雌激素受体α基因rs2234693位点多态性与前列腺癌易感性的meta分析*

马英东， 王阿妮， 钟韶萍， 金莉子

(中山大学附属第五医院 1介入科， 2冠心病重症监护室， 3心内科， 广东 珠海 519000)



雌激素受体α基因rs2234693位点多态性与前列腺癌易感性的meta分析*

马英东1， 王阿妮3， 钟韶萍1， 金莉子2△

(中山大学附属第五医院1介入科，2冠心病重症监护室，3心内科， 广东 珠海 519000)

目的： 探讨雌激素受体α(ESRα)基因rs2234693位点多态性与前列腺癌易感性的关系。方法: 通过计算机检索PubMed、CNKI和万方数据库，根据纳入与排除标准筛选相关的病例对照研究，检索时限至2014年4月。在提取有效资料后，应用Stata 10.1 分析软件对各项研究进行异质性检验，在随机效应模型下计算合并优势比及其95%可信区间。结果: 该Meta分析共纳入20项研究，累计前列腺癌组4 623例，对照组9 850例。ESRαrs2234693位点多态性在总体人群中与前列腺癌易感性明显相关(P<0.05)，通过种族的亚组分析发现ESRαrs2234693位点多态性与前列腺癌易感性在欧洲人群中具有相关性(P<0.05)，然而在亚洲和非洲人群中无明显关联性(均P>0.05)。结论:ESRα基因 rs2234693位点态性与前列腺癌易感性相关，即rs2234693 的CC基因型可增加人群患前列腺癌的风险，尤其是欧洲人群。

雌激素受体α； 基因多态性； 前列腺肿瘤； Meta分析

前列腺癌是男性最常见的恶性肿瘤之一，占男性癌症死亡病因的10%[1]，然而人们对于前列腺癌的发病原因仍不清楚。许多研究者认为有可能是环境因素和(或)遗传因素作用导致的。近年来的研究发现, 一些特殊基因的多态性与前列腺癌的发生之间存在着复杂的相关性[2-6]。人类雌激素受体α(estrogen receptor α，ESRα)基因定位在染色体6号染色体长臂25区1带(6q25.1)[7]，其内含子和外显子区域的若干多态性位点已被确定。其中，位于第1个内含子内的rs2234693位点是被广泛研究的基因多态性位点之一。虽然目前有许多关于ESRα基因rs2234693位点的多态性与前列腺癌易感性的研究[8-23]，但由于这些同类研究质量参差不齐，样本量较小，使其结果存在分歧或不确定性。本研究旨在通过Cochrane 系统评价方法，对所有公开发表的ESRα基因rs2234693位点的多态性与前列腺癌易感性相关的病例对照研究进行meta 分析，为基础研究和临床治疗提供更可靠的证据。

材 料 和 方 法

1 纳入及排除标准

纳入标准为：(1)文献类型为病例对照研究；(2)病例组为组织学检查确诊为前列腺癌患者，对照组为与患者无血缘关系的非前列腺癌健康人群；(3)对照组基因型分布符合Hardy-Weinberg 遗传平衡定律；(4)文献中提供基因型数据。剔除标准为：(1)研究中只有病例组没有对照组；(2)同一研究重复发表文献；(3)数据不完整。

2 文献检索

以“single nucleotide polymorphism or SNP or variants”、 “prostate cancer or carcinoma”和“estrogen receptor alpha或ESR1”为英文关键词，检索PubMed数据库；同时以“基因多态性”、“前列腺癌”和“雌激素受体α基因”为中文关键词检索CNKI和万方数据库。检索时限均为建库至2014年4月。

