注射用葛根素溶液对蟾蜍离体心脏功能的影响*

潘美晴，郑 昊，刘梦玉，梁翠茵

首都医科大学燕京医学院，北京 101300

注射用葛根素溶液对蟾蜍离体心脏功能的影响*

潘美晴，郑 昊，刘梦玉，梁翠茵△

首都医科大学燕京医学院，北京 101300

目的：观察注射用葛根素溶液对蟾蜍离体心脏的作用及其机制。方法：采用斯氏离体蛙心灌流方法，通过BL420E描记心脏收缩力及心率变化，观察注射用葛根素溶液对离体心脏的心肌收缩力和心率的影响，并研究葛根素对肾上腺素、氯化钙心肌收缩量效关系曲线的影响。结果：注射用葛根素溶液使蟾蜍离体心脏的心肌收缩力减弱，心率减慢。在4.8×10-4～4.8×10-2mol/L浓度范围内，注射用葛根素溶液抑制心肌收缩力的作用与剂量之间呈明显量效关系，最大效应可使心肌收缩力降低49%；注射用葛根素溶液可使肾上腺素及氯化钙对心脏的兴奋作用降低。结论：注射用葛根素溶液可抑制蟾蜍离体心脏的收缩力和心率，其作用可能与其抑制β受体，抑制细胞外钙内流有关。

蟾蜍离体心脏；注射用葛根素溶液；作用机制

葛根素(p u erarin P u er)是从豆科植物野葛Pueraria lobata(wi ld)Oh wi的干燥根中提取的有效成分之一，化学名为8-β-D-葡萄吡喃糖-4’，7-二羟基异黄酮，分子式为C21H20O9。现代药理研究表明，葛根素具有扩张微血管、改善微循环、降低血压、扩张冠脉及脑血管、保护缺血心肌和心肌缺血再灌注损伤、抗血栓、抗心律失常及抗氧化、抗衰老、改善记忆、抑制肿瘤细胞生长等作用[1-2]。本研究采用离体蟾蜍心脏灌流的方法，探讨不同浓度注射用葛根素溶液对离体蟾蜍心脏收缩力和心率的影响及其作用机制。

1 材料与方法

1.1 实验动物 蟾蜍，雌雄不限，体质量50 g/只以上，由北京大学医学部实验动物部提供；实验动物合格证号：S C X K（京）2012—0016。

1.2 药品与试剂 注射用葛根素溶液（山东瑞阳制药有限公司，批号：13132401）；盐酸肾上腺素（北京市永康药业有限公司，批号：13030241）；其他试剂均为分析纯。

1.3 仪器 FT-100生物张力换能器、B L-420E+生物技能实验系统均购自成都泰盟科技有限公司。

1.4 方法

1.4.1 注射用葛根素溶液对蟾蜍离体心脏的作用 按斯氏离体蛙心灌流法制备蟾蜍离体心脏，先用3m L任氏液灌流，待心脏搏动稳定后，记录收缩曲线，作为对照组；再分别用浓度为4.8×10-4、9.6×10-4和4.8×10-3、9.6×10-3、4.8×10-2mol/L的注射用葛根素溶液对心脏进行灌流，每组取16只蟾蜍，观察并记录加药前后心肌的收缩力和心率变化情况。

1.4.2 注射用葛根素溶液对盐酸肾上腺素兴奋心脏作用的影响 分别用浓度为1.52×10-7、1.52×10-6和1.52×10-5、1.52×10-4、1.52×10-3mol/L的盐酸肾上腺素溶液对心脏进行灌流，得到盐酸肾上腺素对蟾蜍心脏收缩的量效关系曲线，再用4.8×10-2mol/L的注射用葛根素溶液孵浴15分钟，重新加入盐酸肾上腺素溶液，使其终浓度分别为1.52×10-7、1.52×10-6和1.52×10-5、1.52×10-4、1.52×10-3mol/L，记录心脏收缩曲线的变化。

1.4.3 氯化钙溶液对蟾蜍离体心脏的作用 分别用浓度为1×10-6、1×10-5和1×10-4、1×10-3、1×10-2mol/L的氯化钙溶液对心脏进行灌流，得到氯化钙对蟾蜍心脏收缩的量效关系曲线，再用4.8×10-2mol/L的注射用葛根素溶液孵浴15分钟，重新加入氯化钙溶液，使其终浓度分别为1×10-6、1×10-5和1×10-4、1×10-3、1×10-2mol/L，记录心脏收缩曲线的变化。

1.5 统计学方法 数据采用S P SS 17.0软件分析。计量资料以(±s)表示，采用t检验，检验水准为α=0.05。

2 结果

2.1 注射用葛根素溶液对蟾蜍离体心脏的作用 不同浓度的注射用葛根素溶液可抑制蟾蜍心脏收缩力及心率，随着注射用葛根素溶液浓度的增加，蟾蜍心肌收缩力逐渐减少，对心肌收缩的抑制率逐渐增加，浓度为4.8×10-2mol/L时对心肌收缩的抑制率达49.2%，见表1。

