六安地区健康成人超敏C反应蛋白参考区间研究

许华斌 张光满 黄 琴

六安地区健康成人超敏C反应蛋白参考区间研究

许华斌 张光满 黄 琴

目的 建立六安地区成人超敏C反应蛋白(hs-CRP)的参考区间。 方法 按照CLSI文件C28-A3《临床实验室如何确定和建立生物参考区间》要求，于2014年1～8月筛选前来六安市第二人民医院进行健康体检者137名，采用颗粒增强免疫透射比浊法测定血清hs-CRP浓度。 结果 去除3例离群值后，134例六安地区健康成人血清hs-CRP明显呈偏态分布，经对数转换，男女之间无组间差别(Z

健康成人，六安；超敏C反应蛋白；参考区间

C-反应蛋白(C-reactive protein ,CRP)是急性时相蛋白之一，可以激活补体，加强吞噬细胞的吞噬而起到调理作用，从而清除入侵机体的病原微生物，以及损伤、坏死、凋亡的组织细胞，在机体的天然免疫过程中发挥重要的保护作用。超敏C-反应蛋白(hyper sensitivity C-reactive protein, hs-CRP)与CRP是同一种蛋白，只是由于其测定方法更敏感而得名。采用临床常规方法测定CRP时，检测的线性范围一般为3～200 mg/L，因检测方法缺乏足够的敏感性，无法测出血液中含量更低的CRP；而hs-CRP是采用乳胶增强免疫散射比浊法、颗粒增强免疫透射比浊法等技术使检测的灵敏度得到了很大的提高，检测低限延伸为0.005～0.100 mg/L[1]，使得低浓度CRP的测定更加准确。在可靠的hs-CRP检测方法建立之前，原先血清CRP检测正常的人群，其未来发生心血管疾病的密切相关因素中包括了CRP的升高[2]。大量研究资料表明，动脉粥样硬化的血栓除了是脂肪堆积的过程也是一个慢性炎症过程[3]；hs-CRP轻度升高与冠状动脉事件、中风及周围血管病相关[2,4-6]，hs-CRP已被证实是由慢性炎症引发心血管疾病的独立危险因素，检测其浓度对心血管疾病的早期干预及预后判断起重要作用[7]。2003年欧洲高血压防治指南(ESH/ESC)[8]正式推荐, 高血压患者需检测hs-CRP 水平。各实验室由于仪器、试剂等原因所使用的正常参考范围各异，因此有必要建立各自的hs-CRP参考区间，为临床诊治提供决策依据。本文对六安地区hs-CRP的正常参考区间进行了调查，具体报道如下。

1 对象与方法

1.1 对象 依据CLSI C28-A3文件的指导原则，本实验室所筛选的参考人群应满足以下条件：无糖尿病、癫痫病、肿瘤、器质性脑综合征、高血压、慢性感染、冠心病、物质滥用、抑郁、狂躁；糖尿病风险评估为低风险、动脉粥样硬化风险筛查为低风险；没有正在服药、吃补品、特殊饮食习惯、近6个月做过手术、从事接触化学试剂和放射源的工作、女性处于妊娠期的情况；身体质量指数(body mass index, BMI)控制在18.5～24.0 kg/m2；心电图、彩超、胸透、内外科检查正常；实验室检测满足以下条件：Glu≤6.11 mmol/L；Cr≤133 mmol/L；UA≤357 mmol/L；TP≤83 g/L；ALB≤55 g/L；GLB≤32 g/L；TB≤20 μmol/L；DB≤6.8 μmol/L；TC≤5.30 mmol/L；TG≤1.71 mmol/L；WBC：(3.97～9.15)×109/L；RBC：(4.09～5.74)×1012/L(男)、(3.68～5.13)×1012/L(女)；Hb：120～160 g/L(男)、110～150 g/L(女)；PLT：(100～300)×109/L，尿常规正常。

本研究从2014年1～8月收集六安市各县区的健康体检人群，职业涵盖公务员、教师、医生、警察、工人、农民等。最终得到符合筛选标准且居住在六安地区的参考个体137名，其中男性55例，年龄18～77岁，平均40岁；女性79例，年龄18～75岁，平均43岁。

1.2 方法

1.2.1 仪器与试剂 采用日立7600-020全自动生化分析仪，德国德赛诊断系统有限公司生产的颗粒增强免疫透射比浊法hs-CRP试剂及其配套校准品和质控品。

1.2.2 标本采集和处理 空腹采血，采血前一天受检者无饮酒、无剧烈运动，坐姿，自肘静脉采集静脉血3～5 mL，不抗凝，离心后分离血清，4 h内检测完毕。实验开始和结束时均测定质控物。

1.2.3 参考区间的计算 按照CLSI C28-A3文件[6]建议的Dixon法判断离群值，若D/R≥1/3则该极值为离群值(D是极大或极小值与相邻值的绝对差异；R是包含极值在内的所有值中最大值与最小值之间的差)，应弃之，反之则保留。按C28-A3文件推荐的方法计算Z值和Z*值，若Z>Z*则参考区间需要按性别进行分组；反之，则无性别差异，男女可以通用一个参考区间。计算Z值时数据应为正态分布，若是偏态分布则应正态化后再计算。将有效参考个体的观察值按从小到大的顺序排列，应用非参数法计算95%参考区间。

