血清可溶性Endoglin检测在胰腺癌诊断中的应用

陈日寿，张健清

(1.广东省东莞市中医院检验科 523000;2.中山大学附属第一医院检验医学部，广州 510000)



·论 著·

血清可溶性Endoglin检测在胰腺癌诊断中的应用

陈日寿1，张健清2

(1.广东省东莞市中医院检验科 523000;2.中山大学附属第一医院检验医学部，广州 510000)

目的 探讨胰腺癌患者血清中可溶性Endoglin的表达水平及其临床意义。方法 应用酶联免疫吸附试验(ELISA)测定50例胰腺癌患者、30例胰腺炎患者和50例健康对照者血清中Endoglin水平，同时应用电化学发光免疫分析法测定CA-199，并进行比较分析。结果 胰腺癌组、胰腺炎组和健康对照组血清中Endoglin水平分别是(5.68±0.91)、(3.75±0.77)、(3.55±0.65)μg/L。胰腺癌组Endoglin表达水平高于胰腺炎组和健康对照组(P<0.01)。在胰腺癌的诊断中Endoglin的阳性率为70%。结论 血清Endoglin在胰腺癌中高表达，有助于胰腺癌的临床诊断。

癌； 胰腺肿瘤； 可溶性Endoglin

胰腺癌恶性程度高，病死率高，由于早期缺乏典型的临床表现，诊断时已经失去根治的机会[1-3]。早期诊断早期治疗尤为重要。血清肿瘤标志物水平测定简便经济，而胰腺癌实验室辅助诊断标准物主要有血清糖类抗原199(CA-199)，有待发现更多敏感性高的标志物。Endoglin主要在血管内皮细胞上表达，在造血祖细胞、成纤维细胞、间质细胞上表达较少，很少在淋巴管内皮细胞上表达。细胞膜糖蛋白Endoglin通过调节细胞对转化生长因子β(TGF-β)的反应，参与血管发育和重塑[3-7]。Endoglin在肿瘤新生的血管内皮细胞核肿瘤组织边缘部分血管内皮细胞中高表达，已成为抑制肿瘤血管生成、治疗肿瘤的理想分子靶位[6-9]。Endoglin在血管生成中是必需的，其在多种肿瘤组织均高表达，与肿瘤的发生、发展相关。本研究通过检测胰腺癌患者外周血中Endoglin浓度，探讨其在胰腺癌中的浓度变化及临床意义。

1 资料与方法

1.1 一般资料 选择2012年5月至2014年5月胰腺癌患者50例，男30例，女20例，平均年龄47岁。均经临床及病理组织学确诊，临床资料齐全。胰腺炎患者30例，男18例，女12例，平均年龄43岁。健康体检对照组50例，男28例，女22例，平均年龄49岁。任何两组患者的一般资料比较,差异无统计学意义(P>0.05),具有可比性。

1.2 仪器与试剂 Endoglin试剂盒购于美国Genzyme公司(批号CYT-2013)，酶标仪购于芬兰Thermo Lad Systems公司(型号MK3)。CA-199试剂盒为德国罗氏原装试剂盒，测定仪器为德国罗氏Cobale601。

1.3 方法 抽取待测者治疗前空腹静脉血2 mL，离心分离血清后置于聚丙二醇脂试管内-70 ℃冰箱保存待测。分离的血清标本均无溶血、脂血。采用双抗体夹心法测定Endoglin，严格按试剂盒说明书操作，正常参考范围0～4.5 μg/L；CA-199采用电化学发光免疫分析法(ECLIA)测定，正常参考范围0～37 U/mL。

2 结 果

2.1 各组血清中Endoglin水平比较 胰腺癌组血清中Endoglin表达水平明显高于胰腺炎组和健康对照组(P<0.01)；胰腺炎组与健康对照组之间差异无统计学意义(P>0.05)。见表1。

2.2 Endoglin在胰腺癌诊断中的检测结果 胰腺癌组Endoglin的阳性率为70%(35/50)，CA-199的阳性率为72%；Endoglin诊断胰腺癌的敏感性为70%，特异性为97.5%，阳性预测值为94.6%，阴性预测值为83.9%；CA-199诊断胰腺癌的敏感性为72%，特异性为95%，阳性预测值为90%，阴性预测值为84.4%。见表2。

表1 各组血清中Endoglin水平比较

注：与胰腺炎组和健康对照组比较，均aP<0.01,cP<0.05；与健康对照组比较，bP>0.05。

表2 各组血清中Endoglin水平比较[%(n/n)]

