PDGFRα和PDGFRβ在食管鳞癌中的表达及临床病理学意义

刘欣欣，杨昭婷，王丽强，玄延花＊

（1.延边大学医学院2013级预防医学专业，吉林延吉133002；2.延边大学医学院病理学教研室；3.吉林大学中日联谊医院内镜中心）

PDGFRα和PDGFRβ在食管鳞癌中的表达及临床病理学意义

刘欣欣1，杨昭婷2，王丽强3，玄延花2＊

（1.延边大学医学院2013级预防医学专业，吉林延吉133002；2.延边大学医学院病理学教研室；3.吉林大学中日联谊医院内镜中心）

目的观察血小板衍生生长因子受体－α（platelet－derived growth factor receptor－α，PDGFRα）和血小板衍生生长因子受体－β（platelet－derived growth factor receptor－β，PDGFRβ）在食管鳞癌组织中的表达，探讨其在食管鳞癌发生中的表达以及与临床病理特征及患者预后的相关性。方法 采用免疫组化EnVision法检测PDGFRα及PDGFRβ蛋白在131例食管鳞癌组织中的表达，分析二者的表达与患者年龄、性别、肿瘤大小、分化程度、T分期、淋巴结转移、远处转移、TNM分期、微血管密度、间质是否活化、CD68、复发、化疗、放疗情况和生存率的关系。结果 PDGFRα和PDGFRβ主要在食管鳞癌间质的成纤维细胞和炎症细胞中表达。PDGFRα在食管鳞癌活化的间质组织中的表达率明显高于未活化间质组织（P＜0.05）。PDGFRβ在低分化的食管鳞癌组织中阳性表达率明显高于高分化和中分化组织（P＜0.05）；在进展期（T2－4）组织中的表达率明显高于早期鳞癌组织（P＜0.01）；在活化的间质组织中的阳性表达率明显高于未活化间质组织（P＜0.05）。PDGFRα（P＜0.01）和PDGFRβ（P＜0.05）呈阳性的食管鳞癌患者生存率分别低于阴性者。PDGFRα和PDGFRβ蛋白在食管鳞癌组织中的表达与患者年龄、性别、肿瘤大小、淋巴结转移、远处转移、TNM分期、微血管密度、CD68、复发、化疗和放疗情况均无相关。结论 PDGFRα和PDGFRβ与食管鳞癌间质的活化、肿瘤分化程度和进展以及患者的生存率密切相关。因此，PDGFRα与PDGFRβ在食管鳞癌中的表达对评价患者的预后有一定参考价值。

食管鳞癌；血小板衍生生长因子受体－α；血小板衍生生长因子受体－β

（Chin J Lab Diagn，2015，19：1642）

食管癌是最常见的恶性肿瘤之一，其发病率位居世界第八位，死亡率位居世界第六位，中国的食管癌的新发病例和死亡率均居世界第一位［1］。在我国食管癌患者组织学类型约95%以上为鳞状细胞癌。虽然对食管鳞癌的治疗已经达到一定水平，但大部分患者被发现时已是晚期且预后较差。

PDGFR可分α、β两种类型，其属于酪氨酸蛋白激酶受体家族的成员。PDGFRα可以激活多种蛋白质的磷酸化途径，传导生长信号给胞质内部，诱导多种基因的表达、促进DNA合成，引起细胞的分裂及增殖，从而可以促进肿瘤血管的生成［2］。PDGFRα和PDGFRβ在肝癌、肺腺癌、结直肠癌、膀胱癌等中都参与到了肿瘤形成的过程［3］，但是PDGFRα和PDGFRβ在食管鳞癌中表达的报道甚少，本研究采用免疫组织化学染色法观察PDGFRα和PDGFRβ在食管鳞癌组织中的表达，并分析它们的临床病理学意义。

1 材料和方法

1.1 材料 131例食管鳞癌组织来源于上海芯超生物公司和延边大学附属医院病理科从1998年到2008年接受了手术切除治疗的原发性食管鳞癌病人的组织标本。131例患者中，男127例，女4例，年龄＜65岁34例，年龄≥65岁97例，根据AJCC 2009年肿瘤分期标准，131例食管鳞癌TNM分期：Ⅰ期20例、Ⅱ期46例、Ⅲ期47例、Ⅳ期18例。

