平均红细胞体积在α地中海贫血筛查中的价值探讨

吴敏

(临川区第一人民医院检验科，江西 临川344100)

α地中海贫血（α-地贫）主要是由于α-珠蛋白基因缺失（缺失型）或点突变（非缺失型）导致珠蛋白肽链合成减少或缺失而引起的一种溶血性贫血，呈常染色体隐性遗传[1，2]。重型α地贫可致死胎、死产、孕高征及产后大出血等；轻型α地贫常无临床症状，血常规检查MCV轻度下降；静止型α地贫无临床症状，MCV可正常或轻度下降。我省是地贫的较高发区，做好婚前医学检查，实行地贫筛查，更是我市婚检的主要任务。为此本医院从2009年2月开始使用血液分析仪测定平均红细胞体积(MCV)、平均血红蛋白浓度（MCH）及采用血红蛋白电泳分析对婚检人群进行地贫筛查，现本文就平均红细胞体积回顾性探讨其在筛查轻型α地贫中的价值。

1 资料与方法

1.1 一般资料 2011年1月至2015年5月来本院进行产检、婚检或体检，年龄20~40岁之间的人群进行地贫筛查，对其中具有α地贫高风险的97例进行地贫基因检测，回顾分析血液平均红细胞体积检查和血红蛋白电泳检测结果。

1.2 方法

1.2.1 血细胞分析 采用日本Sysmex XT-200i全自动五分类血液分析仪测定，以平均红细胞体积（MCV）＜82fl作为 α-地贫初筛的标准[3]。

1.2.2 血红蛋白电泳测定 采用法国Sebia公司生产的Minicap全自动毛细管电泳仪及其配套血红蛋白电泳试剂盒，以血红蛋白HbA2＜2.0作为α-地贫初筛的标准。

1.2.3全血DNA提取 采用离心柱法，试剂盒采用深圳亚能生物有限公司生产，严格按操作说明进行DNA基因组的提取。

1.2.4 α-地贫基因诊断 ⑴缺失型α-地贫基因诊断： 采用 gap-PCR法检测-SEA/aa、aa/-a3，7及-a4，2/aa 3种α珠蛋白基因常见缺失型[4]；⑵非缺失型α-地贫基因诊断：采用PCR结合膜反向点杂交RDB法诊断3种点突变。试剂均采用深圳亚能生物有限公司生产的检测试剂盒。

1.3 评价指标 灵敏度(sensitivity，Se)=真阳性例数/(真阳性例数+假阴性例数)×100%；特异度(specificity，Sp)=真阴性例数/(真阴性例数+假阳性例数)×100%；阳性预测值(+PV)：在诊断试验阳性的受试者中，标准诊断有病的病例(真阳性)所占的比例；阴性预测值(-PV)：在诊断试验为阴性的受试者中，标准诊断证实无病的受试者(真阴性)所占的比例。

2 结果

2.1 平均红细胞体积（MCV）在α地中海贫血筛查中的作用 地中海贫血是一种小细胞低色素性贫血，临床上血细胞检测常出现RBC升高时伴有MCV下降。从表1可以看出，MCV降低的75人最终通过基因分析确诊为α地中海贫血的共计68人，筛查试验阴性的22人基因确诊后有22人为阴性，实验敏感度和实验特异度分别为100%和75.86%，阳性预测值和阴性预测值分别为90.67%和100%。

2.2 血红蛋白电泳分析在α地中海贫血筛查中的作用 从表2可见采用血红蛋白电泳进行α地中海贫血筛查，实验敏感度和实验特异度分别为86.76%和65.52%，阳性预测值和阴性预测值分别为85.51%和67.86%，这四项指标均低于平均红细胞体积的检测效果。

表1 MCV降低在α地中海贫血筛查中的检测效能

表2 血红蛋白电泳分析在α地中海贫血筛查中的检测效能

3 讨论

地贫在我国南方地区发病率很高，其中广西、广东、江西、四川发病率分别高达14.95%、4.11%、2.60%、1.92%。α-地中海贫血是一种单基因遗传病，临床表现为遗传性溶血性贫血，是我国长江以南发病率最高、影响最大的遗传病之一[5，6]。目前无根治方法，重型地贫患儿常给社会和家庭带来沉重的经济负担和精神压力，尽早发现和及时终止妊娠是唯一途径[7]。随着流动人口的不断增加，医务人员对地贫的逐渐认识和重视，地贫的检出率也逐年上升[8]。但大部分患者属于轻型地中海贫血，因无明显临床症状，所以这些人在婚检前根本就不知道自己是地中海贫血基因携带者，也不知道会将此病遗传给下一代。当夫妻双方都为东南亚型缺失(--SEA/aa)地贫，对子代则不论妊娠次数和胎儿性别，每次妊娠均有25%的可能性是重型α-地贫患儿和50%的可能性是轻型α-地贫患儿，只有25%的可能是正常患儿[9]，对人口质量构成严重威胁。

