2010年至2014年新余市无偿献血者血液检测结果分析

彭小华 ，李丽平 ，欧阳刚 ，何敏 ，吴青莲

(1、新余市中心血站；2、新余市渝水区珠珊镇卫生院，江西 新余 338000)

预防和控制经输血传播疾病的发生是保障血液及血液制品安全的重要内容，为了解分析新余地区无偿献血者血液感染指标的检测情况，提高无偿献血者血液筛查效率，调整新形势下血液安全策略，有效阻断输血后相关传染病的发生，保证血液安全，笔者对2010年1月1日至2014年12月31日新余市无偿献血者血液检测结果进行回顾调查统计分析，现报道如下。

1 材料与方法

1.1 标本来源 2010年1月1日至2014年12月31日初筛合格的献血者共45078例，初次献血者4329例，固定献血者2256例。符合《献血者健康检查要求》，由采血人员完成每名献血者2管标本的留取，其中一管（带分离胶EDTA-K2抗凝）用于核酸检测（自2012年3月1日起开展NAT筛查），另一管（EDTA-K2抗凝）用于血清学检测。所留标本均在＜4 h离心，置2～8℃冰箱保存。

1.2 仪器与试剂 ALT检测试剂（浙江艾康，深圳迈瑞，长春汇力）；ELISA检测试剂（浙江艾康，厦门新创，北京万泰），核酸检测试剂（上海浩源生物科技有限公司）。检测仪器：C-100干式生化分析仪（艾康生物技术有限公司）；BS-220S全自动生化分析仪 （深圳迈瑞生物医疗电子股份有限公司）；U-ranus-AE-100全自动酶免分析仪(深圳爱康电子公司)；血液核酸筛查平台（上海浩源）：Hamilton STAR全自动混样仪 (瑞士哈美顿博纳图斯股份公司)、Ezbead System-32提取仪 (美国Texas BioGene公司)、7500型实时荧光定量PCR扩增仪(美国ABI公司)。

1.3 方法

1.3.1 初筛检测 硫酸铜比重法筛查血红蛋白，金标试纸法快速筛查HBsAg以及干式法筛查ALT（2011年1月起开展）。

1.3.2 常规检测 HBsAg、抗-HCV、抗-HIV、抗-TP检测均采用ELISA法，ALT检测采用速率法，均使用两种试剂作同步检测。ELISA检测每批实验均设有室内质控对照、阴性对照和阳性对照。结果判断标准：ELISA 检测：S/CO≥1为阳性，0.8≤S/CO＜1为灰区，S/CO＜0.8为阴性；ALT 检测：ALT＞40U/L 者判定为不合格。

1.3.3 NAT筛查 采用实时荧光聚合酶链反应（PCR）方法，由上海浩源生物科技有限公司提供三合一血液筛查试剂，在1个反应管中同时检测HBV-DNA、HCV-RNA以及HIV-1 RNA 3种病毒，并可直接区分病毒种类（CT值＞45为阴性，CT值≤45为阳性）。NAT筛查先用全自动混样仪汇集标本，实行8人份(pool)混合检测，再在提取仪中采用磁珠法提取核酸，然后在扩增仪进行扩增检测，利用软件自动判读结果。每个pool均设内对照，NAT筛查每批实验均设外部对照。混合检测阴性判定为阴性，混合检测阳性进行拆分检测，拆分检测阴性判定为阴性，拆分检测阳性再用血浆标本复测，检测结果阳性判定为阳性，为不合格；检测结果阴性判定为阴性，将核酸检测阳性标本及血浆袋送至卫生部临检中心确证。

1.4 统计学处理 采用卡方检验，P＜0.05或P＜0.01表示差异具有统计学意义。

2 结果

2.1 2010年1月1日至2014年12月31日血液常规检测情况 按不同文化程度、不同性别及不同年龄的无偿献血者血液常规检测情况如表1~表4所示。

2.2 2012年3月1日至2014年12月31日血液NAT筛查情况 共检测酶免阴性和单试剂阳性及灰区标本25727例，检出40例HBV-DNA阳性献血者，HBV-DNA 阳性率为 0.16%（40/25727），未发现HCV-RNA及HIV-1RNA阳性献血者。40例中16例为第1次献血(5例为灰区标本)，占40%，其余24例皆为＞2 次献血，占 60%；男性占 80%（32/40），女性占 20%（8/40）；大中专以上占 60%（24/40），高中及高中以下占 40%（16/40）；18～25 岁占 5%（2/40），26～35 岁 占 22.5%（9/40），36～45 岁 占 52.5%（21/40），46～55 岁占 20%（8/40）。 HBV-DNA 阳性标本自2012年5月份开始送卫生部临检中心检测，共送检30人份，二对半检测结果分类比较见表5。