1.2 免疫组化染色 免疫组化染色采用二步法，检测试剂盒为中杉公司产品，PDGFRα抗体（1∶100）为Cell Signaling Technology公司产品，PDGFRβ抗体（1∶100）为Abcam公司产品。染色步骤按常规操作步骤进行。为证明抗体免疫组化检测的特异性，实验中应用了兔IgG代替一抗作为对照，结果为阴性。

1.3 结果判定 染色的结果根据阳性细胞所占比例，将染色结果分为阳性和阴性。阳性细胞数超过20%为阳性，阳性细胞数低于20%为阴性。肿瘤微血管密度的判定方法：在光镜下计算在五个不同的视野内微血管的总数＜60个为低密度，≥60个为高密度。根据未成熟的纤维细胞所占比例将食管鳞癌间质分为活化与未活化。成熟的纤维细胞镜下胞体较小，呈长梭形；未成熟的纤维细胞胞体较大，胞核呈椭圆形。在间质组织中未成熟纤维细胞超过50%为间质未活化，未成熟细胞低于50%为间质活化［4］。

1.4 统计学方法 应用SSPS 16.0软件进行统计学分析，PDGFR蛋白表达率与临床病理学参数间的比较应用χ2检验，采用Kaplan－Meier法绘制PDGFRα和PDGFRβ表达与患者术后生存时间的曲线，P＜0.05差异具有统计学意义。

2 结果

PDGFRα和PDGFRβ主要表达于食管鳞癌间质的成纤维细胞和炎症细胞中（图1）。PDGFRα在食管鳞癌活化的间质组织中（67／74，90.5%）表达率明显高于未活化组织（42／57，73.7%）（P＝0.038）。PDGFRβ在低分化组织中（22／26，84.6%）阳性表达率明显高于高分化组织（42.1%）和中分化组织（44.2%）（P＝0.014）；在进展期（T2－4）组织中（61／106，57.5%）表达率明显高于早期鳞癌（6／25，24.0%）（P＝0.003）；在活化的间质组织中（45／74，60.8%）阳性表达率明显高于未活化组织（24／57，42.1%）（P＝0.022）。PDGFRα和PDGFRβ蛋白在食管鳞癌组织中的表达与患者年龄、性别、肿瘤大小、淋巴结转移、远处转移、TNM分期、微血管密度、CD68、复发、化疗和放疗情况均无关（P＞0.05）（表1）。

PDGFRα（P＝0.001）和PDGFRβ（P＝0.044）阳性的食管鳞癌患者生存率明显低于阴性者（图2）。

图1 食管鳞癌组织中PDGFRα（A）和PDGFRβ（B）的表达，EnVision法

表1 PDGFRα和PDGFRβ在食管鳞癌组织中的表达与临床病理学参数的关系

图2 PDGFRα和PDGFRβ蛋白表达与食管鳞癌患者总生存率间的关系

3 讨论

成纤维细胞在肿瘤的恶性进程中可以被血小板衍生生长因子等转化为癌相关成纤维细胞（cancerassociated fibroblast，CAFs），CAFs可以进一步促进肿瘤的发生、生长、侵袭和转移［5］。PDGFRα和PDGFRβ是CAFs的两个重要的生物学标记，参与肿瘤细胞增殖与迁移的过程。PDGFRα在多种恶性肿瘤中呈异常的高表达，如肺癌、前列腺癌和乳腺癌等。易村犍等［6］报道PDGFRα在卵巢上皮性癌间质细胞中的阳性表达率显著高于癌细胞中的阳性表达率。在本研究中，PDGFRα在食管鳞癌活化的间质组织中表达率明显高于未活化组织，说明PDGFRα可能通过加速间质增生与微血管的生长进而促进肿瘤的增殖与迁移过程。

