维吾尔族和汉族老年人血清骨保护素水平与骨量的关系研究

杜玉英，周晓辉



维吾尔族和汉族老年人血清骨保护素水平与骨量的关系研究

杜玉英，周晓辉

【摘要】目的了解维吾尔族和汉族老年人血清骨保护素(OPG)水平与骨量的关系。方法于2011年10月—2013年12月，选取在新疆医科大学第一附属医院干部病房接受住院治疗的维吾尔族和汉族老年人375例。根据骨密度(BMD)测定结果，将其分为骨量异常组(n = 239)和骨量正常组(n = 136)。比较不同骨量情况、民族、性别、年龄老年人的血清OPG水平，并探讨血清OPG水平与骨量的相关关系。结果(1)骨量正常组与骨量异常组老年人血清OPG水平比较，差异有统计学意义(P＜0.05)。按民族分层:两组老年人血清OPG水平比较，差异无统计学意义(P＞0.05)。按性别分层:两组男性老年人血清OPG水平比较，差异有统计学意义(P＜0.05);而两组女性老年人血清OPG水平比较，差异无统计学意义(P＞0.05)。(2)不同民族老年人血清OPG水平比较，差异有统计学意义(P＜0.05)。按性别分层:不同民族男性老年人血清OPG水平比较，差异有统计学意义(P＜0.05);不同民族女性老年人血清OPG水平比较，差异无统计学意义(P＞0.05)。按骨量正常与否分层:不同民族骨量正常老年人血清OPG水平比较，差异有统计学意义(P＜0.05);不同民族骨量异常老年人血清OPG水平比较，差异无统计学意义(P＞0.05)。(3)不同性别老年人血清OPG水平比较，差异无统计学意义(P＞0.05)。按民族和骨量正常与否分层后，不同性别老年人血清OPG水平比较，差异亦无统计学意义(P＞0.05)。(4)不同年龄老年人血清OPG水平比较，差异无统计学意义(P＞0.05)。按民族和骨量正常与否分层后，不同年龄老年人血清OPG水平比较，差异亦无统计学意义(P＞0.05)。(5)Spearman秩相关分析显示:汉族男性老年人和维吾尔族女性老年人血清OPG水平与骨量无相关关系(P＞0.05);维吾尔族男性老年人血清OPG水平与骨量存在正相关关系(P＜0.05);而汉族女性老年人血清OPG水平与股骨颈、大转子、小转子及髋关节部位骨量存在负相关关系(P＜0.05)。结论维吾尔族老年人的血清OPG水平低于汉族老年人;骨量异常老年人的血清OPG水平低于骨量正常老年人。维吾尔族男性老年人的血清OPG水平与骨量呈正相关关系，而汉族女性老年人的血清OPG水平与股骨颈、大转子、小转子及髋关节部位的骨量呈负相关关系。

【关键词】骨保护素;骨密度;维吾尔族;汉族;老年人

杜玉英，周晓辉.维吾尔族和汉族老年人血清骨保护素水平与骨量的关系研究［J］．中国全科医学，2015，18(31):3822－3827.［www.chinagp.net］

Du YY，Zhou XH.Correlation between serum osteoprotegerin and bone mineral density among uygur and han elderly populations［J］．Chinese General Practice，2015，18(31):3822－3827.

骨量异常是一种以骨量低下、易发生骨折为特征的全身性骨病，包括骨量减低和骨质疏松［1－2］。骨保护素(OPG)是肿瘤坏死因子受体家族成员之一，在骨髓基质细胞、成骨细胞、成纤维细胞等细胞中均有表达，与骨量丢失密切相关。动物实验显示，OPG转基因鼠模型全身骨密度(BMD)增高，不因为切除卵巢而发生骨量丢失［3］。既往研究显示，OPG的主要作用是影响骨代谢，其可以抑制破骨细胞生成，并促进成熟破骨细胞凋亡［3－5］。目前，关于维吾尔族与汉族人群血清OPG水平差异性的研究较少，本研究对维吾尔族和汉族老年人的血清OPG水平进行了比较，并分析了血清OPG水平与骨量的相关关系，旨在为老年原发性骨量异常患者的早期诊治提供依据。

