阴道分泌物干化学酶法与传统方法检测结果的比较

2015-03-11经先振牛国平江苏省徐州市中心医院检验科221009

医学理论与实践 2015年23期

经先振　王　齐　牛国平　江苏省徐州市中心医院检验科　221009

经先振王齐牛国平江苏省徐州市中心医院检验科221009

摘要目的：探讨阴道分泌物干化学酶法检测结果与传统方法检测结果的差异。方法：对598例妇产科门诊住院患者阴道分泌物同时使用干化学酶法检测过氧化氢、白细胞酯酶、唾液酸酶、β-葡萄糖醛酸酶、乙酰氨基葡萄糖苷酶、pH值等6项干化学酶法，并同时进行传统的显微镜镜检、胺试验检测，并对两种方法的检测结果进行比较。结果：唾液酸酶测定细菌性阴道炎与传统方法比较结果比较差异有统计学意义(McNemar检验结果P<0.001)，两种方法检测结果一致性一般(Kappa=0.461>0.4)。干化学酶法判定霉菌性阴道炎，滴虫性阴道炎的结果与传统方法检测结果比较差异有统计学意义(P<0.001)，一致性结果较差(Kappa值分别为0.044和0.107均<0.4)。白细胞酯酶与镜检结果检测结果比较差异有统计学意义(McNemar-Bowker检验结果P<0.001)，两种方法检测结果一致性很差(Kappa=-0.017<0) 结论：受多种因素的影响，两种方法检测结果差异有统计学意义，一致性较差。如何减少消除两种方法的差异，更好的提高干化学酶法在阴道炎诊断的作用，有待进一步探讨。

关键词阴道分泌物干化学酶法显微镜检查

阴道炎是妇科最常见疾病，根据病因将其分为感染性阴道炎、刺激性阴道炎和萎缩性阴道炎3种类型，其中由病原体导致的感染性阴道炎占到90%以上。包括由白色念珠菌感染为主的霉菌性阴道炎、加德纳菌感染的细菌性阴道炎及阴道毛滴虫导致的滴虫性阴道炎。阴道分泌物是女性生殖系统分泌的液体，主要由阴道黏膜、宫颈腺体、前庭大腺及子宫内膜的分泌物混合而成。为白色稀糊状、无气味、量多少不等。阴道炎症时阴道分泌物增多，并因病原体不同而呈不同的颜色性状。阴道分泌物的检查对确定感染的病原体，明确病因具有积极的作用。传统的阴道分泌物检查主要是显微镜镜检查找病原体，并结合pH测定、胺试验对阴道炎的种类进行判断[1,2]。传统方法操作简便，但要求检查者经验丰富，结果易受主观因素影响，试验重复性不高。近年随着检验医学的发展，基于干化学酶反应技术的阴道分泌物检测的生化指标：过氧化氢、白细胞酯酶、唾液酸酶、β-葡萄糖醛酸酶、乙酰氨基葡萄糖苷酶、pH值等应用于临床。本文就阴道分泌物干化学酶法与传统方法检测的结果进行比较，探讨干化学酶法应用于细菌性阴道炎、霉菌性阴道炎、滴虫性阴道炎及白细胞酯酶检测的临床价值。

1资料与方法

1.1临床资料2013年2-3月我院妇产科门诊患者598例，年龄17～79岁，平均年龄33.6岁。由妇产科医生用无菌棉签采集患者的阴道分泌物，并立即送检。

1.2试剂与仪器干化学酶法检测使用江苏硕世生物科技有限公司生产的阴道炎检测工作站及炎速知阴道炎联合快速检测试剂盒，0.9%氯化钠溶液、10%氢氧化钾溶液，5%冰醋酸。

1.3试验方法阴道分泌物采集后立即送检，放入加样管中滴加5～6滴快速检测稀释液，反复旋转拭子促进所附着的分泌物释放，并将棉签的液体挤压流回试管，弃去棉签得到样本液。干化学酶法测定按检测说明书、仪器操作规程进行检测。为减少误差，传统检测使用干化学酶法测定后的样本液按操作规程进行检测。

1.4结果判定

1.4.1干化学酶法结果判定：炎速知联合检测试剂盒有六项检测指标，包括过氧化氢、白细胞酯酶、唾液酸酶、β-葡萄糖醛酸酶、乙酰氨基葡萄糖苷酶、pH，用于检测细菌性阴道炎、霉菌性阴道炎、滴虫性阴道炎的指标如下：唾液酸酶阳性提示细菌性阴道炎；乙酰氨基葡萄糖苷酶阳性，pH≤4.6提示霉菌性阴道炎，pH≥4.6提示滴虫性阴道炎；白细胞酯酶根据颜色深浅分为-、+-、+、++、+++5个等级。因需氧性细菌及乳酸杆菌湿片法无法确定，所以β-葡萄糖醛酸酶、过氧化氢本文未予分析。

