宫颈癌和宫颈上皮内瘤变组织中成纤维活化蛋白α的表达*

徐丽伟，张梦真

郑州大学第一附属医院妇产科；河南省高等学校临床医学重点学科开放实验室 郑州 450052

宫颈癌和宫颈上皮内瘤变组织中成纤维活化蛋白α的表达*

徐丽伟，张梦真#

郑州大学第一附属医院妇产科；河南省高等学校临床医学重点学科开放实验室 郑州 450052

#通信作者，女，1965年2月生，博士，主任医师，研究方向：妇科肿瘤，E-mail:13683806877@163.com

宫颈癌；宫颈上皮内瘤变；成纤维活化蛋白α；浸润；转移

目的：检测宫颈癌和宫颈上皮内瘤变(CIN)组织中成纤维活化蛋白α(FAPα)的表达情况。方法：采用免疫组化SP法检测10例宫颈炎、40例CIN及81例宫颈癌组织中FAPα的表达。结果：FAPα在宫颈炎组织中不表达，宫颈癌组织中FAPα阳性表达率高于CIN组织(χ2=81.706，P<0.001)。不同组织学类型(Z=2.069，P=0.039)、淋巴结转移情况(Z=3.382，P=0.001)和浸润深度(Z=2.185，P=0.029)的宫颈癌组织中FAPα表达水平比较，差异有统计学意义。结论：FAPα可能参与了宫颈癌的发生发展。

宫颈癌是全球女性的第三大恶性肿瘤。找到宫颈癌发生发展的分子标记物是早期诊断宫颈上皮内瘤变(cervical intraepithelial neoplasia,CIN)和宫颈癌的关键[1]。最近研究[2-4]发现，成纤维活化蛋白α(fibroblast activation protein α,FAPα)在多种上皮性癌组织中表达，参与细胞基质的降解及肿瘤细胞的增殖、侵袭和转移过程，与肿瘤的发生及扩散有关。该研究采用免疫组化SP法检测正常宫颈、CIN及宫颈癌组织中FAPα的表达，分析其与宫颈癌患者临床病理因素的关系，探讨其在宫颈癌变和早期浸润、转移中所起的作用。

1 材料与方法

1.1 标本来源 10例慢性宫颈炎、40例CIN和81例宫颈癌组织标本均取自郑州大学第一附属医院2012年至2014年手术切除并经病理科确诊的组织，所有患者术前均未进行放化疗。宫颈癌患者的临床病理因素如下：年龄40～71岁，中位年龄48岁，其中<48岁43例，≥48岁38例；FIGO分期：Ⅰ期58例，Ⅱ期23例；无淋巴结转移69例，有淋巴结转移12例；组织学类型：鳞癌68例，腺癌13例；分化程度：G1/G2期60例，G3期21例；浸润深度：>1/2宫颈厚度41例，≤1/2宫颈厚度40例。

1.2 3种组织中FAPα的检测方法

1.2.1 主要试剂 FAPα多克隆兔抗人抗体(Bioss公司)、免疫组化即用型SP试剂盒(北京中杉金桥生物技术有限公司)等。

1.2.3 结果判定 由2位病理科医师双盲阅片， FAPα产物为棕黄色颗粒，位于胞膜、胞质和(或)胞核内。观察10个400倍视野，根据染色强度和阳性细胞所占百分比进行分级：阴性(-)，细胞无染色；弱阳性(+)，细胞呈浅棕黄色染色，阳性细胞百分比<10%；阳性()，细胞呈棕黄色染色，阳性细胞百分比10%～50%；强阳性()，细胞呈深黄色染色且阳性细胞百分比>50%。以(+)～()为阳性表达[5]。

1.3 统计学处理 应用SPSS 17.0进行分析。CIN和宫颈癌组织中FAPα阳性表达率的比较采用χ2检验，不同临床病理因素宫颈癌组织中FAPα表达水平的比较采用秩和检验。检验水准α=0.05。

2 结果

2.1 FAPα在3种组织中的表达 宫颈炎组织未见FAPα阳性细胞(图1A)，宫颈癌和CIN组织中FAPα呈阳性表达(图1B和1C)。CIN和宫颈癌组织中FAPα阳性表达率的比较见表1。

图1 3种宫颈组织中FAPα的表达(SP)

组织类型nFAPα/例-+阳性表达率*/%CIN组织4017136457.50宫颈癌组织81147201398.77

*:χ2=81.706，P<0.001。

2.2 FAPα表达与宫颈癌患者临床病理因素的关系 FAPα表达与患者年龄、FIGO分期无关，组织学类型为腺癌、分化程度达G3期、浸润深度>1/2宫颈厚度和有淋巴结转移的宫颈癌组织中FAPα的表达强度更高，见表2。

表2 不同临床病理因素人群宫颈癌组织中FAPα表达水平的比较 例(%)