1　对象与方法

1.1研究对象于2011年10月—2013年12月，选取在新疆医科大学第一附属医院干部病房接受住院治疗的维吾尔族和汉族老年人375例。纳入标准:(1)年龄≥60周岁;(2)长期(≥10年)居住在新疆维吾尔自治区;(3)意识清楚，语言表达能力正常，可与调查员进行正常沟通;(4)入院期间行双能X线吸收法(DXA)测定髋关节BMD。排除标准:(1)伴影响骨代谢的疾病，如库欣综合征、性腺功能减退、甲状腺功能亢进症、原发性甲状旁腺功能亢进症及1型糖尿病等;(2)3个月内服用过影响骨代谢的药物，如过量糖皮质激素、过量甲状腺激素、抗癫痫药物、细胞毒类药物或免疫抑制剂、肝素等;(3)1年内发生过骨折、恶性肿瘤、遗传性疾病、锂中毒、铝中毒、胃肠道疾病、肾功能不全、高催乳素血症、卵巢切除;(4)伴其他先天性或继发性骨质疏松症。根据BMD测定结果将375例老年人分为骨量异常组(n = 239)和骨量正常组(n =136)。所有老年人为自愿参加，研究开始前签署由新疆医科大学医学研究伦理委员会审查、批准的知情同意书。

1.2诊断标准(1)骨量正常与否，参照WHO最新推荐的诊断标准:正常骨量为BMD较同性别、同种族正常成年人降低不足1个标准差(T值≥－1.0SD)，骨量减少为BMD降低1.0～2.5个标准差(－2.5SD＜T值＜－1.0SD);骨质疏松为降低≥2.5个标准差(T值≤－2.5SD)。T值用于表示绝经后女性和50岁以上男性的BMD水平，T =(测定值－骨峰值)/正常成人BMD标准差［1］。(2)糖尿病:糖化血红蛋白(HbA1c)≥6.5%，试验采用标准方法进行，并根据糖尿病控制和并发症试验(DCCT)进行标化;或空腹血糖(FPG)≥7.0 mmol/L，空腹的定义为至少8 h无热量摄入;或口服葡萄糖耐量试验(OGTT)2 h血糖≥11.1 mmol/L，OGTT按WHO标准进行，以75 g无水葡萄糖溶于水为糖负荷;或有高血糖典型症状或高血糖危象，随机血糖≥11.1 mmol/L。以上如无明确高血糖症状，结果应重复检测［6－7］。(3)高血压诊断标准参照中国高血压防治指南2010年修订版［8］:收缩压≥140 mm Hg(1 mm Hg =0.133 kPa)和/或舒张压≥90 mm Hg。(4)冠心病:既往有典型胸痛发作，且发作时心电图呈缺血性改变;或胸痛发作时心电图呈缺血性改变，舌下含服硝酸甘油后疼痛缓解;或心电图负荷试验阳性;或经冠状动脉造影明确诊断。

1.3研究方法

1.3.1一般资料收集由经过统一培训的调查员，采用自行设计的问卷对老年人进行调查，内容包括性别、年龄、身高、体质量、民族及合并症等。共发放问卷400份，回收400份，因病史不符合本研究纳入及排除标准剔除25份，最终获得有效问卷375份，问卷有效回收率为93.8%。

1.3.2实验室指标检测所有老年人于采集日的清晨7:00～9:00，抽取空腹静脉血5 ml，室温放置20 min后，离心(25℃，r =12 cm，3000 r/min)7 min，取上层清液，采用全自动生化分析仪检测血钙、血磷水平及血糖、血脂等相关生化指标，全自动生化分析仪质量符合标准。剩余血清放入超低温冰箱(－80℃)内保存，待整批检测。

1.3.3 BMD测定采用法国DMS公司生产的Lexxos型双能X线骨密度仪(DEXA)进行BMD测定，开机预热、校准后由经过培训的同一计算人员进行股骨近端的BMD测定，部位包括股骨颈、大转子、小转子、华氏三角及髋关节。BMD =骨矿含量(BMC)/骨面积(BA)。