婚前、孕前产前筛查和诊断是预防重症α-地贫患儿出生的有效措施，目前用于明确α地贫诊断的方法主要是gap-PCR结合其他分子生物学技术检测α地贫基因。可分子生物学技术检测条件要求较高，方法繁琐，所需时间也较长，价格昂贵，不适宜广泛应用于各基层医院[10]。随着血细胞分析仪的普遍应用，血液学常规检测所提供的MCV及MCH等红细胞参数在地贫中的变化已日益受到重视。国内许多基层医院已在使用常规血细胞分析仪的多项参数进行地贫筛查。我院也自2009年2月开始使用血液学常规检测的平均红细胞体积(MCV)、平均血红蛋白浓度（MCH）及血红蛋白电泳分析对婚检人群进行地贫筛查。本研究通过回顾性分析97例α地贫筛查试验阳性者的血液平均红细胞体积和血红蛋白电泳结果发现α地中海贫血患者MCV明显低于正常人，以平均红细胞体积（MCV）＜82fl作为α-地贫初筛的标准，从表1可以看出，MCV降低的75例最终通过基因分析确诊为α地中海贫血的共计68例，筛查试验阴性的22例基因确诊后有22例为阴性，实验敏感度和实验特异度分别为100%和75.86%，阳性预测值和阴性预测值分别为90.67%和100%。而以血红蛋白电泳分析HbA2＜2.0进行α-地贫基因确诊，从表2可见实验敏感度和特异度分别为86.76%和65.52%，阳性预测值和阴性预测值分别为85.51%和67.86%，比较这两种筛查方法的检测结果可发现，我们采用红细胞平均体积MCV检测α地中海贫血具有的灵敏度、特异度、阳性预测值和阴性预测值均较高。此外，Hb电泳对静止型α-地贫和标准型--SEA/aa不能进行有效诊断，单纯--SEA/aa携带者主要表现为MCV值降低，但Hb电泳结果正常，因此仅检测Hb电泳易造成漏检。若采用红细胞平均体积MCV联合血红蛋白电泳、红细胞脆性等方法虽可提高特异性和敏感性，但需多个实验数据联合分析，增加了患者负担，且需时较长。

目前，在MCV、血红蛋白电泳及红细胞脆性试验法三种地贫的筛查方法中，MCV法相对敏感性和特异性较高，以上资料显示，以平均红细胞体积（MCV）＜82fl作为α-地贫筛查标准未出现漏筛，即假阴性为零。目前大部分市、县级医院都配有血液自动分析仪，MCV测定均由仪器完成，人为误差也减少，比较适合医疗设备较缺乏的各级基层医院进行地贫筛查。因此建议对地中海贫血高发区人群在进行血细胞分析时如有MCV＜82fl时，在排出缺铁性贫血和寄生虫感染引起的贫血时，应高度怀疑为地中海贫血。如果夫妻双方中有一方仅为α地中海贫血携带者时，那么另外一方只需检测平均红细胞体积（MCV）即可，必要时进行地贫基因检测，避免重症α地中海贫血患儿的出生，提高出生人口素质，减少出生缺陷。

[1]Ip HW，So CC.Diagnosis and prevention of thalassemia[J].Crit Rev Clin Lab Sci，2013，50(6)：125-141.

[2]Martin A，Thompson AA.Thalassemias[J].Pediatr Clin North Am，2013，60(6)：1383-1391.

[3]毛锦芳.MCV、MCH联合Hb电泳在地中海贫血筛查中的临床应用价值[J].现代预防医学，2012，39（14）：3649-3650.

[4]张春丽，张宁.1665例2～14岁儿童地中海贫血筛查分析[J].中国妇幼保健，2012，27(5)：706-707.

[5]刘红宇，王繁，甘建玲，等.萍乡地区孕妇产前地中海贫血筛查及基因诊断[J].实验与检验医学，2014，32（5）：526-527.

[6]徐湘民.地中海贫血预防控制操作指南[M].北京：人民军医出版社，2011：11-33.

[7]Liu RR，Wang MY，Lai YR.Analysis of Gg-158(CRT)polymorphism in hemoglobin E/b-thalassemia major in Southern China[J].JHematol Oncol，2010， 3(1)：29-30.

[8]游雪云，刘艳秋，吴敏.毛细管电泳在β地中海贫血中的应用研究[J].实验与检验医学，2014，32（5）：517-519.

[9]蓝柳燕，王君，林漫燕.822例地中海贫血患者基因检测结果分析[J].实验与检验医学，2011，29（3）：212-214.

[10]郑萍，张琳，张鲁芳.巨幼细胞性贫血骨髓和外周血检查38例临床分析[J].实用诊断与治疗杂志，2006，20(1)：66-67.