RRBP1在早期发现甲状腺微小癌中的诊断意义

董孟权，杨丽英

(河北省唐山市丰南区医院头颈外科 063300)



·论 著·

RRBP1在早期发现甲状腺微小癌中的诊断意义

董孟权，杨丽英

(河北省唐山市丰南区医院头颈外科 063300)

目的 观察核糖体结合蛋白1(RRBP1)在早期发现甲状腺微小癌中的诊断意义。方法 收集60例甲状腺微小癌、50例甲状腺瘤及50例健康者的静脉血标本，采用实时荧光定量聚合酶链式反应(QRT-PCR)检测RRBP1的表达，并分析RRBP1在甲状腺微小癌中的表达与临床病理特征的关系。结果 RRBP1在甲状腺微小癌中的表达明显高于甲状腺瘤及健康者，差异有统计学意义(P<0.05)；同时，RRBP1在甲状腺瘤中的表达也明显高于健康者(P<0.05)。此外，RRBP1在甲状腺癌患者中的表达与肿瘤大小及淋巴结转移明显相关(P<0.05)，而与患者的年龄、性别、吸烟史、肿瘤的好发部位无明显相关。结论 RRBP1表达与甲状腺微小癌的发生相关，其表达的检测有助于甲状腺微小癌的诊断。

甲状腺微小癌； 核糖体结合蛋白1； 实时荧光定量聚合酶链式反应； 临床病理特征

甲状腺微小癌性的病灶微小，发病隐匿，无明显的临床表现，往往不容易被诊断[1-3]。近年来，研究表明分子标记物的检测有助于甲状腺微小癌的诊断[4-5]。核糖体结合蛋白(RRBP1)为一种粗面内质网蛋白，近年来研究表明其表达与多种恶性肿瘤的发生相关[6-8]，然而其表达与甲状腺微小癌的关系尚不明确。本研究检测了不同甲状腺病变患者中RRBP1的表达，以评估RRBP1的检测对甲状腺微小癌的诊断价值。

1 资料与方法

1.1 一般资料 选择2009年1月至2014年12月本院穿刺或术后病理诊断确诊为乳头状甲状腺微小癌患者60例。其中，男22例，女38例，年龄38～69岁，平均45.7岁；吸烟史18例，无吸烟史42例；肿瘤直径小于0.5 cm 21例，直径大于或等于0.5 cm 39例；淋巴结转移11例，无淋巴结转移49例；癌位于单侧甲状腺47 例，位于双侧13例。另选同期经穿刺或术后病理确诊为甲状腺瘤50例，男24例，女26例，年龄32～56岁，平均40.2岁。健康者来源于本院健康查体者，男25例，女25例，年龄36～58岁，平均45.5岁。各组研究对象一般资料比较，差异无统计学意义(P>0.05)，具有可比性。

1.2 实时荧光定量聚合酶链式反应(QRT-PCR) 依据试剂盒的操作步骤严格进行，患者的血液标本收集后，采用Trizol法提取RNA，以生物分光光度计测定RNA浓度，反转录试剂盒(AppliedBiosystems，USA)将RNA反转录成cDNA，于荧光定量PCR仪 (美国Bio-Rad公司)检测RRBP1的表达，以GAPDH作为内参。采用Folds=2-ΔΔCt计算RRBP1在不同组表达的倍比关系，其中计算公式为ΔΔCt=[Ct(目的基因)-Ct(GAPDH)]实验组-[Ct(目的基因)-Ct(GAPDH)]对照组。其中RRBP1的引物序列为5′-AGTTCGGACCAG GTGAGGGAGCAC-3′，5′-GCGTCTTCAGCTGAACGGGGTCCT-3′,内参GAPDH的引物序列为5′-CTGAACGGGAAGCTCACTGG-3′，5′-TGAGGTCCACCACCCTGTTG-3′。

2 结 果

2.1 RRBP1在甲状腺微小癌、甲状腺瘤及正常患者中的表达 QRT-PCR检测结果显示RRBP1在甲状腺微小癌、甲状腺瘤及健康者中的相对表达值分别为8.92±2.12、5.23±1.98、3.25±1.04，组内比较，差异有统计学意义(P<0.01)。其中，RRBP1在甲状腺微小癌中的表达明显高于甲状腺瘤 (P<0.05)及健康者(P<0.01)，同时RRBP1在甲状腺瘤中的表达也明显高于健康者，差异有统计学意义(P<0.05)。见图1。

2.2 RRBP1在甲状腺癌中的表达与临床病理特征的关系 分析RRBP1在甲状腺癌患者中的表达与临床病理特征的关系，结果表明RRBP1在甲状腺癌组织中的表达与肿瘤的直径及淋巴结转移相关(P<0.05)，而与患者的年龄、性别、吸烟史及肿瘤的好发部位无明显相关。见表1。