1.3.4血清OPG水平检测(1)标准品的稀释:从2 ～8℃冰箱中取出试剂盒(由北京北方生物技术研究所提供，批内CV = 1.59%，批间CV = 7.44%)，室温下平衡40 min后将OPG标准品按说明书稀释。(2)加样:空白孔不加样品，标准品孔加入标准品50 μl、链霉素－HPR 50 μl，待测样品孔加入样品40 μl;各孔再加入抗－OPG抗体10 μl、链霉亲和素－HRP 50 μl。盖上封板膜，轻轻震荡混匀，37℃温育60 min。(3)配液:将30倍浓缩洗涤液用蒸馏水稀释30倍后备用。(4)洗涤:小心揭掉封板膜，将其置于DEM－3型自动洗板机上，重复洗涤5次，拍干。(5)显色:每孔先加入显色剂A 50 μl，再加入显色剂B 50 μl，轻轻震荡混匀，37℃避光显色10 min。(6)终止:每孔加终止液50 μl，终止反应(此时蓝色转为黄色)。(7)测定:加终止液后10 min内，用芬兰雷勃Thermo Multrscan MK－3酶标仪，以空白孔调零，在450 nm波长处依次测量各孔吸光度(OD)。(8)根据标准品对应的OD值计算出标准曲线直线回归方程，再根据样品OD值计算样品血清OPG水平。

1.4质量控制(1)试验设计阶段:纳入的老年人均在新疆维吾尔自治区居住10年以上，长期(＞半年)外出者不在纳入范围内;正式实施本研究前，对调查项目和指标进行明确定义，对调查员进行统一培训。(2)资料收集阶段:行BMD测定前，DEXA严格按照国际临床骨密度学会(ISCD)的BMD测定共识进行质量控制;试验过程中加样品时使用数字表单纯随机抽样，每个试剂盒批内和批间均加入5个重复样品，以计算试剂盒批内CV和批间CV。(3)资料整理与分析阶段:资料审核和数据录入均由两名输机员独立完成，并由专人对输入数据进行复核。

1.5统计学方法采用SPSS 13.0统计软件进行数据分析。呈正态分布的计量资料以(±s)表示，组间比较采用t检验;呈非正态分布的计量资料以M(Q)表示，组间比较采用Wilcoxon秩和检验;计数资料采用χ2检验;血清OPG水平与股骨近端骨量的相关性分析采用Spearman秩相关分析。以P＜0.05为差异有统计学意义。

2　结果

2.1两组老年人一般资料和各项实验室指标比较

(1)两组性别、年龄比较，差异有统计学意义(P＜0.05);民族、BMI及合并高血压、糖尿病、冠心病比较，差异无统计学意义(P＞0.05，见表1)。(2)两组血钙、血磷、FPG、总胆固醇(TC)、三酰甘油(TG)、高密度脂蛋白胆固醇(HDL－C)及低密度脂蛋白胆固醇(LDL－C)比较，差异均无统计学意义(P＞0.05，见表2)。

表1　骨量正常组与骨量异常组老年人一般资料比较Table 1 Comparison of general data between normal BMD group and abnormal BMD group

表2　骨量正常组与骨量异常组老年人各项实验室指标比较(±s，mmol/L)Table 2 Comparison of laboratory indexes between normal BMD group and abnormal BMD group

表2　骨量正常组与骨量异常组老年人各项实验室指标比较(±s，mmol/L)Table 2 Comparison of laboratory indexes between normal BMD group and abnormal BMD group

注:FPG =空腹血糖，TC =总胆固醇，TG =三酰甘油，HDL－C =高密度脂蛋白胆固醇，LDL－C =低密度脂蛋白胆固醇

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2.2两组老年人血清OPG水平比较骨量正常组老年人的血清OPG水平为2.05(1.54)μg/L，骨量异常组老年人的血清OPG水平为1.64(1.45)μg/L，两组比较差异有统计学意义(Z = 1.54，P＜0.05)。按性别分层:两组男性老年人血清OPG水平比较，差异有统计学意义(P＜0.05);而两组女性老年人血清OPG水平比较，差异无统计学意义(P＞0.05)。按民族分层:两组汉族老年人血清OPG水平比较，差异无统计学意义(P＞0.05);两组维吾尔族老年人血清OPG水平比较，差异亦无统计学意义(P＞0.05，见表3)。

