WADiana全自动配血系统在预输血患者抗体筛查中的应用

2015-03-04宋雪冬刘文国郭长义宋任浩

中国医学装备 2015年12期

宋雪冬刘文国郭长义宋任浩

宋雪冬①刘文国①郭长义①宋任浩②*

目的：探讨WADiana全自动配血系统在患者不规则抗体筛查中的应用价值，了解本地区预输血患者不规则抗体检出率、分布特点以及对预输血患者进行抗体筛查的意义。方法：采用微柱凝胶法对9842例预输血患者进行不规则抗体筛查，筛查阳性者用谱细胞进一步做特异性鉴定。结果：①9842例预输血患者检出不规则抗体79例，阳性检出率为0.80%，其中以Rh血型系统和MNSs血型系统多见，分别占41.77%和15.19%。非特异性抗体占25.32%，IgG类占68.35%；②女性患者检出率为1.10%，男性患者检出率为0.54%，女性高于男性，差异有统计学意义(x2=9.49，P＜0.01)。有输血和(或)妊娠史的患者检出率为1.38%，高于无输血和(或)妊娠史患者的检出率，差异有统计学意义(x2=43.82，P＜0.01)。结论：预输血患者不规则抗体检出率较高，在输血前对其进行抗体筛查有助于血液选择，对于保证输血安全具有重要意义。

预输血患者；不规则抗体；筛查; 自动配血系统

[First-author's address]Clinical Laboratory, The Fourth People's Hospital of Langfang City, Langfang 065700, China.

不规则抗体又称意外抗体，指不符合ABO系统Landsteiner规则的血型抗体，是指抗-A、抗-B或抗-AB以外的其他抗体。不规则抗体可引起较为严重的溶血性输血反应、造成输血无效以及难以进行配合型输血而延误治疗。因此，筛查不规则抗体，可避免预输血患者输入相应抗原的红细胞以减少输血反应、提高输血疗效，尤其是对于有输血史和(或)妊娠史的患者而言，不规则抗体筛查是输血管理的重要内容之一[1]。美国输血协会规定输血患者输血前应检测意外抗体，以减少可能发生的输血反应[2]。为提高输血的安全性，本研究采用WADiana全自动配血系统，对临床预输血患者进行不规则抗体的筛查，并对影响检测结果进行分析总结，以确保临床输血安全和确认该系统在不规则抗体检测中的应用效果。

1 资料与方法

1.1 一般资料

选取2010年1月至2014年2月廊坊市第四人民医院预输血患者9842例，年龄2个月至89岁，平均年龄(45.23±40.17)岁。其中男性5306例，女性4536例；有输血史3544例；有妊娠史1278例。以乙二胺四乙酸二钠(EDTA-Na2)抗凝管采集患者静脉血3～5 ml，以2500 r/min离心8 min分离血浆，置于2～8 ℃冰箱保存，24 h内进行检测。

1.2 仪器与试剂

使用WADiana全自动配血系统(西班牙Grifols公司)；微柱凝胶检测卡、37 ℃恒温孵育器及检测卡离①廊坊市第四人民医院检验科河北廊坊 065700②河北省血液中心检验科河北石家庄 050071 *通讯作者：songrenhao888@163.com心机(瑞士DiaMed公司)；Ⅰ～Ⅲ号抗体筛查细胞及抗体特异性鉴定谱细胞(美国IMMUCOR公司)。试剂均检定合格并在有效期内使用。

1.3 检测方法

标本的条码读取、稀释和加样以及检测卡的孵育、离心和结果判读均由全自动配血系统自动完成，检测结果由机器自动传输到医院信息系统(hospital information system，HIS)。按WADiana全自动配血系统操作规程进行操作。采用微柱凝胶法进行不规则抗体筛查和特异性鉴定。