图1 QRT-PCR检测RRBP1在甲状腺微小癌、甲状腺瘤及健康者中的表达

临床病理特征nRRBP1相对表达值P年龄(岁)<45329．52±1．680．755≥45288．32±1．86性别男388．39±1．780．778女229．45±1．83吸烟史有189．78±1．770．596无428．06±1．82肿瘤直径(cm)<0．5217．62±1．620．004≥0．53910．22±1．42好发部位单侧479．12±1．850．875双侧138．72±1．79淋巴结转移有1111．32±1．620．000无496．52±1．54

3 讨 论

近年来，分子标记物的检测在肿瘤的早期诊断中发挥着重要作用。文献[4]发现分子标记物的检测有助于区分甲状腺微小癌及良性病变。Marchetti等[5]发现通过检测BRAF在甲状腺活检组织中的突变有助于甲状腺微小癌的诊断。其中，RRBP1为一种粗面内质网蛋白，在核糖体结合及新生蛋白跨膜易位过程中的发挥重要作用[9-11]。研究发现RRBP1不仅高表达癌细胞系，在乳腺癌[6]、肺癌[7]及结直肠癌组织[8]中均发现了其高表达，提示RRBP1为肿瘤发生相关的癌基因。然而，RRBP1是否高表达于甲状腺癌，是否有助于甲状微小癌的鉴别诊断，有待进一步研究。

本研究结果表明，RRBP1在甲状腺微小癌中的表达明显高于甲状腺瘤及健康者，同时RRBP1在甲状腺瘤中的表达也明显高于健康者，提示RRBP1的表达可能与甲状腺微小癌的发生有关，其表达的检测有助于区分甲状微小癌、甲状腺瘤及健康者。此外，结果也显示RRBP1在甲状腺微小癌中的表达与肿瘤直径及淋巴结转移相关；肿瘤瘤直径大于或等于0.5 cm患者中RRBP1的表达明显高于直径小于0.5 cm患者中的表达，淋巴结患者中RRBP1的表达也明显高于无淋巴结转移患者中的表达，差异均有统计学意义(P<0.05)，提示RRBP1的表达可能与甲状腺癌细胞的增殖及侵袭相关，其表达的检测有助于判别甲状腺微小癌淋巴结转移的潜能。因此，本文认为RRBP1可能为甲腺状微小癌发生相关的新型分子标记物，其表达的检测有助于甲状腺微小癌的早期诊断。

然而，目前关于RRBP1在健康者中的表达量，尚无参考标准，不能确定RRBP1表达的临界值以明确区分甲状腺微小癌、甲状腺瘤及健康者，大样本量的深入研究将具有重要的临床意义。此外，关于RRBP1在甲状腺微小癌的发生、发展中的生物学功能及其作用机制仍不清楚。其中，Tsai等[7]研究发现RRBP1的高表达可增强抗凋亡蛋白GRP78的表达，抑制肺癌细胞的凋亡，进而促进其生长。RRBP1高表达于甲状腺微小癌是否与其调控GRP78相关，仍有待于后续研究证实。

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Diagnostic significance of RRBP1 in early detection of thyroid microcarcinoma

DONGMeng-quan,YANGLi-ying

(FengnanDistrictHospital,Tangshan,Hebei063300,China)

Objective To investigate the diagnostic significance of ribosome binding protein 1 (RRBP1) in the early detection of thyroid microcarcinoma.Methods QRT-PCR was used to detect the expression of RRBP1 in blood samples collected from 60 patients with thyroid microcarcinoma,50 patients with thyroid neoplasm and 50 healthy people.Meanwhile,the relationship between RRBP1 expression and clinicopathological characteristics in thyroid microcarcinoma was analyzed.Results RRBP1 expression in thyroid microcarcinoma was significantly higher than that in thyroid neoplasm and healthy people,the difference was statistically significant (P<0.05).Meanwhile,RRBP1 expression in thyroid neoplasm was significantly higher than that in healthy people (P<0.05).Moreover,RRBP1 expression in thyroid microcarcinoma was significantly correlated with the tumor size and lymph node metastasis(P<0.05),but had no obvious correlation with the age,sex,smoking history,tumor predilection locations.Conclusion RRBP1 expression is associated with the occurrence of thyroid microcarcinoma and its detection may be beneficial for the diagnosis of thyroid microcarcinoma.

thyroid microcarcinoma; RRBP1; QRT-PCR; clinicopathological characteristics

董孟权，男，本科，主治医师,主要从事头颈外科工作。

10.3969/j.issn.1672-9455.2015.14.044

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1672-9455(2015)14-2078-02

2015-02-20

2015-04-10)