PDGFRβ是CAFs另一重要生物学标记物，近些年研究发现，PDGFRβ在胃癌、结肠癌、肺癌等恶性肿瘤间质的成纤维细胞中呈异常高表达［7］。PDGFRβ蛋白表达与非小细胞肺癌的分化程度密切相关；PDGFRβ在Ⅱ、Ⅲ期肺癌组织中的表达情况显著高于Ⅰ期的肺癌患者，说明PDGFRβ的过表达与肺癌的临床分期呈正相关［8］。本实验结果，在食管鳞癌组织中，PDGFRβ表达随肿瘤恶性程度增加而增高，提示PDGFRβ可能作为预测食管鳞癌进展的参考标志。

研究表明，PDGFRα和PDGFRβ蛋白可以初步预测卵巢癌、结直肠癌、乳腺癌的预后，即PDGFRα和PDGFRβ过表达的肿瘤患者生存期短、预后差［4］。朱浩图等［9］在122例结直肠癌组织中检测到PDGFRβ蛋白表达，且PDGFRβ的过表达提示结直肠癌患者的预后不良。本研究发现PDGFRα和PDGFRβ蛋白过表达与食管鳞癌患者的较短生存期关系密切，即PDGFRα和PDGFRβ阳性患者生存时间明显短于阴性患者，以上结果提示，PDGFRα和β蛋白过表达可作为食管鳞癌恶性潜能及肿瘤进展的有效分子指标。

综上所述，PDGFRα和PDGFRβ与食管鳞癌间质的活化、肿瘤分化程度和进展以及患者的生存率密切相关。因此，PDGFRα与PDGFRβ在食管鳞癌中的表达对评价患者的预后有一定参考价值。

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［6］易村犍，李 莉，陈克明，等.C－Kit和PDGFR－α在卵巢上皮性癌肿瘤细胞及肿瘤间质中的表达差异［J］.中国全科医学，2010，13（23）：1007.

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The significance of PDGFRαand PDGFRβin esophageal squamous cell carcinoma expression and clinical pathology

IU Xin－xin，YANG Zhao－ting，WANG Li－qiang，et al.（A level 2013 Preventive Medicine Specialty，Yanbian University College of Medicine，Yanji 133002，China）

ObjectiveTo observe the expression of PDGFRαand PDGFRβproteins in esophageal squamous cell carcinoma（ESCC），and to explore the role of them in ESCC and prognosis.Methods The expression of PDGFRαand PDGFRβwere detected in 131cases of ESCC by immunohistochemical stain，and analysed the relationship between the expression of PDGFRαand PDGFRβand patient＇s age，gender，tumor size，differentiation，T stage，lymph node metastasis，distant metastasis，TNM stage，microvascular density，interstitial whether activation，recur，CD68，chemotherapy，RT and survival.Results PDGFRαand PDGFRβmainly expressed in the stromal fibroblasts and inflammatory cells of ESCC.The expression rate of PDGFRαin the activated interstitial tissue of ESCC was obviously higher than the non－activated tissue（P＜0.05）.The positive rate of PDGFRβwas higher in poorly differentiated ESCC than in well and moderately differentiated cases（P＜0.05）.The positive rate of PDGFRβprotein was higher in advanced－stage（T2－4）ESCC than in early－stage cases（P＜0.01）.Similarly，the positive rate of PDGFRβprotein was higher in the activated interstitial tissue than in the non－activated tissue（P＜0.05）.PDGFRα（P＜0.01）and PDGFRβ（P＜0.05）expression positive patients survival rate were lower than the negative groups.There was no significant relation between the expression of PDGFRαor PDGFRβand patient＇s age，gender，tumor size，lymph node metastasis，distant metastasis，TNM stage，microvascular density，recur，CD68，chemotherapy and RT.Conclusion PDGFRαand PDGFRβexpression were closely correlated with the activated interstitial tissue，differentiation degrees，evolvement，survival of ESCC.Therefore，PDGFRαand PDGFRβoverexpression could be as the effective biomarker for poor prognosis of ESCC.

esophageal squamous cell carcinoma；PDGFRα；PDGFRβ

R735.1

A

2014－11－17）

1007－4287（2015）10－1642－04

国家自然科学基金（81160315，81460390）；延边大学大学生创新创业训练计划项目基金（ydbksky2015065）

＊通讯作者