表3　骨量正常组与骨量异常组老年人血清OPG水平比较〔M(Q)，μg/L〕Table 3　Comparison of serum OPG between normal BMD group and abnormal BMD group

2.3不同民族老年人血清OPG水平比较维吾尔族老年人血清OPG水平为1.70(1.01)μg/L，汉族老年人血清OPG水平为1.92(1.69)μg/L，不同民族老年人血清OPG水平比较，差异有统计学意义(Z = 1.71，P ＜0.05)。按性别分层:不同民族男性老年人血清OPG水平比较，差异有统计学意义(P＜0.05);而不同民族女性老年人血清OPG水平比较，差异无统计学意义(P＞0.05)。按骨量正常与否分层:不同民族骨量正常老年人血清OPG水平比较，差异有统计学意义(P＜0.05);而不同民族骨量异常老年人血清OPG水平比较，差异无统计学意义(P＞0.05，见表4)。

2.4不同性别老年人血清OPG水平比较男性老年人血清OPG水平为1.79(1.47)μg/L，女性老年人血清OPG水平为1.81(1.62)μg/L，不同性别老年人血清OPG水平比较，差异无统计学意义(Z = 0.607，P＞0.05)。按民族分层:不同性别汉族老年人血清OPG水平比较，差异无统计学意义(P＞0.05);不同性别维吾尔族老年人血清OPG水平比较，差异亦无统计学意义(P＞0.05)。按骨量正常与否分层:不同性别骨量正常老年人血清OPG水平比较，差异无统计学意义(P ＞0.05);不同性别骨量异常老年人血清OPG水平比较，差异亦无统计学意义(P＞0.05，见表5)。

表4　维吾尔族与汉族老年人血清OPG水平比较〔M(Q)，μg/L〕Table 4　Comparison of serum OPG between Uygur subjects and Han subjects

表5　男性与女性老年人血清OPG水平比较〔M(Q)，μg/L〕Table 5 Comparison of serum OPG between male subjects and female subjects

2.5不同年龄老年人血清OPG水平比较60～70岁老年人血清OPG水平为1.77(1.59)μg/L，＞70岁老年人血清OPG水平为1.82(1.52)μg/L，不同年龄老年人血清OPG水平比较，差异无统计学意义(Z = 0.78，P＞0.05)。按民族分层:不同年龄汉族老年人血清OPG水平比较，差异无统计学意义(P＞0.05);不同年龄维吾尔族老年人血清OPG水平比较，差异亦无统计学意义(P＞0.05)。按性别分层:不同年龄男性老年人血清OPG水平比较，差异无统计学意义(P＞0.05);不同年龄女性老年人血清OPG水平比较，差异亦无统计学意义(P＞0.05)。按骨量正常与否分层:不同年龄骨量正常老年人血清OPG水平比较，差异无统计学意义(P＞0.05);不同年龄骨量异常老年人血清OPG水平比较，差异亦无统计学意义(P＞0.05，见表6)。

表6　不同年龄老年人血清OPG水平比较〔M(Q)，μg/L〕Table 6 Comparison of serum OPG among subjects with different age ranges

2.6血清OPG水平与股骨近端骨量的相关性分析Spearman秩相关显示:(1)汉族男性老年人血清OPG水平与股骨颈、大转子、小转子、华氏三角及髋关节骨量均无相关关系(rs值分别为0.03、0.09、0.09、0.04、0.10，P＞0.05);(2)维吾尔族男性老年人血清OPG水平与各部位骨量均存在正相关关系(rs值分别为0.27、0.29、0.29、0.26、0.29，P＜0.05);(3)汉族女性老年人血清OPG水平与股骨颈、大转子、小转子及髋关节部位骨量存在负相关关系(rs值分别为－0.27、－0.32、－0.27、－0.30，P＜0.05)，但与华氏三角部位骨量无相关关系(rs=－0.17，P＞0.05);(4)维吾尔族女性老年人血清OPG水平与各部位骨量均无相关关系(rs值分别为－0.12、－0.06、－0.21、0.12、－0.09，P＞0.05)。

