四季感冒片中甘草薄层鉴别方法研究

李 敏

(辽宁兴海制药有限公司，辽宁 盘锦 124013)



四季感冒片中甘草薄层鉴别方法研究

李 敏

(辽宁兴海制药有限公司，辽宁 盘锦 124013)

目的：通过对供试品溶液的制备处理及展开剂和点样量的筛选研究，确定四季感冒片中甘草薄层鉴别方法。方法：以甘草对照药材为对照，甘草阴性对照，采用薄层色谱法进行鉴别研究。结果：供试品色谱中，相同位置检查出与甘草对照药材相同颜色的斑点；甘草阴性对照无干扰。结论：采用薄层色谱方法斑点清晰，专属性强，重现性好，可作为该制剂的甘草质量控制方法。

四季感冒片；甘草；薄层

四季感冒片执行标准为YBZ17702006，无甘草鉴别项，通过实验拟在标准中增加甘草鉴别，达到更严格的质量控制。四季感冒片，由桔梗、连翘、甘草等药味组成，具有清热解表的作用，用于治疗四季风寒感冒引起的发热头痛、鼻流清涕、咳嗽口干、咽喉疼痛、恶心厌食等疾病。为提高药品的质量控制要求，拟采用薄层色谱法对处方中甘草进行实验研究。

1 仪器与试药

1.1 仪器

电热恒温干燥箱、层析缸、水浴锅、蒸发皿、冷凝管、超声波清洗器。

1.2 试剂

甲醇、乙酸乙酯、乙醚、冰醋酸、碳酸钠、硫酸、乙醇、正己烷、正丁醇、盐酸、试剂均为分析纯；硅胶G薄层板(青岛海洋化工有限公司生产)。甘草对照药材，批号：120904-201318，中国食品药品检定研究院提供。四季感冒片，批号：20140801、20140802、20140803，辽宁兴海制药有限公司提供。

2 方法

2.1 供试品溶液制备方法筛选

第一法：取本品5片，除去薄膜衣，研细，加甲醇30mL，加热回流30min，滤过，滤液蒸干，残渣加水20mL溶解，采用乙酸乙酯振摇提取3次，每次20mL，合并乙酸乙酯液；采用2%碳酸钠试液振摇提取3次，每次25mL，合并碱液；加HCl调pH至1～2，采用乙酸乙酯振摇提取3次，每次20mL，合并乙酸乙酯液，蒸干，残渣加甲醇2mL溶解，作为供试品溶液。

第二法：取本品5片，除去薄膜衣，研细，加水饱和正丁醇30mL，超声处理(功率160W，频率50Hz)20min，滤过，滤液蒸干，残渣加甲醇0.5mL，作为供试品溶液[1]。

2.2 对照药材溶液制备

取甘草对照药材1.5g，加乙醚50mL，加热回流30min，乙醚液弃去，药渣挥干，加甲醇2mL使溶解，作为对照药材溶液。

2.3 甘草阴性对照溶液制备

四季感冒片按处方中除去甘草，根据处方工艺比例制成甘草阴性对照样品。按供试品制备处理第一法制成阴性对照溶液。

2.4 点样量筛选

供试品溶液点样量分别选用5μL、8μL、10μL点样；对照药材溶液分别选用1μL、2μL、5μL点样。

2.5 展开剂配制方法筛选

第一种展开系统：乙酸乙酯-冰醋酸-甲醇-水(15∶1∶1∶2)。

第二种展开系统：正己烷-乙酸乙酯-冰醋酸(10∶2∶0.4)[2]。

2.6 显色剂

显色剂为10%硫酸乙醇溶液，显色条件为加热105℃至斑点显色清晰。

3 结果

3.1 薄层色谱结果

用乙酸乙酯-冰醋酸-甲醇-水(15∶1∶1∶2)展开，选用供试品制备方法第一法，供试品、阴性对照、对照药材点样量筛选结果见图1。

供试品溶液制备采用第一种及第二种制备方法，展开剂选用正己烷-乙酸乙酯-冰醋酸(10∶2∶0.4)，结果见图2。

3.2 供试品制备方法筛选

展开剂用乙酸乙酯-冰醋酸-甲醇-水(15∶1∶1∶2)，供试品制备方法为第一法和第二法，对照药材点样量筛选为10μL、15μL，结果见图3、图4。

图1 第一种展开系统薄层色谱

图2 第二种展开系统薄层色谱

图3 供试品制备方法筛选(一)

