鸡骨草胶囊中栀子提取工艺研究及有效成分含量测定

林 威，覃 葆，刘 泉，梁 悦,韦佩妍

(广西中医药大学，广西 南宁 530001)



鸡骨草胶囊中栀子提取工艺研究及有效成分含量测定

林 威，覃 葆*，刘 泉，梁 悦,韦佩妍

(广西中医药大学，广西 南宁 530001)

目的：探讨鸡骨草胶囊中主要原料药栀子的含量测定鸡骨草胶囊方法及提取工艺。方法：采用高效液相色谱法测定鸡骨草胶囊有效成分含量，应用正交设计法优选栀子提取工艺。结果：栀子苷在0.06～1.2μg(r=0.999 8) 范围内线性关系良好，平均加样回收率为101.28%(RSD=1.18)。结论：该方法简便、有效、准确、重复性好，可用于鸡骨草胶囊有效成分的提取和测定。

鸡骨草胶囊；栀子苷；提取工艺；含量测定

鸡骨草胶囊由三七、人工牛黄、猪胆汁、牛至、鸡骨草、白芍、大枣、栀子、茵陈、枸杞子等十味中药组成，具有疏肝利胆、清热解毒的作用。目前对鸡骨草胶囊的研究中，栀子苷含量测定较多[2-4]，而栀子的提取工艺研究较少，在当今中药工业生产过程中，很多企业不注重原料药的前处理，药材未经过合适的处理就进行投料生产，造成药材不能被最有效地利用。本实验根据鸡骨草胶囊现有的工艺方法，系统分析鸡骨草胶囊中的主要原料药材栀子，通过正交试验优选该药材的提取工艺，为企业改进原料药前处理及药物规范化生产提供参考。

1 材料

Agilent1100高效液相色谱系统(包括G1311A Quatpunp、G1314A VWD、G1316A Collum)；LG16-WA 高速台式离心机(北京京立离心机有限公司)；BP211D电子分析天平(德国赛多利斯)；KQ520003型超声清洗器(昆明市超声仪器有限公司)；DFY-300 300克摇摆式高速万能粉碎机(温岭市林大机械有限公司)。栀子苷对照品(中国食品药品检定研究院，供含量测定用，批号：110749-200714)，栀子药材(广西玉林制药集团有限责任公司，批号：100505)。乙腈(色谱纯，美国Fisher公司)，水为纯水，其余均为分析纯。

2 栀子提取工艺及有效成分测定

2.1 栀子中栀子苷含量测定

2.1.1 供试品溶液制备 精密称取栀子2.0g，置于100mL锥形瓶中，根据因素水平设计表加不同倍量蒸馏水煎煮，合并煎液，过滤、浓缩至干浸膏。用甲醇定容至25mL，摇匀离心即得供试品溶液。

2.1.2 对照品溶液制备 精密称定栀子苷对照品3.01mg，用甲醇定容至50mL，即得。

2.1.3 色谱条件 色谱柱：ODS-2；流动相：乙腈-水(15∶85)；检测波长：238nm；柱温：28℃；进样量：10μL；流速:1.0mL/min。在此条件下，分离度大于1.5，目标峰与其他组分达到基本分离，栀子苷理论塔板数不低于1 500(见图1、图2)[1]。

图1 栀子苷对照品溶液高效液相色谱

图2 栀子供试品溶液高效液相色谱

2.1.4 线性试验 分别精密吸取苦栀子苷对照品溶液(0.03mg/mL)1、2、5、10、15、20μL，在“2.1.3”色谱条件下进样测定，以峰面积y为纵坐标，进样量x(μg)为横坐标进行线性回归，得回归方程：y=7 477.1x+125.07，R=0.999 8(见图1),结果表明，栀子苷在0.06～1.2μg范围内线性关系良好。

