酸枣仁散的药效学研究

王利利 ，俞明远，马彤辉，汤林杰，徐霄龙，滕可导，刘凤华，马云飞，许剑琴

（1.中国农业大学动物医学院，北京 海淀100193 ；2.北京农学院动物科学技术学院，北京 昌平 102206）

酸枣仁汤源于我国传统医学经典《金匮要略》，人医临床上用于治疗虚劳虚烦不得眠，怔忡恍忽，心悸盗汗，头目眩晕，夜间盗汗，咽干口燥等病证[1]，利用酸枣仁汤治疗失眠症可以明显延长睡眠时间，同时加深睡眠深度，使神经衰弱等症状得到改善。而兽医临床少见报道。在兽医生产中，动物在运输、转群及仔猪断奶过程中由于内外界因素的改变会产生应激反应，如身体的损伤、情志的变化、行为的变化以及食欲差、消化功能紊乱、饲料利用率低、生长迟滞、腹泻等症状，严重时造成畜禽死亡，给养殖业造成巨大损失。研发中兽药饲料添加剂应用于动物生产过程中以减缓环境应激对家畜的影响，保证畜禽生产健康持续发展，有一定实用意义。本试验所用酸枣仁散由酸枣仁汤加减方改进而成，由酸枣仁为君药组成，水煎后，制成散剂，研究酸枣仁散对小鼠镇静、催眠、耐缺氧、耐高温及镇痛作用的影响，为应用于中兽医临床提供一定的理论和实验依据。

1 材料与方法

1.1 试验动物、药品、试剂及主要设备 SPF 级昆明系小鼠，购自北京大学实验动物中心（SCXK(京)2012-0001），小鼠体重为18～22 g。酸枣仁散（批号：20130601，生产单位：北京中农劲腾生物技术有限公司中试产品）；戊巴比妥钠（德国默克公司），安定片（北京益民药业有限公司，批号：20130307）；生理盐水、凡士林、钠石灰。动物活动箱：用无色有机玻璃制成的15 cm×25 cm×20 cm长方形箱，其底部放入木屑垫料。磨口广口瓶，恒温箱，热板仪。

1.2 酸枣仁散对小鼠自发活动的影响 将40 只雄性小鼠随机分为4 组，每组10 只。分别为生理盐水组（0.3 mL/只）、酸枣仁散剂低剂量组（5 g/kg体重）、中剂量组(10 g/kg 体重）和高剂量组（15 g/kg 体重），将散剂制成混悬液后灌胃给药。以2 min 内小鼠走动时间及双前肢向上抬举次数为指标，给药前把小鼠投入箱中适应5 min，记录2 min的活动数值作为正常值。分别在给药后60 min和90 min，测定小鼠走动时间及双前肢向上抬举次数[2]。

1.3 酸枣仁散对阈剂量戊巴比妥钠致小鼠睡眠时间的协同作用 将50 只雄性小鼠随机分为5 组，每组10 只，分别为戊巴比妥钠组（阈剂量为60 mg/kg体重）、酸枣仁散低剂量（5 g/kg 体重）+阈剂量戊巴比妥钠组、酸枣仁散中剂量（10 g/kg 体重）+戊巴比妥钠组、酸枣仁散高剂量（15 g/kg 体重）+戊巴比妥钠组、安定（2 mg/kg 体重）+戊巴比妥钠组。酸枣仁散灌胃给药，60 min 后再腹腔注射阈剂量戊巴比妥钠，以翻正反射消失为入睡时间，从翻正反射消失至恢复时间为睡眠持续时间。试验在安静、通风、室温18 ℃～22 ℃左右的环境下进行[3]。

1.4 酸枣仁散对小鼠耐缺氧能力的影响 小鼠40只随机分为4 组，每组10 只。设生理盐水组、酸枣仁低剂量组（5 g/kg 体重）、中剂量组（10 g/kg 体重）和高剂量组（15 g/kg 体重），分别口服给药3 天，于第3天给药1 h后，将各组小鼠分别放入容积相同的（250 mL）的磨口广口瓶内（每瓶1 只），瓶内装有同等量（10 g）的钠石灰，以吸收水分和二氧化碳。放入小鼠后，加盖及瓶口涂以凡士林密封。以呼吸停止为死亡指征，记录小鼠存活时间[4]。

1.5 酸枣仁散对小鼠耐高温能力的影响 小鼠共40 只随机分为4 组，每组10 只。设生理盐水组、酸枣仁低剂量组（5 g/kg 体重）、中剂量组（10 g/kg 体重）和高剂量组（15 g/kg 体重），分别口服给药3 天，于第3 天给药1 h 后，将小鼠放入45 ℃的恒温箱中，立即计时，并密切观察。以最后1 次呼吸停止为指标，记录小鼠存活时间。

1.6 酸枣仁散对小鼠的镇痛作用 取小鼠逐只放于（55±0.5）℃热板仪上，记录小鼠舔后足反应所需时间（疼痛反应潜伏期）作为小鼠的痛阈值，挑选痛阈值在5～30 s 内的雌性小鼠40 只，随机分为对照组、酸枣仁低、中、高剂量组，连续3 d 灌胃给药，于末次给药后1 h，分别将小鼠置于（55±0.5）℃的热板上，测定痛阈值，并计算痛阈提高率。

痛阈提高百分率（%）=（给药后痛阈-给药前痛阈）/给药前痛阈×100%

1.7 统计学处理 用SPSS17.0 统计软件，采用单因素方差分析，数据以“平均数±标准差”表示，组间比较采用t检验，P＜0.05 为有统计学差异，P＜0.01 为差异极显著。

