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超声-微波协同萃取福建乌龙茶中咖啡碱的条件优化

2015-04-14王立升刘小洁曹家兴刘旭

应用化工 2015年5期
关键词:咖啡碱产率溶剂

王立升,刘小洁,曹家兴,刘旭

(广西大学 化学化工学院,广西 南宁 530004)

现代医学研究表明,乌龙茶中有益于健康的主要成分有茶多酚、咖啡碱、多糖、矿物质,氨基酸等[1]。咖啡碱(又名咖啡因)是一种黄嘌呤生物碱化合物,能够暂时驱走睡意并恢复精力[2],是一种中枢神经兴奋剂。在一定范围内,咖啡碱对人体有强心、解毒、利尿等生理作用。

从茶叶中提取咖啡碱的方法有溶剂法、超临界CO2萃取法[3]、超声波提取法[4]、微波提取法[5]、索氏提取法等。这些方法费时、费工、效率低。本文用超声-微波协同萃取[6-7]茶叶中的咖啡碱,它充分结合了超声波及微波的优点,实现了对固体样品快速、高效、可靠的处理,成本相对也较低。

1 实验部分

1.1 试剂与仪器

乙醇、氯仿、二氯甲烷均为分析纯;纯净水;福建乌龙茶。

UV-T6 型紫外-可见分光光度计;XH-300UL 型电脑微波超声波紫外光组合催化合成仪;SHB-III 型台式循环水式多用真空泵;FA1104B 电子天平;SGWX-4 熔点仪;8400S 傅里叶变换红外光谱仪。

1.2 实验方法

茶叶加入液氮脆化,在液氮挥发同时捣碎成粉末状,过60 目筛。准确称取10 g 茶叶粉,在微波功率400 W、微波时间4 min、溶剂70%乙醇、提取温度80 ℃时,超声-微波协同萃取2 次。合并提取液,抽滤,浓缩。加入氧化钙,高温升华,得咖啡碱粗品,重结晶,干燥,得咖啡碱纯品(平行做三组)。采用紫外分光光度法测定吸光度[8]。

2 结果与讨论

2.1 单因素优化

2.1. 1 提取次数 微波功率400 W、微波时间4 min、溶剂70% 乙醇、提取温度80 ℃、料液比1∶20 g/mL时考察提取次数对咖啡碱产率的影响,结果见表1。

表1 提取次数的影响Table 1 The effect of extraction times

由表1 可知,提取2 次茶叶中咖啡碱基本提取完全,到第三次时不升反降。所以,选择提取次数为2 次。

2.1.2 提取溶剂 在微波功率400 W、提取时间4 min、提取温度80 ℃下提取2 次、料液比1∶20 g/mL 时考察不同提取溶剂对茶叶咖啡碱产率的影响,结果见表2。

表2 溶剂对咖啡碱产率的影响Table 2 The effect of solvents for Caffeine yield

由表2 可知,氯仿作为提取溶剂,咖啡碱产量稍高于乙醇,但差别不大。考虑到氯仿有毒,又易挥发,散布于空气中,会对环境造成污染,对操作人员的健康带来危害。故选取乙醇作为提取溶剂。

2.1. 3 料液比 在提取时间4 min、提取温度80 ℃、提取溶剂80%乙醇、微波功率400 W 条件下提取2 次,考察料液比对产率的影响,结果见表3。

表3 料液比的影响Table 3 The effect of ratio of material to solvent

由表3 可知,料液比对咖啡碱产率有一定的影响,料液比≥1∶20 g/mL 时,咖啡碱产率没太大变化。为了节省溶剂,选择料液比1∶20 g/mL。

2.1.4 微波功率 在提取时间4 min、提取温度80 ℃、提取溶剂80%乙醇、料液比为1∶20 g/mL 条件下提取2 次,考察微波功率对产率的影响,结果见表4。

表4 微波功率的影响Table 4 The effect of microwave power

由表4 可知,随着微波功率的增大,咖啡碱产率增大,400 W 时达最高,>400 W 时,咖啡碱产率减小。适宜微波功率为400 W。

2.1.5 提取时间 在微波功率400 W、提取温度80 ℃、提取溶剂70%乙醇、料液比为1∶20 g/mL 条件下提取2 次,考察提取时间的影响,结果见表5。

表5 提取时间的影响Table 5 The effect of extraction time

由表5 可知,咖啡碱产率随着时间增长而增加,≥3 min 时,咖啡碱已经差不多被提取出来,产率趋于稳定。所以选用微波作用时间4 min。

2.1.6 乙醇浓度 在微波功率400 W、提取时间4 min、提取温度80 ℃、料液比为1∶20 g/mL 条件下提取2 次,考察乙醇浓度的影响,结果见表6。

表6 乙醇浓度的影响Table 6 The effect of ethanol concentration

由表6 可知,乙醇浓度≥80%时,咖啡碱产率基本达到稳定。因此,选择浓度80%乙醇。

2.1.7 提取温度的影响 在微波功率400 W、提取时间4 min、提取溶剂80%乙醇、料液比1∶20 g/mL条件下提取2 次,考察提取温度的影响,结果见表7。