3 质量评价及数据提取

由2名研究者独立阅读检索文献摘要，对可能符合纳入标准的文献进一步阅读全文，如有分歧通过讨论解决或由第3位研究者决定是否纳入。对纳入的文献参考Cochrane Reviewer’s Handbook 5.0系统评价员手册推荐的质量评价标准进行以下质量评价: (1) 诊断标准是否明确; (2) 样本量是否充分; (3) 病例组和对照组是否具有可比性; (4) 统计学分析方法是否恰当; (5) 是否对本研究可能存在的偏倚进行了讨论。以上每项为 1分，≥3分为质量可靠。从每个纳入的文献中提取主要数据为：第一作者、发表年份、样本量、种族、病例组和对照组基因型频率、Hardy-Weinberg遗传平衡定律。

4 统计学处理

采用Stata 10.1 软件进行meta分析。首先通过Q检验和I2检验对各研究的结果进行异质性检验[24]，若Q检验的P值大于0.1或I2值小于50%，则说明各研究间无显著统计学异质性，采用固定效应模型进行合并分析；若Q检验的P值小于0.1或I2值大于50%，则说明结果间存在显著统计学异质性，且未发现来源于临床异质性，则可采用随机效应模型法进行数据合并[25]。然后计算合并优势比(odds ratio,OR)及95% 可信区间(confidence interval,CI)，以P<0.05为差异有统计学意义，通过Egger’s和Begg’s检验评价发表性偏倚[26-27]，最后绘制OR值分布森林图和漏斗图。

结 果

1 纳入文献的基本特征

文献筛选流程见图1。初检获得相关文献75篇，阅读标题、摘要和全文，根据文献纳入和剔除标准，最终纳入符合要求的文献16篇[8-23]，其中共涉及20项独立研究，试验设计均为病例对照，而且各项研究对照组的基因型分布均符合Hardy-Weinberg 遗传平衡定律。所有研究的基本特征见表1。纳入的20项研究累计前列腺癌患者4 623例，正常对照者9 850例。

Figure 1.The flow chart of literature search and study selection.

2 Meta分析结果

以野生纯合子TT基因型为参照，评估突变纯合子CC基因型与前列腺癌易感性的关系。因异质性检验结果显示各研究间存在统计学异质性(I2=52.7%，P=0.003)，故采用随机效应模型进行meta 分析并绘制森林图，见图2。结果显示，在ESRαrs2234693位点携带CC 基因型的人群前列腺癌的发病危险比携带TT 基因型的人群高(OR=1.29, 95% CI: 1.08～1.55,P=0.005)。进一步以种族因素做亚组分析，结果显示，ESRα基因rs2234693位点多态性与前列腺癌易感性在欧洲人群中具有相关性(OR=1.26, 95% CI: 1.01～1.58,P=0.041)，然而在亚洲和非洲人群中无明显关联性(亚洲人OR=1.37, 95% CI: 0.94～1.99,P=0.099; 非洲人OR=1.52, 95% CI: 0.86～2.69,P=0.145)。

3 发表性偏倚评价

漏斗图中(图3)纳入的20项研究以合并效应量OR 值(中线)为中心散开分布，基本对称，呈倒置漏斗形，提示无明显发表性偏倚。进一步Egger’s和Begg’s检验也提示总体研究不存在明显的发表性偏倚(Egger’s:P=0.169; Begg’s:P=0.132)。

表1 所纳入的 20 项病例对照研究的基本特征

HWE: Hardy-Weinberg equilibrium, for control.

Figure 2.Forest plot of the association between ESRα rs2234693 and prostate cancer risk (CC vs TT).

Figure 3.Funnel plot analysis to detect publication bias

讨 论

ESR 属于一类由配体激活的核转录因子，现发现的人类ESR 主要存在2种亚型：ESRα和ESRβ，其中ESRα主要分布于前列腺基底上皮细胞和基质间隙[28]，而编码ESRα的基因则定位于人类染色体6q25.1上，全序列共有14万个碱基对，由8 个外显子和7 个内含子组成。rs2234693是ESRα基因最常见的多态性位点，位于第1个 内含子内距第2个外显子上游397 bp位置。由于第1个内含子位于氨基末端主要转录功能区，其含有启动子和增强子等重要调节序列，rs2234693在其中发生的碱基T 和C 置换有可能产生导致原有的酶切位点消失或产生新的酶切位点，无论是哪一种形式，都可以导致mRNA的错误剪接，最后产生异常的表达产物[29-30]，而雌激素必须与ESRα结合才能发挥作用，异常ESRα的表达将直接影响个体内雌激素的最终生理效应，进而对前列腺癌的发生、发展产生影响。因此我们有理由推测，ESRα rs2234693位点基因多态性可能是前列腺癌发病的危险因素。