2 结果

2.1 酸枣仁散对小鼠自发活动的影响 给药后60 min 和90 min，各给药组均能显著减少小鼠行走时间（P＜0.05），低、中、高剂量组与对照组相比均差异极显著（P＜0.01），其中，高剂量组与低、中剂量组相比差异显著（P＜0.05）（表1）。给药后60 min 和90 min，各给药组均可以显著减少小鼠前肢上抬次数（P＜0.05），给药后60 min，与对照组比较，高剂量组差异极显著（P＜0.01），给药后90 min，与对照组比较，低、中、高剂量组均差异极显著（P＜0.01）（表2）。结果表明，酸枣仁散剂具有显著抑制小鼠自发活动的作用，其镇静效果明显。

2.2 酸枣仁散对阈剂量戊巴比妥钠致小鼠睡眠时间的协同作用 预试验得出戊巴比妥钠阈剂量为60 mg/kg。酸枣仁低、中、高剂量组均可以增加戊巴比妥钠致小鼠睡眠时间，其中酸枣仁散剂中剂量、高剂量组以及安定组与戊巴比妥钠组相比，差异极显著（P＜0.01），高剂量组与中剂量组比较差异极显著（P＜0.01）（表3）。结果表明，酸枣仁散剂可显著延长阈剂量戊巴比妥钠所致小鼠睡眠时间，具有明显的镇静催眠作用。

表1 酸枣仁散对小鼠走动时间的影响（n=10）

表2 酸枣仁散对小鼠前肢上抬次数的影响（n=10）

表3 酸枣仁散对阈剂量戊巴比妥钠致小鼠睡眠时间的影响（n=10）

2.3 酸枣仁散对小鼠耐缺氧能力的影响 与对照组比较，酸枣仁散各剂量组均可以延长密闭瓶内小鼠呼吸停止时间（P＜0.05），其中，中、高剂量组差异极显著（P＜0.01），高剂量较低剂量组差异极显著（P＜0.01）（表4）。试验结果表明，酸枣仁散剂可显著提高小鼠的耐缺氧能力。

表4 酸枣仁散对小鼠耐缺氧能力的影响（n=10）

2.4 酸枣仁散对小鼠耐高温能力的影响 与对照组相比，酸枣仁散各给药组均可以延长小鼠呼吸停止时间，中、高剂量组效果更好（P＜0.05）（表5）。结果表明，酸枣仁散可以提高小鼠耐高温能力。

表5 酸枣仁散对小鼠耐高温能力的影响（n=10）

2.5 酸枣仁散对小鼠的镇痛作用 酸枣仁散低、高剂量组与对照组相比有一定镇痛作用，但差异不显著（表6）。

3 分析与讨论

酸枣仁汤是传统经典镇静安神方，已有文献报道，酸枣仁煎剂在小剂量时能使实验动物安静，且镇静作用较恒定；稍大剂量则有催眠之效。其镇静、催眠作用的活性成分为水溶性的，对中枢神经系统的作用与安定药颇为类似[5]。隋宏等研究表明，酸枣仁合剂可以增加入睡小鼠的动物数，抑制其自主活动和生理代谢[6]。本方在原酸枣仁方的基础上加入神曲，并制成散剂。

表6 酸枣仁散对小鼠的镇痛作用（n=10）

本实验室药效学试验结果表明，酸枣仁散剂灌胃给药后，与对照组相比，小鼠自主活动次数减少，且差异极显著（P＜0.01），说明酸枣仁散有明显的镇静作用，且高剂量组（15 g/kg 体重）效果更好。我们又进行了延长戊巴比妥钠小鼠睡眠时间试验，观察到酸枣仁散各剂量组均具有延长戊巴比妥钠小鼠睡眠时间的作用，并有剂量依赖性，高剂量（15 g/kg 体重）组效果最好（P＜0.01），表明酸枣仁散有明显的催眠作用。小鼠耐缺氧试验结果显示，酸枣仁散各剂量组对常压耐缺氧小鼠的存活时间与对照组相比显著延长（P＜0.05），表明酸枣仁散剂可明显增加小鼠耐缺氧能力，且高剂量组（15 g/kg 体重）效果更好。小鼠耐高温试验结果显示，在高温（45 ℃）下，酸枣仁散各剂量组小鼠存活时间与对照组相比均增加，且中剂量组（10 g/kg 体重）效果更好，表明酸枣仁散可以在一定程度上提高小鼠的耐高温能力，但作用不显著。镇痛试验结果显示，酸枣仁散低、高剂量组痛阈值有一定的提高，但与对照组相比差异不显著，表明酸枣仁散剂对小鼠有一定程度的镇痛作用，但效果不明显。综上所述，本方剂酸枣仁散具有明显的镇静、安定、催眠和耐缺氧作用；有一定程度的耐高温和镇痛作用，但效果不显著，有待后续试验进一步验证。结合方剂组成分析，药效学试验结果与组方功能分解是相一致的，甚至有可能在实践中起到其他功效。

本研究为酸枣仁散作为专用饲料添加剂用于仔猪断奶、转群及生产运输[7]等提供一定的实验依据，以期将环境应激的危害降低到最小，保证畜禽生产健康持续发展。

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[6]隋宏，张国庆，孙光，等.酸枣仁合剂的镇静安神作用研究[J].宁夏医志，2007，29（11）：963-964.

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