百令胶囊对放射性肺损伤大鼠血浆IL-6、TNF-α、TGF-β1影响的实验研究

衷敬华，王祥财，许明君，施华球，王钇力，黄 莉，张积仁

(1.赣南医学院第一附属医院 肿瘤科，江西 赣州 341000；2.南方医科大学珠江医院 肿瘤中心，广东 广州 510282)



百令胶囊对放射性肺损伤大鼠血浆IL-6、TNF-α、TGF-β1影响的实验研究

衷敬华1，王祥财1，许明君1，施华球1，王钇力1，黄 莉1，张积仁2*

(1.赣南医学院第一附属医院 肿瘤科，江西 赣州 341000；2.南方医科大学珠江医院 肿瘤中心，广东 广州 510282)

目的：分析百令胶囊对放射性肺损伤大鼠血浆IL-6、TNF-α、TGF-β1含量的影响，探讨百令胶囊防治放射性肺损伤效果及可能作用机制。方法：将141只6周龄SD大鼠(清洁级，雄性)随机分对照组(n=21)、模型组(n=30)、百令预防组(n=30)、百令治疗组(n=30)、地塞米松治疗组(n=30)，各组大鼠均给予X射线全胸单次照射(20Gy)，正常对照组除外。每组大鼠分别于第2、4、6周不同时间点随机处死，心脏采血约5mL，置肝素抗凝管中，采用ELISA法检测血浆中TNF-α、IL-6、TGF-β1含量。结果：相较于模型组，地塞米松组、百令预防组、治疗组大鼠第2、4、6周血浆中IL-6、TNF-α、TGF-β1含量显著下降(P<0.01或P<0.05)；百令预防组大鼠第2、4、6周血浆中IL-6、TNF-α、TGF-β1含量低于地塞米松组和百令治疗组(P<0.01)，百令治疗组大鼠第2、4、6周血浆中IL-6、TNF-α、TGF-β1含量低于地塞米松治疗组(P<0.01)。结论：百令胶囊可抑制或减轻放射性肺泡炎性反应、肺纤维化进程，可能通过降低血浆中IL-6、TNF-α、TGF-β1等细胞因子的含量实现。

放射性肺损伤；百令胶囊；炎症因子；IL-6；TNF-α；TGF-β1

放射性肺损伤为胸部肿瘤放射治疗最为常见并发症之一，其发病机制尚不明确，尚无理想的治疗方法。目前，国内外关于百令胶囊预防及治疗放射性肺损伤的研究鲜有报道。本实验通过观察百令胶囊对放射性肺损伤大鼠血浆IL-6、TNF-α、TGF-β1含量的影响，探讨百令胶囊防治放射性肺损伤的临床效果，并对其可能作用机制进行探究。

1 材料与方法

1.1 实验材料

1.1.1 实验动物 6周龄SD大鼠(清洁级，雄性)141只，体重(180±20)g。

1.1.2 药物 百令胶囊,醋酸地塞米松片。

1.1.3 仪器 直线加速器,试剂盒。

1.2 方法

1.2.1 动物分组 将141只6周龄SD大鼠(清洁级，雄性)随机分为对照组(n=21)、模型组(n=30)、百令预防组(n=30)、治疗组(n=30)、地塞米松组(n=30)。

1.2.2 模型制作 采用直线加速器X线全胸单次照射建立放射性肺损伤大鼠模型，300cGy/min，总剂量为20Gy。

1.2.3 给药方法 百令预防组大鼠于照射前14天开始灌服百令胶囊，其余各组均于造模后第2天灌胃，对照组、模型组灌胃等体积生理盐水，治疗组灌服百令胶囊混悬液，地塞米松组灌胃地塞米松混悬液灌胃，每天1次。

1.3 取材方法及指标检测

对照组分别于照射后第2、4、6周取7只大鼠，其余各组则随机取10只，腹腔注射10%水合氯醛麻醉后，于大鼠心脏采血5mL，置肝素抗凝管中，置-20℃冰箱保存待查。采用ELISA(双抗体夹心法)测定血浆中IL-6、TNF-α、TGF-β1含量。

1.4 统计学处理

2 结果

2.1 各组大鼠血浆IL-6的含量变化比较

相较于模型组，百令预防组、治疗组、地塞米松组大鼠血浆IL-6的含量明显下降(P<0.05)；百令预防组大鼠血浆IL-6的含量低于地塞米松组和百令治疗组(P<0.05)，百令治疗组大鼠血浆IL-6的含量低于地塞米松组(P<0.05)。见表1。

表1 各组大鼠血浆IL-6含量变化比较

组别时间给药前2周4周6周正常对照组(n=21)35.±4.5550.02±6.0533.96±3.5931.23±2.88肺损伤模型组(n=30)32.45±5.32350.75±13.36257.92±12.04240.32±15.40地塞米松组(n=30)36.42±5.35314.09±14.30227.06±10.01206.37±13.76百令治疗组(n=30)35.67±5.54248.47±11.74159.91±9.47159.63±10.76百令预防组(n=30)34.57±3.26182.54±14.79121.00±11.87105.38±8.29

