胞外基质，引起嗜酸性粒细胞、肥大细胞等多种炎性细胞释放大量炎性介质，导致局部病理改变，最终形成息肉。此次研究表明鼻息肉组织较正常鼻腔黏膜组织中的IL-33表达增高，IL-37表达降低，提示这些因素参与了鼻息肉的发病过程。

白介素-33（IL-33）是2005年发现的一个多功能、风湿性关节炎因子，属于IL-1家族新成员[4]，它的分子量约18kD，含有270个氨基酸[5]。IL-33常表达于屏障组织细胞，如皮肤、肠、肺等，当这些细胞发生损伤时，全长IL-331-270在胞外可经中性粒细胞丝氨酸蛋白酶、组织蛋白酶G和弹性蛋白酶酶切，产生3种活性形式，分别是IL-3395-270、IL-3399-270和IL-33109-270[6]。由于IL-33的特殊结构，它具有核因子和细胞因子两个功能，能激活肥大细胞、淋巴细胞和嗜酸性粒细胞产生Th2类细胞因子，在炎症、感染、自身免疫性疾病中发挥着十分重要的作用。经研究发现，IL-33具有核因子和细胞因子的双重功能[7]，作为细胞因子它可以参与调节Th2免疫反应，作为核因子可以定位于细胞核内起转录抑制作用[8]。IL-33作为一种细胞因子，是在细胞发生损伤时分泌，其促进炎症发生的生物学活性是由细胞坏死引起的[9]。它可以作为一种危险信号从细胞中释放，激活肥大细胞和嗜酸或嗜碱性粒细胞等多种炎性细胞释放炎性介质，并促进幼稚T细胞向Th2细胞转化，趋化Th2细胞达到病灶，发挥促炎作用[10]。IL-33的信号传导通路与典型的Th2类细胞因子的传导通路不同，IL-33是通过与细胞胞膜上的IL-1受体相关蛋白ST2及IL-1受体辅助蛋白组成的异二聚体将信号转导至细胞内，募集下游的信号分子，来调节 IL-4、IL-5、IL-13等Th2型细胞因子的转录和随后的生物学活性[11]，并且具有前炎症因子的作用[12]。在对哮喘的研究中发现，在急性本实验中研究发现鼻息肉组织中白介素-33的表达较正常鼻黏膜高，IL-33可能在鼻息肉的发病过程中发挥促进作用。

IL-37是Kumar等[13]在2000年发现的一种白介素-1家族新成员。人类IL-37基因存在于2号染色体上，结构与IL-1家族相似，可分为5个亚型IL-37a-e，分子量是17-24kD[14-17]。它与其他IL-1家族成员不同，它是一种天然的免疫应答抑制物，并且可以抑制促炎症因子的产生[2]，在炎症性疾病中发挥抑制作用[18]。已经有研究证实，IL-37可以与IL-18Rα链非竞争性的形成复合体，从而抑制了NF-κB 和 MAPK 等途径，使得IFN-γ的合成下调，对TLR 后信号传导和 DC 细胞活性产生抑制作用，但对IL-18本身的活性却无影响[15]，并且成熟的 IL-37 还可以进入细胞核与 Smad3 结合，形成复合体，通过调节基因转录来抑制促炎因子的产生[2]。在本实验中，我们发现鼻息肉组织中IL-37的表达水平较正常鼻黏膜中的低，表明IL-37可能在鼻息肉的发病过程中起抑制作用。

综上所述，此次试验应用免疫组织化学技术在细胞学的水平上依次对IL-33及IL-37在鼻息肉及正常鼻黏膜中的表达进行了定性研究。结果显示，IL-33在鼻息肉组织中的阳性表达明显高于正常鼻黏膜，IL-37在鼻息肉组织中的阳性表达明显低于正常鼻黏膜，差异均具有统计学意义（P<0.05）。说明鼻息肉的发病过程可能与IL-33、IL-37密切相关，IL-33可能在鼻息肉的发病中发挥促进作用，而IL-37则可能发挥抑制作用。因此，本实验为临床靶向治疗鼻息肉提供用药指导，为预防鼻息肉的复发提供新理论依据。

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（收稿日期：2015-02-27）