3 讨论

表1结果显示新余市中心血站2010年1月1日至2014年12月31日无偿献血者血液的常规检测总不合格率为3.78%，各年不合格率比较具有统计学意义(χ2=63.68，P＜0.01)，不合格率由高到低依

次为：ALT（1.81%）＞HBsAg（1.24%）＞抗-TP（0.40%）＞抗-HCV（0.21%）＞抗-HIV（0.12%），ALT 不合格率与萍乡地区的1.8%接近[1]，低于抚州地区的2.36%[2]，是血液报废的首要因素，造成这种情况的原因有多种，但其中的两方面原因可能比较重要：一是ALT初筛与实验室检测所用仪器及试剂的原理与方法学不相同，导致两者所得结果的相关性不佳；二是献血者的血液标本在采集后未能及时送实验室进行检测，在放置较长时间后红细胞破裂而使胞内ALT释放到血浆中，从而引起接近筛查阈值（40U/L）标本出现ALT异常。ALT是肝炎病毒感染的非特异性指标。ALT升高受多种因素影响，但在淘汰不合格血液，控制输血后肝炎的发生还是起到了重要作用。除了病理因素外，一些非病理因素也会引起ALT升高，如饮酒、高脂饮食、睡眠不足、剧烈运动、服药等均可造成ALT升高，因此必须重视体检及ALT初筛环节，加强献血前注意事项的宣传工作。应不断强化ALT的初筛和复检之间的比对和校准，建立本站实验室的干化学法和速率法之间ALT值的关系，与此同时严格要求工作人员标准化操作。ALT不同年度呈明显差异，可能是由于自2011年开展对街头献血和团体献血均实行ALT初筛检测，使ALT的不合格率显著下降有关，有效的减少了血液报废。抗-HIV不同年度呈明显差异，可能与城市人口流动性相对不高、人们的思想意识提高、低危固定无偿献血者增多、万泰试剂更换为抗原抗体检测模式有关。经新余市疾病预防控制中心WB法确认阳性3例，不确定5例，确认阴性38例。酶免筛查阳性、确认阳性和不确定主要集中在18~25岁年龄段，各职业均有初筛阳性出现，但主要集中在学生中（50%）。

表1 各年份无偿献血者血液常规检测各项指标不合格率比较[n（%）]

表2 不同文化程度献血者常规检测各项指标不合格率比较[n（%）]

表3 不同性别献血者常规检测各项指标不合格率比较[n（%）]

表4 不同年龄段献血者常规检测各项指标不合格率比较[n（%）]

表5 电化学发光法（ECLIA）二对半检测结果分类

HBsAg阳性是血液不合格的第二大指标，占总不合格率的32.7%（818/1706）。对献血者在献血前用金标试纸法初筛，能有效筛选出大部分HBsAg阳性，但在实验室用ELISA方法检测还有阳性检出，表明金标试纸法仍有漏检现象[3]。因为受采血车上温湿度、反应观察时间等条件影响，还是有一部分标本会被实验室检测为阳性，所以在控制好采血车上环境的条件下尽量选择灵敏度高、特异性好的试剂条，可以有效的降低HBsAg阳性率。本站对街头献血和团体献血每位献血者献血前都实行初筛，同时实行采血前微机结果查询，使既往献血HBsAg阳性者和试纸初筛阳性者得以淘汰，减少了给后期运输、检测等各环节带来的污染风险。

表2结果显示不同文化程度献血者常规检测总不合格率比较差异具有统计学意义(χ2=40.71，P＜0.01)，大中专组人数最多，不合格率最低，与其他组两两比较差异具有统计学意义 （与本科以上组、高中组、 初中以下组比较，χ2分别为 26.94、14.09、24.31，P值都＜0.01），我市是民办高校示范基地和新兴工业城市，学生和工人是我市献血的主力军，具有较高文化程度，具备一定的日常生活医学常识，自我保护意识较强，同时在献血前具有较强的自我排除能力。因此，大力做好宣传，鼓励更多的学生和工人积极参与无偿献血活动，并使其成为固定献血者。

