肾素血管紧张素系统在胰腺炎早期调控机制中的研究

张勇　李旋　林德新　夏悦明352100福建医科大学附属宁德市医院普外二科



肾素血管紧张素系统在胰腺炎早期调控机制中的研究

张勇李旋林德新夏悦明
352100福建医科大学附属宁德市医院普外二科

摘要目的：探讨血管紧张素Ⅱ(AngiotensinⅡ)的AT1受体拮抗剂奥美沙坦酯对大鼠重症急性胰腺炎(SAP)早期局部微循环的调控机制研究。方法：将30只SD大鼠随机分为假手术(SO)组、SAP组、奥美沙坦酯(O)组3组，并分1 h 1个时间段观察取材。观察胰腺组织病理变化、胰腺组织AngⅡ的水平、大鼠血清淀粉酶(AMY)。结果：SAP组胰腺组织病理损伤、AngⅡ的水平、血清MDA和AMY明显高于其他2组；奥美沙坦酯治疗组这些指标显著低于SAP组，但均高于SO组(P＜0.05)。结论：奥美沙坦酯能在胰腺炎早期阻断胰腺局部微循环RAS，减轻胰腺组织损伤，对胰腺炎具有一定保护作用。

关键词奥美沙坦酯；血管紧张素系统；胰腺炎；微循环

Study on the early regulation mechanism of the renin angiotensin system in pancreatitis

Zhang Yong,Li Xuan,Lin Dexin,Xia Yueming
The Second Department of General Surgery,Ningde Hospital Affiliatedto Fujian Medical University 352100

Fund project Special funds for scientific research of non affiliated hospitals of Fujian Medical University(NO:FZS13024Y)

Abstract Objective:To investigate the early local microcirculation regulation mechanism of vascular tension angiotensinⅡ(angiotensinⅡ)AT1 receptor antagonist olmesartan medoxomil in rats with severe acute pancreatitis(severe acute pancreatitis SAP).Methods:30 SD rats were randomly divided into the sham operation(SO)group,the SAP group and the olmesartan group(O group),we observed and drew materials 1 time per 1 hour.We observed the pathological changes of pancreatic tissue,the level of AngⅡin the pancreas tissue,and the serum amylase(AMY) of rats.Results:The pathological damage of pancreatic tissue,the level of AngⅡ,serum MDA and AMY of the SAP group were significantly higher than the other two groups.These indexes of the olmesartan treatment group were lower than those of the SAP group,but higher than those of the SO group(P＜0.05).Conclusion: Olmesartan medoxomil can block RAS of local pancreatic microcirculation in early pancreatitis,reduce the damage of pancreatic tissue,with a protective effect against pancreatitis.

Key words Olmesartan medoxomil;The renin angiotensin system;Pancreatitis;Microcirculation

重症急性胰腺炎是临床上常见的危重疾病，病情发展快，病死率高。本实验探讨研究血管紧张素Ⅱ(AngⅡ)的AT1受体拮抗剂奥美沙坦酯在大鼠重症急性胰腺炎早期对胰腺组织局部微循环的调控，以进一步认识SAP的发病机制。

资料与方法

取福建医大动物实验中心SPF级SD大鼠30只，体重200～250 g。

实验分组和模型制备：SAP模型：SD大鼠腹腔注射6%的水合氯醛(0.35 mL/ 100 g)麻醉，开腹找到胰管，以0.1 mL/ min的速度向胰胆管内逆行注入4%的牛磺胆酸钠(0.1 mL/100 g)，胰腺组织病理检查提示胰腺缺血坏死，即SAP模型建立成功。①假手术组(SO组，10只)，腹腔注射6%的水合氯醛(0.35 mL/100 g)麻醉，开腹后仅翻动胰腺即关腹；②按上述方法制备SAP组；③O组：按上述方法，造模前1 h将奥美沙坦酯片(8 mg/kg)研粉后，经灌胃针灌入SD大鼠胃内。各组动物于，术后1 h心脏采血，离心(3000r/min，10 min)后分离血清，于-20℃保存备用，处死大鼠，取胰腺组织用于光镜组织病理学检查。

标本检测方法：AngⅡ采用酶联免疫吸附试验(ELISA)；AMY采用碘-淀粉比色法；MDA采用硫代巴比妥酸(TBA)法。胰腺组织经4%的多聚甲醛固定24 h，石蜡包埋，HE染色后光镜下观察，并根据Schmidt J等评分[1]。