图1 栀子苷对照品线性曲线

2.1.5 精密度试验 取同一栀子苷对照品溶液，在“2.1.3”色谱条件下重复进样6次，每次进样10μL，计算峰面积RSD为0.62%，表明仪器精密度良好。

2.1.6 稳定性试验 取栀子苷供试品溶液，按照“2.1.3”色谱条件，分别在0、1、2、4、8、16、24h进样10μL，测定栀子苷的含量，计算 RSD为1.86%，表明栀子苷24h内稳定性良好。

2.1.7 重复性试验 取同一栀子样品6份，每份2.0g，精密称定。按照供试品溶液制备方法制备，在“2.1.3”色谱条件下进样10μL，记录色谱图，计算RSD为1.36%，表明该方法重现性良好。

2.1.8 回收率试验 取已知含量的栀子样品6份，每份1.0g，精密称定，分别精密加入一定量的栀子苷对照品，按照供试品溶液制备方法制备，在“2.1.3”色谱条件下进行测定，并于505nm处进行测定，以外标法计算回收率。试验结果表明，回收率良好，见表1。

表1 鸡骨草回收率结果

2.2 栀子提取工艺正交试验

2.2.1 因素与水平 栀子为鸡骨草胶囊中不可缺少的一味中药，根据鸡骨草胶囊的制作工艺和单味药的提取工艺进行实验，确立栀子以适量水煎煮2次，以粉碎度(A)、溶剂用量(B)、煎煮次数(C)为考察因素，栀子苷含量为考察指标进行L9(34)正交试验，因素水平、正交试验及方差分析分别见表2、表3、表4。

表2 正交因素水平

表3 正交试验结果

表4 方差分析

注：F0.05(2,2)=19.00；F0.01(2,2)=99.00。

3 讨论

实验表明，HPLC法测定鸡骨草胶囊中栀子苷的含量，在流动相乙腈-水(15∶85)条件下结果显示，该法操作简便，方法科学、准确，专属性强。本次实验以栀子苷为对照品，根据2010版药典选择高效液相色谱条件和鸡骨草胶囊的制作工艺，采用正交设计实验，根据表3中R值及K值的大小，得出各因素影响栀子苷含量的主次关系为C>B>A,最优方案为A3B3C2，即在鸡骨草胶囊中，栀子的最佳提取工艺为粉碎至40目，加20倍量水煎煮3次。各组分间栀子苷含量差异较小。

[1] 国家药典委员会.中华人民共和国药典(一部)[M].北京：中国医药科技出版社,2010:231.

[2] 范全民.HPLC测定鸡骨草胶囊中桅子苷的含量[J].现代中药研究与实践,2006,20(5):44-45.

[3] 施群，孙桂鸿，付亚平，等.鸡骨草胶囊中栀子甙含量测定[J].湖北中医杂志,2000,22(12):43-44.

[4] 王艳红，陈献.鸡骨草胶囊中栀子苷的含量测定[J].中国中医药信息杂志,2007,14(3):41-42.

(责任编辑：魏 晓)

Research on Extraction Tchnology and Content Detmination of the Main Raw Material Drug of Gardenia in Jigucao Capsule

Lin Wei,Qin Bao*,Liu Quan,Liang Yue,Wei Peiyan

(GuangXi Chinese Medical University,Nanning 530001,China)

Objective:To discuss the method of determination and the extraction techniques of Gardenia in Jigucao capsule.Methods:The main raw material drug of Jigucao capsule was determined by HPLC.Using Orthogonal design experiments to the experiment.Results:Jigucao and Geniposide has a good linear relationship in 0.06～1.2μg.The coefficient of recovery in Geniposide was 101.28% (RSD=1.18%)。It has a good sample recovery.Conclusion:The method is simple,stable accurate and eproductible and can be used as determination and the extraction techniques of Jigucao capsule.

Jigucao Capsule；Geniposide；Extracting Process；Content Determination

2014-12-19

国家科技特派员项目(2009GJE10028)

林威(1989-)，男，广西中医药大学硕士生，研究方向为中药质量控制。

覃葆(1956-)，男，广西中医药大学教授，硕士生导师，研究方向为中药炮制及中药质量标准研究。

R284.2

A

1673-2197(2015)08-0028-02

10.11954/ytctyy.201508014