胱抑素C、超敏C 反应蛋白、尿微量蛋白和尿β2-微球蛋白在早期糖尿病肾病诊断中的应用

仲晓玲，张 静，李 平

(江苏省南京市鼓楼医院 输血科，江苏 南京，210008)

糖尿病并发症涉及大动脉血管病变和微血管病变，微血管病变中又以糖尿病肾病(DN)最为重要，是糖尿病致死、致残的主要因素，如不及诊治，终末期患者5年期生存率不足20%［1］。DN 发病相对隐匿，病情呈缓慢进展，早期临床体征不明显，常规检查易造成漏诊而延误治疗，影响预后。近年来，临床应用内源性标志物如血清胱抑素C(Cys-C)、尿微量蛋白(U-mAlb)、尿β2-微球蛋白(β2-MG)评价肾小球滤过功能日趋广泛［2－3］，另一方面，超敏C 反应蛋白(hs-CRP)等与糖尿病血管病变发生发展密切相关［4］。本研究通过检测120例DN 患者血清Cys-C、血清hs-CRP、尿β2-MG、和U-mAlb 水平，与30例健康人对比，探讨联合检测在DN 早期诊断中的应用价值，现报告如下。

1 资料与方法

1.1 一般资料

选取2012年12月—2014年6月南京市鼓楼医院住院治疗的2 型糖尿病患者110 为研究对象，均符合中华医学会《中国2 型糖尿病防治指南(2010 版)》中关于2 型糖尿病的诊断标准［5］，同时排除存在急慢性肾炎、原发性高血压、泌尿系统感染、糖尿病酮症酸中毒，以及伴有恶性肿瘤或严重心肺功能不全患者。其中男58例，女52例;年龄40～75岁，平均(54.5±6.8)岁。根据患者24 h 尿微量白蛋白排泄率(UAER)将患者分为白蛋白正常组(UAER＜30 mg/24 h)、微量白蛋白组(UAER 30～300 mg/24 h)和大量白蛋白组(UAER＞300 mg/24 h)组。白蛋白正常组32例，其中男17例，女15例，平均(53.5±5.6)岁;微量白蛋白组45例，其中男24例，女21例，平均(54.1±7.2)岁;大量白蛋白组33例，其中男17例，女16例，平均(55.1±6.1)岁。另选取同期健康体检者30例为对照组，其中男14例，女16例，平均(54.9±6.2)岁。4组性别、年龄等一般资料差异无统计学意义(P＞0.05)。患者均签署知情同意，并配合相关检查。

1.2 方法

1.2.1 样本采集:研究对象于清晨空腹状态下抽取肘静脉血3 mL 置于促凝管，2 h 内分离血清，3000 r/min 离心10 min 置于－70°C 冰箱保存备检。另嘱咐受试者分别留取24 h 尿液和晨尿，尿液混匀后取5 mL 于试管内待测。

1.2.2 检测方法:血清hs-CRP 检测采用酶联免疫吸附试验，血清Cys-C、尿β2-MG 和U-mAlb 均采用免疫比浊法，仪器均选用日立7600 全自动生化分析仪，操作均按各试剂盒要求严格执行。

1.3 观察指标

观察不同组别受试者血清Cys-C、hs-CRP、尿β2-MG 和U-mAlb 表达水平的差异。并计算不同指标以及联合检测下诊断的灵敏度、特异度、准确度。实验室各项指标正常值范围:血清Cys-C＜1.25 mg/L，hs-CRP:0～2.1 mg/L，尿β2-MG:0.01～0.30 μg/mL，UmAlb:0.62～16.70 μg/mL，单项指标超过正常值范围上限为阳性，联合检测中任何单项指标超过正常值范围上限为阳性，所有指标低于上限为阴性。

1.4 统计学处理

2 结果

2.1 各组血清Cys-C、hs-CRP、尿β2-MG 和U-mAlb 检测结果比较

与对照组相比，除白蛋白正常组hs-CRP 和尿β2-MG 差异无统计学意义外(P＞0.05)，3组患者Cys-C、hs-CRP、尿β2-MG 和U-mAlb 水平均升高，差异有统计学意义(P＜0.05 或P＜0.01)。两两比较显示，不同白蛋白水平的组间上述指标差异有统计学意义，其中大量白蛋白组上述指标水平均 显著高 于其余2组(P＜0.05 或P＜0.01)。见表1。

表1 各组血清Cys-C、hs-CRP、尿β2-MG 和U-mAlb 检测结果()

表1 各组血清Cys-C、hs-CRP、尿β2-MG 和U-mAlb 检测结果()