3 讨 论

近年来，胰腺癌的发病率逐年增加，由于该病缺乏早期典型的临床表现，诊断时已错过最佳治疗时机，所以早诊断、早治疗非常重要[2-3]。实验室的辅助诊断主要依赖肿瘤标志物的检测，但胰腺癌的相关肿瘤标志物较少，主要有CA-199。CA-199决定族是在糖蛋白或糖脂分子上的一个含唾液酸的五糖链，相对分子质量大于5 000 000。正常人体组织中很微，消化道恶性肿瘤，特别是胰腺癌、胆囊癌患者血清CA-199含量明显升高，该肿瘤辅助诊断指标对监测病情变化和复发有很大的价值。但是在某些消化道炎症，如急性胰腺炎、胆囊炎、胆汁淤积性胆管炎、肝炎、肝硬化等疾病，CA-199也有不同程度的升高，使得其辅助诊断胰腺癌特异性不高。Endoglin蛋白基因位于第9号染色体，产物含633个氨基酸，是一种同型二聚体的膜结合性糖蛋白。Endoglin又名CD105，为细胞膜糖蛋白，是相对分子质量为180×103的同型二聚体膜结合性糖蛋白，有633个氨基酸组成，主要由561个氨基酸组成的胞外区，含25个氨基酸的跨膜区和一个短的富含丝氨酸和苏氨酸的胞内区组成[9-12]。Endoglin是血管生成的必需的，而血管生成是肿瘤生长所需的，是肿瘤侵袭的重要的途径。Endoglin存在多种肿瘤组织的内皮细胞中，是肿瘤血管生成标志[5]。

本研究定量检测血清中的Endoglin采用双抗体夹心法，能够特异地捕获血清中微量的Endoglin，该法所用两种单克隆抗体分别针对Endoglin不同部位，特异性好。本研究结果证明胰腺癌患者血清中Endoglin水平远高于胰腺炎患者与健康人，差异有统计学意义(P<0.01)。既往研究显示Endoglin表达在肿瘤组织内皮细胞中，肿瘤细胞坏死或转移过程中释放Endoglin进入血循环，使得血清中的Endoglin水平升高。本研究结果显示，Endoglin在肿瘤的测定中具有重要临床意义。胰腺癌组Endoglin的阳性率为70%(35/50)，CA-199的阳性率为72%；Endoglin诊断胰腺癌的敏感性为70%，特异性为97.5%，阳性预测值为94.6%，阴性预测值为83.9%；CA-199诊断胰腺癌的敏感性为72%，特异性为95%，阳性预测值为90%，阴性预测值为84.4%。而血清相对于肿瘤组织标本更易于获得，在早期辅助诊断中更有意义。但由于Endoglin功能未完全阐明，其实用性有待一步深入研究。

综上所述，Endoglin可能在胰腺癌的发生起关键作用，其水平的过表达与胰腺癌的发生有重要关系，其可能有助于胰腺癌的早期诊断，值得进一步深入研究。

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Application of serum soluble Endoglin detection in diagnosis of pancreatic carcinoma

CHENRi-shou1,ZHANGJian-qing2

(1.DepartmentofClinicalLaboratory,DongguanMunicipalHospitalofTraditionalChineseMedicine,Dongguan,Guangdong523000,China;2.DepartmentofClinicalLaboratory,FirstAffiliatedHospital,SunYat-senUniversity,Guangzhou,Guangdong510080,China)

Objective To investigate the expression level of serum soluble Endoglin in the patients with pancreatic carcinoma and its clinical significance.Methods The expression level of serum Endoglin was measured by ELISA in 50 health controls,30 pancreatitis patients and 50 cases of pancreatic carcinoma.At the same time the serum CA-199 level was detected by using electrochemiluminescence immunoassay.Results The serum Endoglin levels in the pancreatic carcinoma group,pancreatitis group and healthy control group were (5.68±0.91)，(3.75±0.77)， (3.55±0.65)μg/L respectively,the serum Endoglin level in the pancreatic carcinoma group was higher than that in the pancreatitis group and the healthy control group(P<0.01).In the diagnosis of pancreatic carcinoma,the positive rate of Endoglin was 70%.Conclusion Serum Endoglin is highly expressed in pancreatic carcinoma and conducive to its diagnosis.

carcinoma; pancreatic neoplasm; soluble Endgolin

陈日寿，男，本科，主管技师，主要从事临床微生物和免疫工作。

10.3969/j.issn.1672-9455.2015.14.027

A

1672-9455(2015)14-2041-02

2015-02-20

2015-03-15)