表1 不同浓度注射用葛根素溶液对离体蟾蜍心肌收缩力及心率的影响（n=16)

2.2 注射用葛根素溶液对盐酸肾上腺素兴奋心脏的作用 不同浓度的盐酸肾上腺素溶液可剂量依赖性增加心肌收缩力，增加心率。加入4.8×10-2mol/L的注射用葛根素溶液孵浴，再依次加入不同浓度的盐酸肾上腺素溶液，心肌收缩力及心率仍可剂量依赖性增加，而收缩力增加率显著变小，见表2。

2.3 注射用葛根素溶液对氯化钙兴奋心脏的作用 不同浓度的氯化钙溶液可剂量依赖性增加心肌收缩力，增加心率。加入4.8×10-2mol/L的注射用葛根素溶液孵浴，再依次加入不同浓度的氯化钙溶液，心肌收缩力及心率仍可剂量依赖性增加，而心肌收缩力增加率与单独应用氯化钙比较显著缩小，见表3。

表2 注射用葛根素溶液溶液对盐酸肾上腺素兴奋心脏作用的影响（n=16)

表3 注射用葛根素溶液对氯化钙兴奋心脏作用的影响（n=16)

3 讨论

本研究显示注射用葛根素溶液能使心肌收缩力下降，心率减慢，并呈剂量依赖性。当用注射用葛根素溶液进行孵浴后，氯化钙对离体蟾蜍心脏心肌收缩力的兴奋率显著降低，心率亦有所降低，表明注射用葛根素溶液对蟾蜍离体心脏的心肌收缩力及心率的抑制作用与其抑制心肌细胞钙内流有关，与文献报道一致[3-4]。当用注射用葛根素溶液孵浴后，肾上腺素对离体蟾蜍心脏心肌收缩力的兴奋率降低，心率亦有所降低，表明葛根素对蟾蜍离体心脏的心肌收缩力及心率的抑制作用与心肌的β受体有关，与文献报道一致[5-6]。注射用葛根素溶液可抑制蟾蜍离体心脏的收缩力和心率，其作用机制可能与其作用于蟾蜍心脏的β受体抑制细胞外的钙离子内流，减少细胞内钙有关。

[1] 王海珍.葛根素应用研究进展［J］.山东中医杂志，2013，32（7）：516-517.

[2] 张淑娟，王振涛，韩丽华,等.葛根素注射液对心肌梗塞后大鼠缺血心肌血管新生及VEGFmRNA表达的影响研究［J］.时珍国医国药,2011,22(2):391-392.

［3］ 张玲，许薇，孙媛.葛根素对糖尿病大鼠心功能及心肌细胞内钙离子的影响［J］.中国动脉硬化杂志，2012，20(6):532－535．

［4］ 唐瑜.葛根素对脑缺血再灌注损伤神经元L－型钙通道的影响［J］.中西医结合心脑血管病杂志，2007，5(1):38－40.

[5] 刘诗英，王卫真，吴志勇，等.葛根素对异丙肾上腺素诱导的大鼠心肌组织转化生长因子β1和血浆血管紧张素Ⅱ的影响［J］.实用医学杂志，2012，28（18）：3018-3021.

[6] 刘诗英，王梦洪，郑泽琪.葛根素对异丙肾上腺素诱导的心肌纤维化和心肌结缔组织生长因子表达的影响［J］.临床心血管病杂志，2008，24（9）：682－685．

Influence of Puerarin for Injection on Isolated Heart Function of Toad

PANMeiqing,ZHENG Hao,LIU Mengyu,LIANG Cuiyin△
CapitalMedical University Yanjing Medical College,Beijing 101300,China

Objective:To observe the function and itsmechanism of puerarin for injection on isolated heart function of toad.Methods:Through adopting Steinmann isolated frog heartperfusion,the influence of puerarin for injection onmyocardial contractility and heart rate of isolated heartwere observed by tracing heart contractility of the changesofheart ratew ith BL420E,simultaneously,the influence of puerarin for injection on adrenaline,calcium chloride and myocardial contractility dose-effect relationship curve.Results:Puerarin for injection weakened myocardial contractility of toad isolated heartand heart rate.In the range between 4.8×10-4and 4.8×10-2mol/L,a clear dose-effect relationship was demonstrated between the function of puerarin for injection inhibitingmyocardialcontractility and the dose,themaximum effect could reducemyocardial contractility by 49%;Puerarin for injection could decrease agitation induced by adrenaline and calcium chloride of the heart.Conclusion:Puerarin for injection could inhibit the contractility and heart rate of toad isolated heart,its functionm ightbe related to inhibitingβreceptorand intracellular calcium efflux.

isolated heartof toad;puerarin for injection;mechanism ofaction

R339.4

A

1004-6852(2015)07-0015-03

2014-10-25

首都医科大学2013年第二课堂项目（编号dekt2013079）。

潘美晴（1993—），女，学生。研究方向：中药管理。

△通讯作者：梁翠茵（1965—），女，副教授。研究方向：心血管药理学。