2 结果

2.1 参考人群的一般临床特征描述 本研究以实验室检查结合调查问卷的形式，从生理、病理和生活习惯等方面排除了对hs-CRP有影响的因素，男、女各得到了1组可用于计算参考区间的参考人群，各组临床特征见表1。

表1 不同性别参考人群的一般临床特征描述

2.2 hs-CRP的正态性检验 137例六安地区健康成人各年龄段hs-CRP的水平分布在0.172 7～6.882 4 mg/L之间，经Dixon法判断，有3个离群值出现，去除离群值后，hs-CRP的分布为0.172 7～2.532 4 mg/L，经Kolmogorov-Smirnov检验P<0.01，表明hs-CRP结果不服从正态分布，同时频数分布表也进一步说明该组数据成明显偏态分布(图1)。对hs-CRP结果取对数后，lg(hs-CRP)经Kolmogorov-Smirnov检验P值为0.29，P>0.05，表明服从正态分布，频数分布表见图2。

2.3 hs-CRP浓度与性别的关系 134例健康成人根据性别不同分为两组，经对数处理后的数据，按照C28-A3文件推荐方法，计算Z值和Z*值，结果Z值比Z*值小(见表2)，因此，六安地区成人hs-CRP参考范围不需要按性别进行分组，可以将男女合并统计，非参数法计算其95%参考上限为2.066 mg/L。

表2 lg(hs-CRP)浓度与性别的关系

3 讨论

目前hs-CRP主要采用乳胶增强免疫散射比浊法、颗粒增强免疫透射比浊法等技术检测，检测的灵敏度得到了很大提高，使得低浓度CRP的测定更加准确。随着对冠状动脉硬化性心脏病(coronary heart disease, CHD)发病机制研究的不断深入，目前认为炎症反应是CHD发病与进展的重要因素之一[7]；而通过高灵敏度方法测定的hs-CRP是研究的最广泛的炎症标志物，直接参与CHD患者粥样斑块的发生、发展、不稳定期及破裂的各个阶段，对CHD的发生、发展以及预后具有独立预测价值[9]。对于hs-CRP，目前各实验室普遍采用生产厂家的试剂盒所给出的参考范围，是否适合本地区人群还需要进行验证或调查。

本研究共收集134例六安地区健康成人，对其hs-CRP的参考范围进行了调查，结果显示95%参考上限为2.0664 mg/L。低于文献报道的欧洲人[10]和日本人[11]hs-CRP浓度，同时也比国内报道的深圳地区人群[12]低，但比玉溪市人群[13]高。其原因一部分可能是不同种族以及不同生活环境、饮食习惯的人群之间hs-CRP血清浓度存在差异；另一部分原因可能是由于本次调查增加了BMI、糖尿病风险评估、动脉粥样筛查等筛查条件，使得本次调查人群更接近于健康人群，从而使得hs-CRP检测结果偏低。经对数转换后，lg(hs-CRP)结果符合正态分布，按照C28-A3文件推荐方法计算，结果Z

本次调查，我们在排除血脂异常的同时，又增加体重指数(BMI)排除指标，使BMI控制在中华人民共和国卫生行业标准规定的正常体重指数范围之内(18.5～24.0 kg/m2)。BMI是体内脂肪总量的密切相关指标，简单、实用、可反映全身性肥胖和超重。血清hs-CRP水平与BMI水平相关[14]，在测量身体因超重而面临心脏病、高血压等风险时，BMI比单纯的以体重来认定更具准确性。因此增加BMI指标可以更加准确地去除由于脂肪组织过多导致的hs-CRP异常可能。同时本研究中还加入了白细胞计数(WBC)指标，从而排除明显炎症的干扰。本次调查新引入的筛查指标糖尿病风险评估和动脉粥样硬化风险筛查，是以往在hs-CRP参考范围调查中没有采用过的，目前已有大量文献表明hs-CRP与糖尿病和冠状动脉硬化性心脏病的发生关系密切[3-7，15]，同时hs-CRP的基线水平与未来急性心肌梗死的发生呈显著正相关[2]。因此加入这两项筛查指标可以去除这部分高水平的hs-CRP结果，这也是我们此次调查的参考范围偏低的主要原因。

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(2014-09-20 收稿 2014-12-08 修回)

Investigation of hs-CRP reference interval for healthy adults in Lu'an area

XuHuabin,ZhangGuangman,Huangqin

DepartmentofClinicalLaboratory,Secondpeople′shospitalofLu'an,Lu'an237000,China

Objective To establish the reference interval of high-sensitivity C-reactive protein (hs-CRP) for healthy adults in Lu’an area.MethodsBased on the CLSI Guideline C28-A3 Defining, Establishing, and Verifying Reference Intervals in the Clinical Laboratory: Approved Guideline-Third Edition, the blood specimens were collected from 137 healthy individuals, including 55 males and 79 females, who had medical examinations in our hospital from Jan 2014 to Aug 2014. The serum concentration of hs-CRP was tested by particle enhanced immune transmission turbidimetry.ResultsExcluding outliers from the data set, the distribution of serum hs-CRP concentrations of 134 cases presented marked skewness. Analysis revealed that, after logarithmic transformation, there was no significant difference in the hs-CRP concentrations between male group and female group (Z

Healthy adult; Lu′an area; high-sensitivity C-reactive protein; Reference interval

安徽省高校省级自然科学研究项目(项目编号：KJ2013Z343)

237008 安徽省六安市第二人民医院(皖西职业卫生学院附属医院特检科)

10.3969/j.issn.1000-0399.2015.02.007