表3结果显示男性献血者的总不合格率、ALT、HBsAg、抗-TP不合格率高于女性献血者，这可能与男性在工作、饮食、作息、吸烟、社会活动等方面与女性献血者有区别所致。

表4显示不同年龄段献血者常规筛查各项指标总不合格率比较差异具有统计学意义 (χ2=65.03，P＜0.01)， 呈现波峰图形，18～25 岁年龄组和 46～55岁年龄组不合格率最低，该群主要以学生和中老年固定献血者为主，有着良好的身体机能及生活习惯，属于传播的低危人群；而26～35岁年龄组和36～45岁年龄组献血者的不合格率较高，可能与该年龄段具有较好的社会地位和经济基础等有关，交际广泛，感染的机会也就相应增加。

我站血液筛查核酸检测实验室于2012年通过江西省卫生厅验收并获得合格证书，成为江西省采供血机构继江西省血液中心、南昌市血站的第三家核酸检测实验室[4]。本研究结果显示，酶免阴性和单试剂阳性及灰区标本共25727例中经NAT检测未发现HCV-RNA和HIV-1 RNA阳性，发现40例HBV-DNA阳性，阳性率为0.16%，高于合肥地区的0.13%[5]及沈阳地区的0.014%[6]（上述两个地区均使用上海浩源生物科技有限公司的核酸筛查试剂），与南昌市血站的0.18%接近（采用罗氏诊断COBAS S-201血液核酸筛查平台）[7]。这说明目前新余市的临床用血经常规筛查后经输血传播疾病的风险主要为HBV感染，与我国乙肝高发的国情相符。据2006年全国肝炎流行病学调查，我国一般人群HB-sAg携带率为7.18%[8]。HBV进行ELISA检测漏检的原因主要包括“窗口期”感染、病毒突变以及隐匿性 HBV 感染（OBI）[9]，其中以 OBI最为棘手，对临床输血危害也最大。表5结果显示了乙肝隐匿性感染和慢性乙肝携带者二对半检测结果不同的比例。目前，我国采供血机构对献血者HBsAg进行筛查所用国产试剂的灵敏度约为0.5ng/ml，进口试剂的灵敏度约为0.1～0.2ng/ml，而一般认为0.1ng/ml HBsAg即具有传染性[10]。若只对献血者进行常规ELISA检测，就有可能引起HBV漏检而引发输血感染，而NAT检测的灵敏度高，可有效弥补常规ELISA方法检测HBsAg的不足，最大限度避免OBI引起输血感染，起到降低输血残余风险，提高输血安全的作用。目前，输血安全面临的主要风险之一就是被筛查病毒的“窗口期”。免疫学检测3种病毒的平均窗口期分别为：HBV：45d，HCV：72d，HIV：22d。而应用NAT技术筛查献血者，相应的可将献血员传播以上病毒性疾病的概率分别降低20%、82%和50%，HBV、HCV、HIV病毒的窗口期较抗体检测分别提前：9d、59d、11d[11]。 因此，作为常规 ELISA 筛查方法的有效补充，开展高灵敏度和高特异性的NAT筛查可有效降低经输血感染传播疾病的风险，对于安全输血具有十分重要的意义。

综上所述，为确保血液质量，保证血液安全，从自愿无偿献血的低危人群和固定献血者中采集血液是血液安全的重要前提。为保证输血安全，我站相应地制定了以下相关措施：⑴加强血站员工培训，建立和完善以质量、安全为核心的系统规范化培训和考核制度，不断提高员工业务素质，强化质量、安全和服务意识；⑵严格把关献血员体检初筛环节，严格按照献血者健康检查要求进行体检，详细询问既往病史及现在健康状况，对献血员献血前的饮食和休息状况要特别注意询问，确保低危献血者献血；⑶稳定并壮大固定献血者队伍，提高固定献血人员比例，推行预约献血，以便献血员合理安排休息和饮食从而更有利于血液质量的提高。“团体预约献血”模式是目前我市缓解血源紧张、减少血液报废的有效管理模式；⑷采用高灵敏度和高特异性的方法和试剂进行检测，杜绝血液漏检和减少血液报废；⑸做好仪器、设备投入维护校准工作；⑹加强质量管理，强化监督管理机制，实施持续改进措施，以最大能力遏制输血传染病的传播，有效保证血液质量安全，促进无偿献血事业健康可持续发展。

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