3　讨论

3.1血清OPG水平对骨代谢的影响骨组织具有代谢转换的特点，经典的骨生化指标，如血磷、血钙及碱性磷酸酶等，虽然也能反映骨转化程度，但其特异度和灵敏度欠佳，且不能反映破骨－成骨偶联过程。DEXA是国际公认的骨质疏松症诊断“金标准”，能直接对BMD进行测定，但在骨代谢转换过程中，血清OPG水平的改变早于BMD。目前，已经有很多国家开始使用血清OPG水平对骨代谢转换进行评价［9－10］。OPG是肿瘤坏死因子受体蛋白基因家族成员，是由骨髓基质和成骨细胞分泌的一种能与核因子κ B受体活化因子配体(RANKL)结合的可溶性受体，OPG－RANKL－核因子κ B受体活化因子(RANK)是成骨细胞作用于破骨细胞的重要信号传导通路。当0PG抢先与RANKL结合后，RANKL与破骨细胞结合受阻［11－13］，从而抑制破骨前体细胞的成熟分化和破骨细胞的分化、融合、激活，促进破骨细胞凋亡，达到抑制骨过度吸收的目的，故OPG是反映成骨细胞与破骨细胞间平衡的偶联因子之一［14］。多项研究表明，骨质疏松症与OPG－RANKLRANK轴相关［15］。王信等［16］进行了一项小鼠实验，实验组(OPG 100 μg/L + RANKL 50 μg/L)与骨量正常组(RANKL 50 μg/L)在形态学、组织学及骨陷窝形成情况等多个指标的比较表明，连续9 d采用OPG对小鼠进行干预，可明显抑制破骨细胞的分化，降低骨溶解，减少破骨细胞骨吸收效应，从而达到预防和治疗骨质疏松的目的。我国戴燚等［17］对武汉地区的120名绝经妇女进行研究，发现骨量异常妇女的血清OPG水平较低。

本研究结果显示，骨量异常老年人的血清OPG水平低于骨量正常老年人。目前，国内外关于血清OPG水平的研究多以女性为研究对象，但本研究显示男性骨量异常老年人的血清OPG水平低于男性骨量正常老年人。血清OPG水平与骨量的相关性分析显示，汉族男性和维吾尔族女性老年人的血清OPG水平与骨量无相关关系，维吾尔族男性老年人的血清OPG水平与骨量存在正相关关系，而汉族女性老年人的血清OPG水平与股骨颈、大转子、小转子及髋关节的骨量存在负相关关系。这可能与不同性别老年人激素分泌不同有关。

3.2年龄对血清OPG水平的影响随着年龄和BMD的变化，血清OPG水平也会随之发生变化。孙文利等［18］对长沙市672名20～80岁的女性志愿者进行血清0PG检测，发现≥70岁老年人的血清OPG水平为(4.47±2.12)pmol/L，60～69岁老年人的血清OPG水平为(4.69±2.69)pmol/L，≥70岁老年人的血清OPG水平较低。龙海燕等［19］进行了一项针对465例健康女性的横断面研究，发现≥65岁老年人的血清OPG水平低于55～64岁老年人。Yano等［20］的研究表明，血清OPG水平会随着年龄的增加而降低。本研究中，汉族＞70岁老年人的血清OPG水平与60～70岁老年人相比无差异;按民族、性别及骨量正常与否分层后，不同年龄老年人的血清OPG水平相比仍无差异。这与其他研究结果不一致，可能与研究对象不同有关，孙文利等［18］和龙海燕等［19］纳入的研究对象仅为女性，而本研究纳入的研究对象也包括男性;也可能与本研究样本量较小有关。