表7 提取温度的影响Table 7 The effect of extraction temperature

由表7 可知,随着温度升高,咖啡碱产率提高,80 ℃时达最高;>80 ℃,产率下降。因为随着温度的升高,茶叶中无机物和其他高分子物质被提取出来,给咖啡碱的分离带来一定的难度。所以提取温度选择80 ℃。

2.2 正交实验

2.2.1 正交实验结果 由单因素实验可知,在提取次数2 次,提取溶剂是乙醇、料液比为1 ∶20 g/mL时,微波功率、提取温度、提取时间、乙醇浓度均对咖啡碱产率有较大影响,所以选取这4 个因素为考察因素,采用正交表L9(34)实验,因素水平见表8,结果见表9。

表8 因素和水平表Table 8 Factor and level table

表9 正交实验结果Table 9 Results of orthogonal experiment

由表9 可知,4 种因素对咖啡碱产率的影响程度大小依次为:微波功率>提取时间>乙醇浓度>提取温度,最佳提取条件为:A2B2C3D3,即微波功率500 W,微波加热时间为4 min,乙醇浓度90%,提取温度90 ℃。

表10 方差分析表Table 10 Analysis of variance table

由表10 可知,微波功率影响显著,提取时间、乙醇浓度、提取温度影响不显著。

2.2.2 验证实验 根据正交最佳提取条件,提取乌龙茶中的咖啡碱,并对其提纯,所得咖啡碱为白色针状结晶,产率2.60%,证实了该提取方法的可靠性。

2.3 咖啡碱的表征

提纯咖啡碱为无色针状结晶,熔点(227±0.2)℃,数小时内保持原状,纯度(98 ±0.4)%,红外测定结果与标准谱图特征峰一致。

2.4 不同提取方法咖啡碱产率比较

热回流法[9]、索氏提取法[10]、微波法[11]、超声法[12]均为常见的茶叶中有效成分的提取方法,以上4 种方法均参考文献中的提取工艺对咖啡碱进行提取,超声-微波协同萃取则是采用正交优化提取工艺,各法咖啡碱产率见表11。

表11 不同提取方法咖啡碱得率比较Table 11 Comparation Caffeine yield by different extraction methods

由表11 可知,超声-微波协同萃取法的提取效率明显高于其他四法,热回流法提取效率最低,其次是索氏提取法,超声提取法和微波提取法差异不大,几种方法提取咖啡碱的结果与文献报道接近。

超声-微波协同萃取技术充分利用微波的反射、穿透、吸收、热效应和渗透速度快,和超声波产生的强烈振动、空化效应、搅拌作用等特点,是一种较为理想的提取方法,具有高效、节能、简单、快速的优点。

3 结论

以粉碎过筛的乌龙茶为原料,进行超声-微波协同萃取咖啡碱,最佳条件为:微波功率500 W,微波加热时间4 min,乙醇浓度90%,提取温度90 ℃,提取2 次,咖啡碱产率2.60%。缩短了提取时间,提高了咖啡碱提取效率,是一种简便快速,值得推广的提取方法。

[1] 杜继煜,白岚,白宝璋.茶叶的主要化学成分[J].农业与技术,2003,23(1):53-55.

[2] 官兴丽,刘跃云. 茶叶咖啡碱的功效及含量测定研究进展[J].福建茶叶,2012(3):5-8.

[3] 汪小钢,萧伟祥.超临界CO2提取茶叶中咖啡碱[J].茶叶科学,1998,18(1):65-69.

[4] 徐凤英,梁英,王亚飞.超声波辅助乙醇提取咖啡因工艺优化[J].黑龙江八一农垦大学学报,2013,25(2):85-87.

[5] 叶怀义,宗雪源. 微波辅助萃取红茶中咖啡碱的研究[J].哈尔滨商业大学学报:自然科学版,2006,22(2):40-43.

[6] 王笃政,于娜娜.超声-微波协同萃取技术在中药有效成分提取中的研究进展[J].化工中间体,2011(5):5-9.

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[8] 林郑和,严兰芳. 紫外分光光度法测定茶叶中的咖啡碱[J].茶业科学技术,2001(4):40-41.

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