2.2 各组大鼠血浆TNF-α的含量变化比较

相较于模型组，地塞米松组、百令预防组、治疗组大鼠血浆TNF-α含量均显著下降(P<0.01)；百令预防组大鼠血浆TNF-α的含量显著低于地塞米松组和百令治疗组(P<0.01)，百令治疗组大鼠血浆TNF-α的含量显著低于地塞米松治疗组(P<0.01)。见表2。

表2 各组大鼠血浆TNF-α含量变化比较

组别时间给药前2周4周6周正常对照组(n=21)31.53±1.2532.58±0.9835.02±2.3734.02±1.93肺损伤模型组(n=30)35.20±1.32233.40±5.64179.13±9.58155.69±8.03地塞米松组(n=30)36.32±2.46181.00±17.96146.50±7.10123.41±7.17百令治疗组(n=30)35.14±2.35125.88±2.75111.24±9.3290.79±4.75百令预防组(n=30)34.22±2.4385.29±6.8355.05±5.6548.76±3.98

2.3 各组大鼠血浆TGF-β1的含量变化比较

相比于模型组，地塞米松组、百令预防组、治疗组大鼠血浆TGF-β1含量明显下降(P<0.01)。百令预防组低于地塞米松组和百令治疗组(P<0.01)，百令治疗组低于地塞米松组(P<0.01)。见表3。

表3 各组大鼠血浆TGF-β1含量变化比较

组别时间给药前2周4周6周正常对照组(n=21)38.68±2.3433.66±1.7144.66±2.4245.71±2.82肺损伤模型组(n=30)36.31±5.32540.34±14.84644.07±6.63858.90±7.19地塞米松组(n=30)37.53±7.35363.71±10.82460.79±11.39635.03±13.48百令治疗组(n=30)32.56±4.80256.28±8.19368.76±11.16465.34±8.64百令预防组(n=30)36.45±5.63153.05±14.92209.68±14.12272.58±9.95

3 讨论

越来越多研究证据表明，放射性肺炎及继而出现的肺纤维化可能由肺受照射后启动的细胞因子瀑布(cytokine cascade)所致[1]。该种细胞因子是较为复杂的细胞因子网络，研究[2]表明，肺受照射后数小时，肺照射野局部组织内合成、分泌大量细胞因子，进而增加炎性细胞活性而造成急性放射性肺炎的发生及发展。上述细胞因子主要分为两类：一类是以TGF-β为主参与组织修复和器官纤维化的因子；另一类是以IL-1和TNF-α为主参与局部损伤与炎症反应的因子。因此，放射性肺损伤的发生可能源于多种细胞因子的协同作用[3]。TNF-α因子被认为是放射性肺炎发生的启动因子，为强有力的促炎症反应因子。IL-6是多功能细胞因子，其与放射性肺损伤的发生存在一定关系。TGF-β是强有力的促成纤维细胞分裂因子，在纤维化的形成过程中起着重要作用。研究发现，SD大鼠照射2h后，支气管上皮细胞、肺泡巨噬细胞出现TNF-α强表达持续至第4周后呈降低趋势并维持较低水平。

本实验结果显示：与对照组比较，第2、4、6周模型组大鼠血浆中TNF-α、IL-6、TGF-β1含量均呈明显升高的趋势(P<0.01)。与模型组比较，第2、4、6周百令预防组、治疗组大鼠血浆中IL-6含量均明显降低(P<0.01)，地塞米松组大鼠血浆中IL-6含量亦降低(第2、4周，P<0.01；第6周，P<0.05)。与模型组比较，各治疗组大鼠血浆TNF-α、TGF-β1含量均明显降低(P<0.01)，地塞米松治疗组、百令治疗组、预防组大鼠血浆TNF-α、TGF-β1含量呈由高到低的顺序。表明百令胶囊对促炎症因子和促纤维化细胞因子具有抑制作用，相较于西药地塞米松疗效稳定。因此，百令胶囊可在抑制或减轻放射性肺泡炎性反应的同时抑制肺纤维化进程。

[1] 山广志.百令胶囊加味治疗放射性肺炎的临床观察[J].实用中医内科杂志,1996,10(4):37.

[2] 冯勤付,VUJASKOVIC Z,BRIZEL DM,等.阿米福汀对单次肺照射的保护作用及TGF-β1活性的影响[J].中华放射肿瘤学杂志,2004,13(3):222-225.

[3] 赵艳海,李志平,陈晓梅,等.人NSCLC细胞系X-线照射后TNF-α水平变化[J].中华放射医学与防护杂志,2009,24(4):313-316.

(责任编辑：李岚春)

2015-10-12

江西省卫计委中药局基金项目(2014A143)

衷敬华(1981-)，男，博士，江西省赣南医学院第一附属医院主治医师，研究方向为肿瘤靶向治疗基础与临床。

张积仁(1955-)，男，南方医科大学珠江医院肿瘤中心主任医师，研究方向为肿瘤靶向治疗基础与临床。E-mail:zhangjiren@126.com

R285

A

1673-2197(2015)24-0017-02

10.11954/ytctyy.201524007