1.4.2传统方法结果判定：细菌性阴道炎诊断标准为：(1)阴道分泌物稀薄均匀；(2)分泌物pH>4.5；(3)胺试验阳性；(4)出现线索细胞；其中三项阳性为BV[3]。霉菌性阴道炎诊断标准为，湿片或KOH涂片看到白色念珠菌孢子或菌丝为阳性。滴虫性阴道炎以高倍镜看到湿片中的滴虫为阳性[2]。白细胞判定标准对应白细胞酯酶分为5个等级：0个/HP为-，0个

1.5统计处理使用SPSS19.0统计软件，对数据资料采用配对资料McNemar检验，检验差异性,P<0.05为差异有统计学意义；Kappa检验一致性[5,6]。

2结果

2.1两种方法检测细菌性阴道炎(BV)去除76例VVC、TV后的522例标本中唾液酸酶测定BV阳性为94例，传统方法阳性为59例。以传统方法为参考，阳性符合率为69.45%，阴性符合率为88.55%,总符合率为86.40%，应用SPSS19.0分析数据，显示两种方法检测结果比较差异有统计学意义(McNemar检验结果P<0.001)，两种方法检测结果一致性一般(Kappa=0.461>0.4)。见表1。

表1　两种方法检测BV结果

2.2两种方法检测霉菌性阴道炎(VVC)去除67例TV、BV后的531例标本中通过乙酰氨基葡萄糖苷酶阳性和pH≤4.6(酶法判断)检测霉菌阳性142例，KOH法湿片镜检诊断霉菌阳性68例。以KOH湿片法为参考，阳性符合率为32.35%，阴性符合率为74.08%,总符合率为68.74%，应用SPSS19.0分析数据，显示两种方法检测结果比较差异有统计学意义(McNemar检验结果P<0.001)，两种方法检测结果一致性较差(Kappa=0.044<0.4)。见表2。

表2　两种方法检测VVC结果

2.3两种方法检测滴虫性阴道炎(TV)去除127例BV、VVC后的471例标本中通过乙酰氨基葡萄糖苷酶阳性和pH≥4.8(酶法判断)检测滴虫阳性81例，湿片镜检诊断滴虫阳性8例，以湿片镜检为参考，阳性符合率为75.00%，阴性符合率为83.80%,总符合率为83.65%，应用SPSS19.0分析数据，显示两种方法检测结果比较差异有统计学意义(McNemar检验结果P<0.001)，两种方法检测结果一致性较差(Kappa=0.107<0.4)。见表3。

表3　两种方法检测TV结果

2.4两种方法检测白细胞通过检测白细胞酯酶与湿片镜检结果如表4，应用SPSS19.0分析数据，显示两种方法检测结果比较差异有统计学意义(McNemar-Bowker检验结果P<0.001)，两种方法检测结果一致性很差(Kappa=-0.017<0)。见表4。

表4　两种方法检测白细胞结果

3讨论

阴道炎是妇科最常见疾病，其中主要由白色念珠菌、加德纳菌、阴道毛滴虫三种病原体导致的感染性阴道炎占到90%以上。传统的阴道分泌物检查通过显微镜观察找出致病的病原菌，并结合胺试验、pH,对阴道炎的临床诊断与治疗具有重要的意义。近年来国内外在研究应用阴道分泌物的生化标志物间接地检测病原微生物，来诊断阴道炎。在国内，利用干化学酶法检测阴道分泌物的生化指标已开始应用于临床，并开发出自动检测工作站。新的检测方法与技术的应用，不但减少了人为影响，提高了工作效率，而且为检测的标准化提供了机会。然而，无论是传统的阴道分泌物检查，还是干化学酶法检测易受多种因素的影响。已有许多学者对两种方法的检测结果进行了研究，有研究显示两种方法的检测结果差异不大[7,8]。也有研究显示两种方法结果差异明显[4]。本文结果显示以传统方法为对照，干化学的结果较差，一些检测出线索细胞、白色念珠菌、阴道毛滴虫的病原菌的阳性标本，干化学相关酶检测结果阳性符合率分别为69.45%、32.35%、75.00%表明干化学结果对诊断阴道炎疾病的诊断意义不大。在检测反映炎症程度标志物白细胞的结果来看，白细胞酯酶的结果与镜检结果比较一致性也很差(kappa=-0.017<0)。

本文结果显示无论是干化学酶法与成熟的传统方法检

测的结果相比较差异具有统计学意义，一致性较差。产生此结果与以下原因有关：(1)标本采样不符合试剂盒的标准要求：取样前24h应禁止性交、盆浴、阴道灌洗及局部上药等。雌激素使用者，孕期、经期样品会对结果判读有影响，激素滥用者会对检测结果产生影响，不适宜做该项检测。有研究表明精液对阴道分泌物相关化学指标造成假阳性的影响。(2)干化学反应本身容易受到多种因素影响。有大量的研究表明相交成分比较简单的尿液干化学反应结果都受到多种因素干扰，使结果产生假阴性或假阳性。相对来说一些抗原抗体的反应特异性比较高[9]。

以上结果表明，阴道分泌物标志物检测较传统方法简便，更易于标准化，并且可以使用自动检测系统，进一步提高其优势，替代人工检测是未来的趋势，但是在相关标志物选择上应该选用特异性强、灵敏度高、不易受干扰的指标，才能使其临床应用价值提高。

参考文献

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◎致作者◎