3.3本研究的临床意义与不足本研究结果提示，维吾尔族老年人骨量异常发生风险可能比汉族老年人大，也可能维吾尔族和汉族间存在OPG基因多态性，这为两民族间的相关研究提供了一定参考。但本研究的样本量较小，尤其是维吾尔族老年人数较少，且未能进行病例－对照试验。如要进一步明确维吾尔族和汉族老年人OPG与骨量的相关关系，应增大样本量，并将维吾尔族和汉族老年人的血清OPG基因多态性纳入试验指标。

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(本文编辑:王凤微)

·论著·

作者单位:830054新疆维吾尔自治区乌鲁木齐市，新疆医科大学第一附属医院干部内一科

Correlation Between Serum Osteoprotegerin and Bone Mineral Density Among Uygur and Han Elderly Populations

DU Yu－ying，ZHOU Xiao－hui.Department of Cadre Ward，the First Affiliated Hospital，Xinjiang Medical University，Urumqi 830054，China

【Abstract】ObjectiveTo explore the correlation between serum osteoprotegerin(OPG)and bone mineral density among Uygur and Han elderly populations.Methods We enrolled 375 Uygur and Han elderly people who were admitted into the cadre's ward of the First Affiliated Hospital of Xinjiang Medical University from October 2011 to December 2013.According to the examination results of BMD，the subjects were divided into two groups:abnormal BMD group(n =239)and normal BMD group(n =136).Comparison was made in serum OPG level among subjects with different BMD conditions，ethnic groups，genders and ages，and the correlation between serum OPG level and BMD was investigated.Results(1)The two groups were significantly different(P＜0.05)in serum OPG level.The two groups were not significantly different(P＞0.05)in the serum OPG level of Uygur subjects or Han subjects.The two groups were significantly different(P＜0.05)in the serum OPG level of male subjects，while no significant difference(P＞0.05)was noted in the serum OPG level of female subjects between the twobook=3823,ebook=60groups.(2)There was significant difference(P＜0.05)in serum OPG level between Uygur subjects and Han subjects.Uygur subjects and Han subjects were significantly different(P＜0.05)in the serum OPG level of male subjects，while no significant difference(P＞0.05)was found in the serum OPG level of female subjects between Uygur subjects and Han subjects.Uygur subjects and Han subjects were significantly different(P＜0.05)in the serum OPG level of normal BMD group，while no significant difference(P＞0.05)was noted in the serum OPG level of abnormal BMD group between Uygur subjects and Han subjects.(3)Subjects of two genders were not significantly different(P＞0.05)in serum OPG level.Between Uygur subjects and Han subjects and between normal BMD group and abnormal BMD group，there was no significant difference(P＞0.05)in the serum OPG level of each gender.(4)Subjects with different ages were not significantly different(P＞0.05)in serum OPG level.Between Uygur subjects and Han subjects and between normal BMD group and abnormal BMD group，no significant difference(P＞0.05)was noted in the serum OPG level of subjects of each age range.(5)Spearman rank correlation showed that no correlation(P＞0.05)was found between serum OPG level and BMD in Han male subjects and Uygur female subjects;there was positive correlation(P＜0.05)between serum OPG level and BMD in Uygur male subjects;negative correlation(P＜0.05)was noted between serum OPG level and BMD in neck of femur，greater trochanter，lesser trochanter and hip joint among Han female subjects.Conclusion Uygur elder people are lower than Han elder people in serum OPG level，and the elderly with abnormal BMD are lower than the elderly with normal BMD in serum OPG.There is positive correlation between serum OPG level and BMD in Uygur male elderly people，and there is negative correlation between serum OPG level and BMD in neck of femur，greater trochanter，lesser trochanter and hip joint among Han female elderly people.

【Key words】Osteoprotegerin;Bone density;Uygur nationality;Han nationality;Aged

(收稿日期:2015－05－20;修回日期:2015－09－17)

通信作者:周晓辉，830054新疆维吾尔自治区乌鲁木齐市，新疆医科大学第一附属医院干部内一科;E－mail:zhouxiaohui858@ sina.com

【中图分类号】R 336

【文献标识码】A

doi:10.3969/j.issn.1007－9572.2015.31.012