到目前为止，已有2篇针对ESRα基因 rs2234693位点多态性与前列腺癌易感性的meta分析论文发表[31-32]，但由于发表时间和筛选资料的标准不同，它们所纳入的文献不相一致，导致得出的结论并不稳定。本研究通过全面检索中英文数据库，根据严格的纳入及排除标准共纳入20项关于ESRα基因rs2234693位点多态性与前列腺癌易感性的研究，并采用meta 分析的方法对其结果进行定量合并，是目前收集病例组及对照组数量最多的meta分析。研究结果显示ESRα基因rs2234693位点多态性与前列腺癌易感性相关，即rs2234693 的CC基因型可增加人群患前列腺癌的风险，尤其是欧洲人群；对于亚洲人群而言，rs2234693 的CC基因型与前列腺癌易感性之间无明显相关性，但由于纳入的文献仅5篇，样本量较局限，因此尚不能下最后结论。同时，需要指出的本研究存在的局限性是：(1)由于语言的限制，本研究所选择的数据库仅限于英文和中文，对其它语言或数据库的文献没有进行搜选；(2)本研究只针对ESRα基因的rs2234693位点进行分析，未考虑基因与基因和基因与环境等相互作用的影响。因此上述结果仍需在进一步的严格设计、最大程度控制混杂因素、大样本、同质性的病例对照或前瞻性研究中加以验证，同时也需要充分考虑基因之间以及基因与环境之间的相互作用，以便发现前列腺癌的发病机制，为基础研究和临床治疗提供更可靠的证据。

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A meta-analysis ofESRαrs2234693 polymorphism associated with prostate cancer risk

MA Ying-dong1, WANG A-ni3, ZHONG Shao-ping1, JIN Li-zi2

(1InvasiveTechnologyDepartment,2CoronaryHeartDiseaseIntensiveCareUnit,3CardiologyDepartment,TheFifthAffiliatedHospitalofSunYat-senUniversity,Zhuhai519000,China.E-mail:Jinlizizhuhai@163.com)

AIM: To investigate the pooled association between estrogen receptor α (ESRα) rs2234693 polymorphism and prostate cancer risk. METHODS: A systematic literature search was performed to identify the related studies (up to April 2014) in several online databases including PubMed, the CNKI and Wanfang online libraries. Odds ratios with 95% confidence intervals were used to calculate the strength of association in the random effect model. RESULTS: A total of 20 studies including 4 623 cases and 9 850 controls were enrolled in the final meta-analysis. The results indicated thatESRαrs2234693 polymorphism was significantly associated with prostate cancer risk (P<0.05) in a dominant genetic model. In the subgroup analysis by ethnicity, there were significant associations betweenESRαrs2234693 polymorphism and prostate cancer risk in Caucasians (P<0.05), but not in Asians and Africans (bothP>0.05). CONCLUSION: This meta-analysis suggests thatESRαrs2234693 polymorphism is significantly associated with prostate cancer risk, especially in Caucasians.

Estrogen receptor α; Genetic polymorphism; Prostatic neoplasms; Meta-analysis

1000- 4718(2015)01- 0104- 05

2014- 07- 21

2014- 11- 13

珠海市科技计划项目(No. 2012D0401990002)

△通讯作者 Tel: 0756-2528200； E-mail: Jinlizizhuhai@163.com

R195.1;R4

A

10.3969/j.issn.1000- 4718.2015.01.020