产超广谱β－内酰胺酶大肠埃希菌和肺炎克雷伯菌耐药性分析

陆丽苗，熊流新 (广东省肇庆市第二人民医院，肇庆市妇幼保健院，广东 肇庆 526060)

抗感染药物的广泛使用在带来良好的治疗效果的同时也使细菌的耐药性逐渐增强，耐药菌引起的感染甚至会严重威胁患者的生命安全，在感染性疾病中，病原菌对抗菌药物的耐药性已经成为研究的重点问题。大肠埃希菌和肺炎克雷伯菌是比较常见的条件致病菌，患者发生原发感染的几率更高。随着抗生素的发展应用，大肠埃希菌和肺炎克雷伯菌的患病情况得到了大大改观，但是很多大肠埃希菌和肺炎克雷伯菌产生了超广谱β－内酰胺酶(ESBLs)，对青霉素和头孢菌素等抗菌类药物产生了很强的耐药性，增加了患者临床治疗的难度［1］。本文对在我院内科分离出来的大肠埃希菌和肺炎克雷伯菌进行了耐药性分析。现报告如下。

1 资料与方法

1.1 一般资料:选取2012 年6 月～2013 年6 月期间我院内科病房收集到的痰和咽拭子标本一共1 800 份，其中有614 份标本分离出来致病菌，检出率为34.11%。在致病菌中的大肠埃希菌和肺炎克雷伯菌的数量分别为170 和150 株，两种菌类的数量占据致病菌总数的比例为52.88%，对于标本的留取和保存问题均以操作规程和要求为依据。

1.2 方法:使用上海复星细菌鉴定/药敏分析系统进行细菌鉴定，用上海复星珀路 医药股份有限公司提供的微生物鉴定测试卡进行药敏试验，以1999 年美国国家临床实验室标准委员会推荐的标准作为药敏判断的依据，质控菌株包括大肠埃希菌ATCC25922(非产ESBLs 株)、大肠埃希菌ATCC35218(产ESBLs株)和肺炎克雷伯菌ATCC700603［2］。

进行ESBLs 确认试验，实验的方法为液体稀释法:头孢他啶、头孢他啶/克拉维酸、头孢噻肟、头孢噻肟/克拉维酸、对以上四种药物中的任何一种的最低抑菌浓度(MIC)，在加入克拉维酸后，与克拉维酸的MIC 值降低3 个以上对倍稀释度，然后判定为ESBLs。

1.3 统计学方法:采用WHONET5.4 软件进行数据分析，以P＜0.05 为差异有统计学意义。

2 结果

大肠埃希菌和肺炎克雷伯菌检出ESBLs(+)的总数为88株，占检出总数的比例为26.67%，两种病菌的具体检出情况:见表1。

表1 两种病菌检出数

通过对各种抗菌药的耐药情况进行分析，可知ESBLs(+)的大肠埃希菌和肺炎克雷伯菌对哌拉西林、头孢他啶棒酸、氨苄西林、头孢克洛、头孢唑林等药物的耐药性比较强，耐药率都超过了60%。两种ESBLs(+)菌对青霉素类、头孢菌素类的耐药性呈高度的原因和内科应用抗菌药物的局限性以及抗菌药的广泛使用有很大关系。此外，ESBLs(+)的菌株对头孢他啶、头孢克洛等药物的耐药率相比较ESBLs(－)菌株来说增加显著，ESBLs(+)和ESBLs(－)对于四环素、复方新诺明等药物的耐药比率差别比较小，ESBLs(+)和ESBLs(－)对诺氟沙星等药物的耐药率在3.57%到28.97%之间。

3 讨论

大肠埃希菌和肺炎克雷伯菌是肠杆菌科细菌中临床分离比较多的细菌种类，寄生的部位通常为人体的呼吸道和肠道，是导致人体感染的条件致病菌，一旦患者免疫功能比较差，则会容易出现感染的情况，而且被感染的患者的病情通常比较严重，而且如果预后不良会威胁患者生命。

在本次研究中，大肠埃希菌和肺炎克雷伯菌占据致病菌总数的比重为52.88%，其中检出ESBLs(+)的总数为88 株，占26.67%。这些数据和孙秋林等人的报道存在差异，主要原因在于各个医院使用的抗菌药物不同，和本院ESBLs(+)的菌株数量较少也有一定关系。阿莫西林克拉维酸钾颗粒、阿莫西林钠舒巴坦钠、哌拉西林钠舒巴坦钠是本院用来进行治疗的常用药物，研究显示ESBLs(+)的大肠埃希菌和肺炎克雷伯菌对哌拉西林、头孢他啶棒酸、氨苄西林、头孢克洛、头孢唑林等药物的耐药性比较强，主要原因在于该类抗菌药物的局限性和过度使用［3］。其次，ESBLs(+)对于某些药物的耐药率会明显增加，ESBLs(+)和ESBLs(－)对于四环素、复方新诺明等药物的耐药比率差别比较小，对于对诺氟沙星等药物的耐药率比国内报道明显降低，主要原因就在与患者免疫功能较低。

目前，我院对于ESBLs(+)菌株的碳青霉烯类的抗菌药物最为敏感，而ESBLs 的大肠埃希菌和肺炎克雷伯菌检测为阴性的菌株对，对于亚胺培南及美罗培南两种药物没有产生耐药性，对阿米卡星等药物的耐药率在0 到6.19%之间，相对来说比较低。ESBLs(－)的肺炎克雷伯菌对于 头孢噻肟、头孢曲松等药物的耐药率都没有超过10.6%，对 头孢克洛、头孢呋辛的耐药率在20.7%和21.9%之间［4］。综合报道和两种病菌的耐药性的研究分析结果可知，ESBLs(+)革兰阴性杆菌在不同的地区和医疗机构的散播情况是不同的，控制较好的情况下能够ESBLs(+)的大肠埃希菌和肺炎克雷伯菌的比率。ESBLs(+)的增加趋势和临床使用的抗菌药物的种类有关。因此，在抗感染治疗中抗菌药物的使用和ESBLs 多的常规检测要同时进行，避免ESBLs 产生并扩散。ESBLs 是一种耐药性比较强的菌株，对青霉素和头孢菌素类药物均有耐药性。所以在选择抗菌类药物进行治疗的过程中，要以微生物室的药敏报告结果和细菌学资料作为参考，监测大肠埃希菌和肺炎克雷伯菌的耐药性，对抗菌药物进行有效控制和合理使用，避免使用无效的抗菌药物并防止ESBLs(+)耐药菌的产生。

［1］ 温 鸿，章虹霞，石 娜，等.医院感染大肠埃希菌和肺炎克雷伯菌的临床分析及耐药监测［J］.温州医学院学报，2013，43(11):757.

［2］ 邹自英，刘 媛，朱 冰，等.临床分离产ESBLs 大肠埃希菌和肺炎克雷伯菌耐药性分析［J］.国际检验医学杂志，2013，34(20):2662.

［3］ 邱令法，裴碧娜.产超广谱β－内酰胺酶大肠埃希菌和肺炎克雷伯菌的检测和耐药性分析［J］.检验医学，2012，27(5):169.

［4］ 陈 聪，叶 英，江 洋，等.安徽地区PMQR 基因阳性大肠埃希菌和肺炎克雷伯菌中ESBLs 流行特征的研究［J］.中国抗生素杂志，2013，38(3):239.