结石通胶囊快速检测方法研究

★　戴希希　盛开　祝兴国　陈艳梅　王仕平　(.抚州市食品药品检验所　江西 抚州 44000；.江西红星药业有限公司　江西 东乡800；.宜春市食品药品检验所　江西 宜春6000)

结石通胶囊快速检测方法研究

★戴希希1盛开1祝兴国1陈艳梅2王仕平3(1.抚州市食品药品检验所江西 抚州 344000；2.江西红星药业有限公司江西 东乡331800；3.宜春市食品药品检验所江西 宜春336000)

摘要：目的：建立能应用于药品检测车上的结石通胶囊快速检测方法。方法：采用近红外光谱分析及显微、薄层快速鉴别。结果：近红外光谱分析法能快速准确地鉴定结石通胶囊真伪，显微、薄层方法能进一步验证结果。结论：本方法简便、快速、准确、专属性较强，可用于结石通胶囊的快速检测。

关键词：结石通胶囊；近红外光谱；显微、薄层；鉴别

江西红星药业有限公司生产的结石通胶囊为全国独家品种，主要组成药材为广金钱草、玉米须、石韦、鸡骨草、茯苓、车前草、海金沙草、白茅根。具有清热利湿，通淋排石，镇痛止血。用于泌尿系统感染，膀胱炎，肾炎水肿，尿路结石，血尿，淋沥混浊，尿道灼痛等功效[1]。

由于其畅销、疗效好，在市场上曾经出现过假冒品种，有的假冒品种成分与结石通胶囊较为相似，而按标准(国家食品药品监督管理局标准YBZ01552006)检验，不仅费时，而且消耗大，不便于区分假冒品种与正品的快速、准确检测。为此，笔者按照国食药监稽[2012]252号文 “加快推进药品快速检测技术研究与应用工作的指导意见”精神，结合当前基层药品监管大量使用药品检测车及检测箱快速检测的特点，拟参照中国食品药品检定研究院制定的“国家基本药物和进口药物近红外光谱快速比对模型建模技术规范”对结石通胶囊开展能应用于药品检测车上的快速检测方法研究[2]，具体研究内容如下。

1仪器与试药

Matrix-F型近红外光谱仪、手持1.5m固体光纤探头(德国Bruker 公司)；OPUS 5.0 操作软件(德国Bruker 公司)；FinePixHS11照相显微镜(莱卡)。

结石通胶囊12批正品(江西红星药业有限公司，批号为：J120501、J120602、J120701、J120903、J121001、J121203、J130107、J130301、J130502、J130601、J130803、J131208，规格为0.35g/粒)。3批假冒结石通胶囊(标示为江西红星药业有限公司，批号为：J120202、J120203、J120304，规格为0.35g/粒)，为当地药监部门所查获，并经药厂确认为假药；3批结石清胶囊(由江西红星药业有限公司提供，批号为：20120102、20120501、20120701，规格为0.5g/粒)；3批结石康胶囊(由江西红星药业有限公司提供，批号为：130117、120613、120901，规格为0.38g/粒)；3批消石胶囊(由江西红星药业有限公司提供，批号分别为：900004、100021、100301，规格为0.31g/粒)。

2方法与结果

2.1近红外光谱分析

2.1.1样品分组 将样品分2组，正品作为建模组，另外伪品和其他样品为验证组。

2.1.2近红外光谱采集条件 用近红外光谱仪光纤附件采集样品的近红外光谱，扫描范围：12000～4000cm-1；扫描次数：32；分辨率：8 cm-1；扫描速度：10kHz；以内置背景为参考；检测器：半导体制冷铟镓砷探测器；采样模式：漫反射方式；温度、湿度：20℃、60%。

2.1.3近红外光谱采集及处理 取样品胶囊，单层胶囊部分朝下轻轻磕使胶囊粉末填满待测端。先进行光谱仪的PQ测试，再将光纤探头插入背景槽中作背景测试，然后将近红外光谱仪光纤探头抵住并紧贴胶囊(单层胶囊部分)采集样品的原始光谱，每批样品重复测定6 次，得建模组与验证组的原始光谱图。见图1。

图1　近红外原始图谱

1-结石通胶囊;2-结石通胶囊伪品;3-其它类似品种

2.1.4建立一致性验证模型在 OPUS 的一致性模型设置模块中，分别调入“2.1.3”项下测定所得的建模组原始光谱图和验证组原始光谱图，选择一阶倒数加矢量归一化预处理数据，取9002.7～7498.4cm-1、6900.5～5596.8cm-1、5400.1～4296.9cm-1谱段范围，设定CI 限度为7.0，建立样品的一致性检验模型。验证结果与实际结果相符。蓝色为验证组，绿色为建模组，见图2。