1.3.1 抗体筛查

向检测卡的Ⅰ～Ⅲ微柱孔中各加入50 μl受检血浆，再分别加入Ⅰ～Ⅲ号抗体筛查细胞50μl，将检测卡放入37 ℃孵育器中孵育15 min，取出后将检测卡以1100 r/min离心9 min。判断结果：红细胞留在微管顶部，表示筛查细胞与相应的抗体发生凝集，判定为阳性；红细胞沉在微管底部，表示筛查细胞未与相应的抗体发生凝集，判定为阴性。

1.3.2 特异性鉴定

将Ⅰ～Ⅲ号抗体筛查细胞改为1～10号抗体鉴定谱细胞，受检血浆为抗体筛查阳性的患者血浆。操作步骤和结果判断同上。受检血浆与谱细胞均凝集判断为非特异性抗体，受检血浆与部分谱细胞凝集为特异性抗体。根据反应格局以及与相应抗原反应的阴阳性来判断为何种抗体[3]。采用巯基试剂进行Ig类别鉴定[4]。

1.4 统计学方法

采用SPSS 13.0统计软件进行数据统计与分析，计数资料采用x2检验，以P＜0.05为差异有统计学意义。

2 结果

2.1 不规则抗体检出率

在9842例预输血患者中检出不规则抗体79例，阳性检出率为0.80%，以Rh血型系统和MNSs血型系统多见，分别占41.77%(33/79)和15.19%(12/79)，非特异性抗体占25.32%(20/79)；79例不规则抗体大多为IgG类，占68.35%(54/79)。

2.2 不规则抗体分布情况

在检出的不规则抗体中男性患者不规则抗体检出率为0.54%(29/5306)，女性患者不规则抗体检出率为1.10%(50/4536)，女性高于男性，差异有统计学意义(x2=9.49，P＜0.01)；有输血和(或)妊娠史的患者不规则抗体检出率为1.38%(67/4822)，高于无输血和(或)妊娠史患者0.23%(12/5020)，差异有统计学意义(x2=43.82，P＜0.01)，见表1。

3 讨论

WADiana全自动配血系统是基于微柱凝胶技术，利用计算机自动控制操作进行血型血清学试验的自动化仪器[5]。该仪器拥有全自动高灵敏度检验免疫-血液学分析系统，通过一套整合、连续的程序来完成样品及试剂的添加，可自动完成孵育、离心、判读及凝块检测等功能。可连接实验室信息系统(laboratory information system，LIS)或HIS，实现数据共享。具有操作简单、方便及无携带污染等优势。

表1 79例不规则抗体分布情况

本研究应用该仪器对临床患者开展不规则抗体筛查，并根据美国输血协会第十二版操作技术规范手册将微柱凝胶法作为临床血型相关检测的推荐方法，对检测结果进行分析总结。由于血型系统具有人群分布的多态性和复杂性，不规则抗体的发生频率和特异性分布在国内外人群或同一地区不同群体中均有一定差别[6]。有文献报道，通过常规方法进行不规则抗体筛查，不规则抗体阳性检出率为0.3%～2%[7]。在美国输血协会《全球的输血标准及手册》(第13版)的“输血标准”中规定，对每一份交叉配血的血样都应检测针对红细胞抗原的不规则抗体(抗体筛选及/或抗体鉴定)[8]。本研究中9842例输血前患者不规则抗体检出率为0.80%(79/9842)，与陈丽娟等[9]报道的0.75%阳性检出率基本一致，略低于危艳顺等[10]报道的1.00%检出率，但高于刘开良等[11]报道的0.2%的检出率。不规则抗体的检出率除与地域、患者人群构成有关以外，还与筛查方法的敏感度有关。其中Rh血型系统产生的不规则抗体比例最高，占41.77%(33/79)，与王谦[12]、许基平等[13]的研究结果一致，显然Rh血型系统的不规则抗体是引发免疫性溶血性输血不良反应的主要不规则抗体。本研究结果显示，在Rh血型系统中抗-E为18例，在Rh血型系统中占54.55%(18/33)，而抗-D仅为6例，占18.18%(6/33)。

