精液沙眼衣原体感染对精液一氧化氮含量和精子顶体内透明质酸酶活性的影响

2015-03-11郑立宏杨丹高晓勤贵阳护理职业学院贵阳55008贵阳医学院遵义医药高等专科学校

山东医药 2015年5期

郑立宏，杨丹，高晓勤(贵阳护理职业学院，贵阳55008；贵阳医学院；遵义医药高等专科学校)

郑立宏1，杨丹2，高晓勤3(1贵阳护理职业学院，贵阳550081；2贵阳医学院；3遵义医药高等专科学校)

摘要：目的探讨精液沙眼衣原体(CT)感染对精液中一氧化氮(NO)含量和精子顶体内透明质酸酶(HYD)活性的影响。方法选择精液CT阳性男性不育123例作为观察组、CT阴性男性不育155例作为对照组。检测精液常规，免疫层析法检测CT感染情况，硝酸还原酶法检测NO含量，精子顶体内HYD活性和阳性反应率采用自制的药盒检测。结果观察组精液NO含量为(57.98±14.78)μmol/L，精子顶体内HYD活性和阳性反应率分别为(26.48±16.97) μm和(52.98±18.98)%；对照组精液NO含量为(34.89±8.47) μmol/L，精子顶体内HYD活性和阳性反应率分别为(38.22±16.39)μm和(71.32±19.13)%，观察组NO含量较对照组明显偏高(P<0.01)，精子顶体内HYD活性、阳性反应率均较对照组低(P均<0.01)。结论精液CT感染导致精液NO含量偏高和精子顶体内HYD活性下降，从而影响男性生育力。

关键词：沙眼衣原体；精液；一氧化氮；透明质酸酶；不育症

育龄夫妇不能生育的一个重要原因是男性生殖道感染，其中以沙眼衣原体(CT)感染最常见[1]。严重的CT感染会影响精液参数并增加精子凋亡，影响男性生育能力[2]。近年研究发现，精液一氧化氮(NO)含量异常增高会增加精子凋亡率，从而导致男性生育力下降[3]。精子顶体内的透明质酸酶(HYD)是受精的关键酶，HYD能够酶解透明质酸，溶解放射冠细胞外基质，使颗粒细胞松散，放射冠分解，并且还能水解透明带表面精子尾部周围一定区域，使得精子尾部能够自由摆动，为精卵融合、形成受精卵创造条件。目前，CT感染对精液NO含量及精子顶体内HYD活性的影响少见报道。本研究对男性不育患者的精液进行检测，分析精液CT感染对精液NO含量和精子顶体内HYD活性及阳性反应率的影响。

1资料与方法

1.1临床资料选择2012年3月～2013年12月在贵阳医学院附属医院确诊为男性不育患者278例，年龄22～40岁；其中CT感染阳性123例(观察组)，CT感染阴性155例(对照组)。两组年龄、不育病程等比较差异无统计学意义。

1.2方法

1.2.1检测方法受试者禁欲3～5 d，用新洁尔灭消毒手及尿道口，以手淫法获取1次射精的全部精液，放入一次性无菌干燥带盖塑料容器内，置于37 ℃恒温恒湿箱中约30 min，待完全液化。采用伟力彩色精子质量检测系统进行精液常规分析，精液量、精子密度、前向运动率、正常形态率的结果判定均按照WHO推荐方法和标准[4]。采用免疫层析法检测CT，硝酸还原酶法检测NO含量，自制药盒检测HYD活性及阳性反应率。HYD阳性反应：精子终止孵育后，每份孵育片于光学显微镜下均匀选取5～6个视野，随机观察200个精子头部，出现周围晕环者视为HYD阳性反应。HYD活性强度：测微尺测量视野下每个精子头部晕环直径的大小，取其均值作为判断HYD活性强度的指标。

2 结果

两组1次射精量、精子密度、精子前向运动率、精子正常形态率、精液NO含量、精液HYD活性及阳性反应率结果见表1。

3讨论

表1　两组精液检测结果比较±s)

注：与对照组比较，*P<0.05，△P<0.01。慢性前列腺炎的主要病因之一，因此其对男性生育的影响引起了人们的关注。郑立宏等[5]报道，精液中高浓度NO会促使精子凋亡率增加，从而导致男性生育力下降。目前已知的人精子顶体内含参与受精的酶有24种，其中HYD与受精关系密切[6]，HYD在受精时精子与卵子的结合过程中起重要作用，它不但参与精卵识别，还可使卵丘的颗粒细胞松散，分解放射冠，在顶体蛋白酶及其他酶系的密切配合下，为精卵融合、形成受精卵创造条件[7]。

CT是一类专性细胞内生长、有独特发育周期的原核细胞型微生物，很少从正常男性尿道中分离出来，但被认为是非淋菌性尿道炎、附睾炎和本研究显示，CT感染导致精液NO含量增加，精子顶体内HYD活性及阳性反应率下降，其可能的机制是CT感染会引发精子凋亡率增加。研究显示，凋亡生殖细胞内NOS活性增强，NOS参与NO的合成，由于NOS活性增强，所以精液合成NO数量增加；HYD活性和阳性反应率降低，其可能的机制是CT感染泌尿生殖系统，CT的原体不仅可以吸附在精子的表面，影响精子活力，而且可穿入精子头、体、尾各部，在精子内部形成始体并大量繁殖，直接造成精子膜和顶体的破坏[8]，从而导致HYD活性和阳性反应率下降。Zini等[9]报道，过量的NO在结构上具有活性很强的自由基结构特性，加强了精子膜的过氧化反应程度，损害精子，导致细胞膜功能障碍及结构损伤，因而降低了精子运动、顶体反应和获能。顶体反应能力减弱就会降低顶体内酶的释放，因此作为顶体内酶之一的HYC活性降低。另外，CT感染可刺激睾丸生精细胞、巨噬细胞产生肿瘤坏死因子α(TNF-α)，TNF-α升高使活性氧化物质(Ros)增高[10]，过量的Ros可使精子线粒体内、外膜上的不饱和脂肪酸发生脂质过氧化反应，使膜的脂质排列松散，内膜脊减少，使ATP合成降低，通过诱发白细胞增加影响精子形态[11]。本研究通过精液常规分析也证实了CT感染会导致精子密度、向前运动率、正常形态率下降。据报道大部分患者的精子形态异常都是由于顶体内酶的异常所致[12]。精子顶体完整率可间接反映顶体内酶的状况，CT感染导致精子顶体完整率明显降低，酶的活性下降，因此HYD活性及阳性反应率下降[13]。

综上所述， CT感染会引发精液NO含量增加及HYD活性及阳性反应率下降，导致精子凋亡率增加，降低男性生育力；而HYD活性及阳性反应率下降，导致受精率下降，从而致使男性生育力下降。

参考文献：

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(收稿日期：2014-09-12)

通信作者：杨丹

基金项目：贵阳市科学技术局科技计划项目(2012-1)。