2.1.5建立相关系数模型 在 OPUS 的相关系数模型设置模块中，调入“2.1.3”项下测定所得的建模组原始光谱。

图2　一致性性检验模型CI示意图

图中一张光谱，选择一阶导数预处理数据，取6200-5500cm-1及5000-4700cm-1谱段范围，设定阈值为97.0%，建立样品的相关系数模型。时能较好的分开其他品种的光谱，故选择阈值为97.0% 。调入“2.1.3”项下测定所得建模组原始光谱图和验证组原始光谱图验证。结果见表1，结果都较理想，说明该模型的参数可以使用。

表1　相关系数模型验证结果

2.2显微鉴别取结石通胶囊粉末，置显微镜下观察，可见不规则颗粒状团块，无色，遇水合氯醛融化。偶见无色或淡棕色菌丝，稍弯曲，有分支，直径3-8 μm，少数至16 μm 。伪品中则未见无色或淡棕色菌丝。

2.3薄层色谱鉴别取结石通胶囊5粒，研细，加甲醇30mL，超声处理30min，滤过，滤液蒸干，残渣加水30mL，使溶解移至分液漏斗中，加乙醚振摇提取3次，每次20mL,合并醚液，蒸干，残渣加甲醇1mL，溶解作为供试品，另取绿原酸对照品，加甲醇制成每1mL含1mg的绿原酸。照薄层色谱法(中国药典2010年一部附录VIB)，取供试品溶液10μL，绿原酸对照品5 μL，分别点于同一聚酰胺薄膜上，以醋酸为展开剂，展开，取出，晾干，置紫外灯365nm下检视，供试品色谱中，在与对照品相应的位置上，显相同颜色的斑点。取伪品同法操作，未见相同颜色的斑点。

综上表明，近红外一致性检验及相关系数模型能有效区分开相似品种及假冒品种，显微、薄层方法能进一步验证结果的准确性，该方法在打击假冒药品时具有较好的专属性、准确性。

3讨论

目前各级药检所配备的药品检测车上均配备了车载近红外仪，显微镜及薄层色谱系统，故该方法能顺利的运用于药品检测车上，近红外方法参照了中国食品药品检定研究院制定的“国家基本药物和进口药物近红外光谱快速比对模型建模技术规范”制定，计划通过一年的实践验证后，按程序上报至中检院的近红外模型库，使该模型在全国药品检测车上都能使用。应用于基层的监督检查，提高结石通胶囊现场初筛的阳性率，快速的打击假冒伪劣[3]。

薄层色谱方法采用多种较简易的前处理方法尝试，效果均不理想，最后采用了超声及萃取的方法，该法仍较繁琐，还有待进一步简化，以方便运用了现场实际操作[4]。

参考文献

[1]陈华龙,谭小勇,谭莉萍,等. 结石通片质量标准的研究[J].中国实验方剂学杂志,2010,16(8):77-80.

[2]中国食品药品检定研究院标化所标准化研究室.国家基本药物和进口药物近红外光谱快速比对模型建模技术规范[M].北京,2013:146-148.

[3]运海龙,王新凤.结石通片中茯苓、鸡骨草、石韦 的鉴别方法探讨[J].宁夏医学杂志,2002,24(6):376-377.

[4]石晓峰,刘东彦,李爽,等.RP-HPLC法同时测定雪松松针中杨梅素、槲皮素和山柰酚的含量[J].药物分析杂志,2012,32(9):1 550-1 553.

Study on the Rapid Detection Method of Jieshitong Capsules

DAI Xi-xi1,SHENG Kai1,ZHU Xing-guo1,CHEN Yan-mei2,WANG Shi-ping3

1.FuzhouInstituleforDrugControl,Fuzhou344000,China;

2.JiangxiHongxingPharmaceuticalCo.Ltd.Dongxiang331800 ,China;

3.YichunInstituleforDrugControl,Yichun336000,China.

Abstract:Objective：To establish a rapid detection method for jieshitong capsules which can be used in the drug testing vehicles.Methods:using near infrared spectroscopy (NIR) and microscopy, thin layer identification.Results:The results of near infrared spectroscopy analysis method can rapidly and accurately identify the authenticity of jieshitong capsules, micro, TLC method can further verify the results.Conclusion:the method is simple, rapid, accurate,with good specificity,It can be used for rapid detection of jieshitong capsules.

Key words:Jieshitong capsules;NIR; Microscopic;TLC;Identify

收稿日期：(2014-10-10) 编辑:曾文雪

中图分类号：R286.0

文献标识码：A