通常汉族人群D抗原阳性率较高，抗-D的发生频率本应较高，但因我国在临床上较早采用D抗原相容性输血，患者输血免疫产生的抗-D比例显著下降，故Rh-D阳性而Rh-E阴性输血患者可能引起输血不良反应的情况应该引起足够的重视，是否有必要采用E抗原相容性输血值得进一步探讨。本研究结果还显示，仅次于Rh血型系统产生不规则抗体最多的为MNSsU血型系统，其中大部分为IgM类，在体内一般不会引起免疫性反应，但在低温麻醉状态时，可激活补体，发生溶血反应。79例不规则抗体68.35%(54/79)为IgG类，提醒不规则抗体大多是由于免疫产生，其检测方法应包括盐水介质法和非盐水介质法，以避免漏检。筛查阳性的输血患者，必须应用鉴定谱细胞做抗体特异性鉴定，输入无相应抗原的血液，才能保证输血的安全。

本研究结果表明，有输血和(或)妊娠史患者的不规则抗体检出率高于无输血和(或)妊娠史患者，与以往多项调查[10-13]结果相符。妇女在妊娠过程中，当胎儿的红细胞上有同种异型抗原时可导致孕妇产生不规则抗体；输血产生临床疗效的同时也使患者增加了接触异型抗原的机会，因此产生抗体的机会增加。有研究显示，因多次输血产生不规则抗体的概率为15%～20%[14]。不规则抗体的发生频率还存在着性别差异，男性患者不规则抗体检出率为0.54%(29/5306)，女性患者不规则抗体检出率为1.10%(50/4536)，女性患者的检出率高于男性。这与女性患者在妊娠或流产等生理或非生理等因素影响下机体受免疫刺激有关，且同时存在着输血和妊娠双重免疫机会，故女性的不规则抗体检出率较高[15]。因此，对有输血史和妊娠史的患者，尤其是有妊娠史的反复输血的患者进行不规则抗体筛查具有更为重要的意义。

综上所述，预输血患者不规则抗体检出率较高，在输血前对输血患者进行不规则抗体筛查，有助于血液的选择，可避免输入含有相应抗原的血液，对于保证患者的输血安全和提高输血疗效具有重要意义。

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Research on applied value of WADiana automated blood analysis system in screening of irregular antibody in pre transfusion patients/

SONG Xue-dong, LIU Wen-guo, GUO Chang-yi, et al//
China Medical Equipment,2015,12(12):100-102.

Objective:To discuss the application value of WADiana automated blood analysis system in irregular antibody screening, and understand the detection rate and distribution characteristics of irregular antibody among pre transfusion patients in our region and explore the meaning of antibody screening for pre transfusion patients.Methods:Nine thousand eight hundred and forty two cases of pre transfusion patients in our hospital were carried irregular antibody screening by using the micro column gel method, the positive specimens was made further identification by using specific spectrum cells.Results:(1)79 cases of irregular antibodies were detected in 9842 patients with pre transfusion and positive detection rate of 0.803%, among them Rh system and MNSs system were account for 41.77%(33/79) and 15.19% (12/79) respectively, nonspecific antibodies account for 25.32%(20/79), most of of irregular antibodies were IgG class, accounted for 68.35%(54/79).(2)The detection rate was 1.102%(50/4536) in female, and 0.547%(29/5306) in male, that in female were higher (x2=9.49, P＜0.01). The detection rate in patients with a history of blood transfusion/ pregnancy was 1.389%(67/4822), and higher than the rate in patients with no history of blood transfusion/pregnancy (x2=43.82, P＜0.01).Conclusion:The detection rate of irregular antibody among pre transfusion patients in our region is higher, the antibody screening before blood transfusion would help the blood to choose, and is of great significance to ensure the safety of blood transfusion.

Pre transfusion patients; Irregular antibody; Screening; Automated blood analysis system

10.3969/J.ISSN.1672-8270.2015.12.032

1672-8270(2015)12-0100-03

R457.13