续表2

3 讨论

FAPα是具有二肽基肽酶活性和明胶酶活性的细胞膜整合糖蛋白[6]，通过与细胞表面蛋白质分子形成二聚体发挥作用，能明显降解细胞外基质[7]，与多种上皮性癌的发生发展密切相关。FAPα参与了骨肉瘤[8]、非小细胞肺癌[9]、卵巢癌[10]等的发生和发展，可促进肿瘤细胞的生长和扩散。该研究发现，宫颈癌和CIN组织中FAPα呈阳性表达，而宫颈炎组织中FAPα不表达。

宫颈癌组织中FAPα阳性表达率为98.77%，而CIN组织中阳性表达率为57.50%，差异有统计学意义。另外，随着宫颈癌浸润深度的增加、淋巴结的转移，FAPα的表达增加，提示FAPα的表达与肿瘤的浸润和转移有关。宫颈腺癌组织中FAPα的表达强于鳞癌组织。由于宫颈腺癌的预后较鳞癌差，这一差异可能反映FAPα的表达与预后相关，受样本量的限制，这一结果有待进一步研究。

FAPα在正常人组织、上皮来源的良性和癌前病变组织中通常不表达，但是在恶性肿瘤间质成纤维细胞中表达[11]。该研究发现FAPα在CIN组织中表达，与其他研究结果不一致。推测可能是不同的癌前病变组织中FAPα的功能发生了变化，FAPα在不同程度上参与了宫颈细胞从CIN至宫颈癌进程中的调控。

总之，FAPα在宫颈癌和CIN组织中表达，可能参与了宫颈癌的发生发展，是宫颈癌早期浸润和转移的一个标志物。

[1]武海英,史惠蓉.不同宫颈病变组织中C-MYC基因与P16蛋白的表达[J].郑州大学学报:医学版,2011,46(5):739

[2]Augoff K,Hryniewicz-Jankowska A,Tabola R,et al.Upregulated expression and activation of membrane-associated proteases in esophageal squamous cell carcinoma[J].Oncol Rep,2014,31(6):2820

[3]Shi M,Yu DH,Chen Y,et al.Expression of fibroblast activation protein in human pancreatic adenocarcinoma and its clinicopathological significance[J].World J Gastroenterol,2012,18(8):840

[4]Kraman M,Bambrough PJ,Arnold JN,et al.Suppression of antitumor immunity by stromal cells expressing fibroblast activation protein-alpha[J].Science,2010,330(65):827

[5]苑文娜,张梦真.DPPⅣ蛋白和Seprase蛋白在卵巢上皮性癌中的表达及意义[J].实用妇产科杂志,2012,28(1):57

[6]Wikberg ML,Edin S,Lundberg IV,et al.High intratumoral expression of fibroblast activation protein(FAP) in colon cancer is associated with poorer patient prognosis[J].Tumor Biol,2013,34(2):1013

[7]Williams KC,Coppolino MG.SNARE-dependent interaction of Src,EGFR and β1 integrin regulates invadopodia formation and tumour cell invasion[J].J Cell Sci,2014,127(Pt 8):1712

[8]Yuan DT,Liu BB,Liu KX,et al.Overexpression of fibroblast activation protein and its clinical implications in patients with osteosarcoma[J].J Surg Oncol,2013,108(3):157

[9]Liao Y,Ni Y,He R,et al.Clinical implications of fibroblast activation protein-α in non-small cell lung cancer after curative resection: a new predictor for prognosis[J].J Cancer Res Clin Oncol,2013,139(9):1523

[10]Chen H,Yang WW,Wen QT,et al.TGF-beta-induced fibroblast activation protein expression, fibroblast activation protein expression increases the proliferation, adhesion, and migration of HO-8910PM[J].Exp Mol Pathol,2009,87(3):189

[11]Zhang J,Valianou M,Simmons H,et al.Identification of inhibitory scFv antibodies targeting fibroblast activation protein utilizing phage display functional screens[J].FASEB J,2013,27(2):581

(2014-10-10 收稿 责任编辑姜春霞)

Expression of fibroblast activation protein α in cervical cancer and cervical intraepithelial neoplasia tissue

XULiwei，ZHANGMengzhen

DepartmentofGynecologyandObstetrics，theFirstAffiliatedHospital，ZhengzhouUniversity；Key-DisciplinesLaboratoryforClinicalMedicineofHenanProvince,Zhengzhou450052

cervical cancer; cervical intraepithelial neoplasia; fibroblast activation protein α; invasion; metastasis

Aim: To detect the expression of fibroblast activation protein α (FAPα) in cervical cancer and cervical intraepithelial neoplasia tissue. Methods: FAPα expression in 10 cases of human cervicitis, 40 cases of cervical intraepithelial neoplasia and 81 cases of cervical cancer tissue was detected by SP method.Results: FAPα expression was higher in cervical cancer tissue than that in cervical intraepithelial neoplasia tissue(χ2=81.706，P<0.001). FAPα expression in cervical cancer tissue was different with different histopathologic type(Z=2.069，P=0.039), lymph node metastasis(Z=3.382，P=0.001), and depth of invasion(Z=2.185，P=0.029).Conclusion: FAPα may take part in invasion and metastasis of cervical cancer.

10.13705/j.issn.1671-6825.2015.03.017

*河南省科技攻关项目 142102310538

R737.33