与对照组比较，* P＜0.05，＊＊P＜0.01;与白蛋白正常组比较，#P＜0.05，##P＜0.01;与微量白蛋白组比较，△P＜0.05，△△P＜0.01

2.2 血清Cys-C、hs-CRP、尿β2-MG 和U-mAlb单项或联合检测对DN 的诊断价值

依据UAER 水平将患者分为DN 阴性(UAER＜30 mg/24 h)32例和DN 阳性(UAER≥30 mg/24 h)78例。单项检测中，血清Cys-C 灵敏度和准确率最高，分别为79.49%和84.55%;血清Cys-C联合尿β2-MG 和U-mAlb 检测灵敏度均上升，分别为87.18%和84.62%。4 项指标联合检测的灵敏度最高，为91.03%。见表2。

表2 各指标单项或联合检测对DN 的诊断价值

3 讨论

DN 是糖尿病严重并发症之一，发病早期缺乏明显临床特征，实验室检查对于早期DN 诊断和预后判断具有重要价值。DN 早期以肾小球肥大为主要特征，同时伴有肾小球和肾小管基底膜增厚以及系膜区细胞外基质进行性积聚，临床以微量蛋白尿主要表现［6］，U-mAlb 是肝脏分泌的一种带负电荷的蛋白质，绝大多数因同性电荷排斥作用而无法通过滤过膜。因此U-mAlb 升高可作为判断肾小球筛网选择和电荷选择屏障损伤程度的重要标志蛋白［7］。本研究中，相比健康对照组，糖尿病患者U-mAlb 含量均显著增高。蔡文娟等［8］还报道了U-mAlb/肌酐在监测尿蛋白排泄中的同样具有较高的应用价值。

β2-MG 由淋巴细胞、血小板、多形核白细胞产生，正常情况，人β2-MG 合成和释放速度相对恒定，经肾小球滤过的β2-MG 在近曲小管被吸收，并被分解破坏呈氨基酸，血清β2-MG 和尿β2-MG异常升高分别反映了肾小球滤过功能和肾小管损伤［9］。有研究［10］提示，年龄、性别等因素对β2-MG 含量测定影响较小，相比肌酐、尿素氮等常规检测，β2-MG 对肾脏损伤更为敏感。本研究结果显示，相比健康对照组，微量和大量白蛋白组患者尿β2-MG 显著增高，与相关研究结论一致。此外，由于β2-MG 在近曲小管被吸收，其水平升高还有助于对肾脏受损部位的鉴别诊断［11］。

同样，Cys-C 生成速度也不受性别、年龄、发热等因素影响［12］，经肾小球自由基滤过而被近曲小管重吸收。Dharnidharka 等［13］通过Meta 分析得出Cys-C 与肾小球滤过率相关性更好，作为一种小分子蛋白，可更好地反应不同程度肾功能损害时肾小球滤过功能变化。本研究中，相比其他指标单项检测，Cys-C 灵敏度最高，为79.49%。荆爱玉等［14］也指出，血清Cys-C 检测可弥补UmAlb 检测引起的漏诊，本研究也观察到血清Cys-C 联合U-mAlb 检测结果的敏感度为84.62%，高于U-mAlb/(μg/mL)单项检测的75.64%。

有研究指出炎症因子不但引起内皮细胞功能异常，促进胰岛素抵抗，还诱导B 细胞结构和功能发生障碍［15］。CRP 作为急性时相蛋白的一种，能通过影响内皮细胞导致内皮功能受损，而后者又以微量蛋白尿为主要表现，因此CRP 与2 型糖尿病患者微量蛋白尿和体内慢性低水平炎症反应存在关联。吴凤丽等［16］报道了2 型糖尿病患者CRP 水平随着U-mAlb 水平增加而增加。而hs-CRP 作为诊断血管炎性反应更为敏感，本研究中，不同白蛋白组与健康对照组hs-CRP 差异均具有统计学意义。另外，相关性研究还指出DN 患者与β2-MG 呈显著正相关，但由于hs-CRP 仅能反应体内炎症状态，常需和其他指标联合检测。

此外，本研究结果显示，血清Cys-C、hs-CRP、尿β2-MG 和U-mAlb 均具有一定的诊断价值，而血清Cys-C 联合尿β2-MG 或U-mAlb 时均能提高诊断准确率，提示Cys-C 可作为较理想内源性肾功能标记物。尽管4 项指标联合检测时，诊断灵敏度和特异度均优于单项或两项指标联合检测，但实际应用中应考虑成本效益。综上所述，血清Cys-C、hs-CRP、尿β2-MG 和U-mAlb 均能有效诊断早期DN，联合检测可潜在提高诊断敏感性和准确率，对延缓DN 发生发展具有重要意义，但由于研究样本偏小，有待进一步扩大样本以证实联合检验的效能。

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