统计学方法：应用SPSS 13.0统计软件分析，数据以(±s)表示，各组间比较采用两独立样本配对t检验。

结果

1 hSAP组AngⅡ水平、血清MDA、 AMY及病理损伤明显高于其他2组(P＜0.05)，O组这些指标显著低于SAP组(P＜0.05)，但均高于SO组(P＜0.05)，见表1。

讨论

大量研究资料显示肾素血管紧张素系统(RAS)存在于胰腺局部组织，且主要位于胰腺尾部。胰腺炎发作时，胰腺局部RAS被激活，可能在调控胰腺微循环及诱导炎症反应方面起重要作用[2]。奥美沙坦是AT1受体拮抗剂，其主要作用为改善循环及降压，奥美沙坦酯经胃针灌入胃内后，转化为奥美沙坦发挥作用，约1.2 h血药浓度达峰，且AngⅡ主要通过其AT1受体拮抗剂发挥保护作用[3]。

早期重症急性胰腺炎实验中的研究发现，SAP组血清淀粉酶、AngⅡ水平明显偏高，胰腺组织周围渗出，组织细胞

明显水肿、出血、坏死，伴有周围血管炎性浸润。奥美沙坦酯经胃灌入后1 h，O组胰腺组织病理损伤、淀粉酶及AngⅡ水平均明显较SAP组大鼠减轻(P＜0.05)，差异有统计学意义。急性胰腺炎发病机制中有1个显著的共同特征，即存在氧自由基、炎症级联瀑布反应作用，MDA为氧自由基产物，在SAP时血清MDA水平明显升高，经奥美沙坦处理后血清MDA水平较前减少。奥美沙坦能抑制NAD(P)H氧化酶活性，进而减少了氧自由基生成，减轻炎症反应[4]。

综上所述，在重症急性胰腺炎发病早期，AT1受体拮抗剂(奥美沙坦)确实起了一定的作用，可直接或间接改善胰腺组织局部血供，减少氧自由基、炎症介质产生等。但随着胰腺损伤加重，随着病情进展，可能RAS的启动也会损害细胞血供，加重缺血，加重胰腺炎[5]；具体机制和自身调控仍须进一步探明。对上述过程的进一步认识，将有助于我们更全面地了解急性胰腺炎的病理、生理机制，为临床治疗该疾病提供一条新思路。

表1　1 h 3组大鼠AngⅡ水平、血清MDA、AMY水平、胰腺组织病理损伤(±s)

表1　1 h 3组大鼠AngⅡ水平、血清MDA、AMY水平、胰腺组织病理损伤(±s)

注：SO组、SAP组、O组任何两组比较，差异均有统计学意义，*P＜0.05。

组别　AngII水平(μg/L)　　淀粉酶(AMY)U/L　　丙二醛(MDA)nmmol/L　　胰腺组织病理评分SO组(10只)　26.23±4.15　215±24　1.02±0.16　0.25±0.04 SAP组(10只)　165.02±21.07*　4 128±525*　11.72±1.02*　7.06±0.39*O组(10只)　112.22±10.90*　1 827±116*　4.85±0.37*　4.24±0.45*

参考文献

[1] Schmidt J,Rattner DW,Lewandrowski K,et al. A better model of acute pancreatitis for evaluatingtherapy[J].AnnSurg,1992,215(1): 44-56.

[2] Skipworth JRl,Nijmeijer RM,Van Santvoort HC,et al.The effect of renin angiotensin system genetic variants in acute pancreatitis[J]. Annals of Surgery,2015,261(1):180-188.

[3] Vaziri ND1,Bai Y,Ni Z,et al.Intra-renal angiotensinⅡ/AT1 receptor,oxidative stress, inflammation,and progressive injury in renal mass reduction[J].Pharmacol Exp Ther,2007, 323(1):85-93.

[4] Kadowaki D1,Anraku M,Sakaya M,et al.Olmesartan protects endothelial cells against oxidative stress-mediated cellular injury[J]. Clinial and Experimental Nephrology,2015, 23(1):122-127.

[5] Can Bl,Sali M,Batman A,et al.Valsartan-induced acute pancreatitis[J].Internal Medicine,2014,53(7):703-705.

基金项目福建医科大学非直属附属医院科学研究专项基金项目(NO：FZS13024Y)

doi:10.3969/j.issn.1007-614x.2015.35.2