图4 供试品制备方法筛选(二)

3.3 三批供试品薄层图谱

供试品制备采用第一法，供试品及阴性点样量为8μL，对照药材为2μL，展开剂为乙酸乙酯-冰醋酸-甲醇-水(15∶1∶1∶2)，三批供试品的薄层图谱见图5。

图5 三批供试品薄层图谱

4 讨论

由图1可见，采用第一种展开系统薄层色谱斑点清晰，采用第二种展开系统薄层色谱斑点几乎未显现，因此选择第一种展开系统鉴别四季感冒片中甘草薄层；图1、图2同时分别对点样量进行筛选，供试品点样量筛选为5～10μL。由图1可见，8uL点样量斑点清晰可见，因此供试品点样量暂定为8μL，阴性对照定为10μL，继续进行实验。

图3、图4为供试品制备方法筛选，供试品采用第一种制备方法斑点更为清晰，因此供试品制备方法采用第一法；图3、图4供试品点样量为8μL，斑点清晰，重现性好、阴性对照为10μL，阴性无干扰，对照药材为8μL斑点清晰可见，根据实验方便及节省资源原则将对照药材点样量定为2μL。四季感冒片供试品制备方法定为第一法，供试品点样量定为8μL，对照药材点样量定为2μL，阴性对照点样量定为10μL，展开剂定为第一系统，实验结果如图5，可见三批供试品斑点清晰、专属性强、重现性好。因此，四季感冒片中甘草薄层鉴别方法定为取本品5片，除去薄膜衣，研细，加甲醇30mL，加热回流30min，滤过，滤液蒸干，残渣加水20mL使溶解，采用乙酸乙酯振摇提取3次，每次20mL，合并乙酸乙酯液；采用2%碳酸钠试液振摇提取3次，每次25mL，合并碱液；加HCL调pH至1～2，采用乙酸乙酯振摇提取3次，每次20mL，合并乙酸乙酯液，蒸干，残渣加甲醇2mL溶解，作为供试品溶液。

同时，取甘草对照药材1.5g,加乙醚50mL，加热回流30min，乙醚液弃去，药渣挥干，加甲醇2mL使溶解，作为对照药材溶液。按薄层色谱法(《中国药典》2010版一部附录VIB)试验，吸取供试品溶液8μL，对照药材溶液2μL，分别点于同一硅胶G薄层板，以乙酸乙酯-冰醋酸-甲醇-水(15∶1∶1∶2)为展开剂，展开，取出，晾干，喷以10%硫酸乙醇溶液，加热105℃至斑点显色清晰。与对照药材色谱相应位置上，供试品色谱中显示相同颜色的斑点。

[1] 石克,冉海琳.桑菊感冒冲剂中连翘、甘草的薄层色谱鉴别[J].海峡药学，2009,21(9):43-44.

[2] 刘敬,赵斌,王琼.克咳胶囊中甘草薄层鉴别方法的改进[J].中国民族民间医药,2012(8):39-40.

[3] 国家药典委员会.中国药典[M].一部.北京：中国医药科技出版社，2010.

(责任编辑：李岚春)

2014-12-18

李敏(1978-)，女，辽宁兴海制药有限公司工程师，研究方向为新药注册与研发。

R286

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1673-2197(2015)08-0026-02

10.11954/ytctyy.201508013