高危HPV检测联合TCT在宫颈癌筛查中的应用

臧元怡

(江苏省无锡市妇幼保健院，江苏 无锡 214002)

高危HPV检测联合TCT在宫颈癌筛查中的应用

臧元怡

(江苏省无锡市妇幼保健院，江苏 无锡 214002)

目的 评价高危型人乳头瘤病毒(HR-HPV)检测联合宫颈液基细胞学检查(TCT)在宫颈癌和癌前病变筛查中的应用价值。方法 对2 140例门诊宫颈标本同时行HR-HPV检测和TCT检查，以阴道镜活检病理组织学结果作为确诊金标准，对检测结果进行分析。结果 TCT诊断阳性率32.29%，CIN Ⅰ～Ⅲ级及SCC组TCT阳性率均显著高于正常或炎症组(P<0.01)。 CIN Ⅰ～Ⅲ级及SCC组HR-HPV多重感染均显著高于正常或炎症组(P<0.05)，且CIN Ⅰ～Ⅲ级及SCC组HR-HPV感染与正常或炎症组比较HR-HPV检出阳性率差异均有统计学意义(P均<0.01)。HR-HPV DNA检测与TCT两种方法联合检测灵敏度(95.64%)，正确诊断指数(0.72)、阳性预测值(43.07%)及阴性预测值(98.75%)与单独检查比较均有不同程度的提高(P均<0.05)。结论 HR-HPV感染是宫颈癌的危险因素，TCT和HR-HPV DNA检测是目前常用的筛查方法，HR-HPV检测联合TCT对宫颈癌筛查，对病情、临床处理、患者顾虑和临床治疗等都具有重要的意义。

人乳头瘤病毒；液基细胞学；宫颈癌；癌前病变筛查

子宫颈癌是妇科常见恶性肿瘤之一，目前宫颈癌前病变的筛查仍是降低宫颈癌发病率的关键。研究表明，人乳头瘤病毒(human papilloma virus，HPV)感染，尤其高危型HPV(HR-HPV)感染是导致宫颈癌及其癌前病变的重要因素[1]。近年随着液基薄层细胞学检测(TCT)和HPV检测技术的成熟和推广，TCT和HR-HPV检测对提高宫颈癌的早期诊断率发挥了重要作用，并逐渐成为该病必不可少的筛查方法[2-3]。本研究采用TCT、HR-HPV和电子阴道镜对我院妇保门诊2 140例患者进行检查并分析结果，以探讨TCT联合高危HPV检测在宫颈癌筛查中的应用价值。

1 临床资料

1.1一般资料 选择我院妇保门诊就诊的2 140例妇科患者，年龄25～57(31.2±6.2)岁；其中肉眼可见宫颈糜烂(宫颈上皮异位)者190例，均出现外阴瘙痒、分泌物增多或接触性出血。患者均有性生活史，首次接受筛查，知情同意，排除伴有急性生殖道炎症，宫颈锥切与子宫切除病史及盆腔放射治疗史患者。

1.2 方法 对所有患者同时行TCT 和HR-HPV检测，对检查结果阳性的病例均通过电子阴道镜下行病理活检，以宫颈病理学所得到的诊断结果为判别标准。

1.2.1 宫颈液基细胞学检查(TCT)

受检者在检查前24 h内禁止性生活、阴道冲洗和阴道内用药。采用美国新柏氏Thinprep 2000液基细胞学制片检查技术(TCT薄层法)，依照TBS细胞学分级系统分为无上皮内病变或恶性病变(NILM)，无明确诊断意义的不典型鳞状细胞(ASCUS)，不能排除高级别鳞状上皮内病变不典型鳞状细胞(ASCUS-H)[4]，低度鳞状上皮内病变(LSIL)和高度鳞状上皮内病变(HSIL)，鳞状细胞癌(SCC)，腺上皮不正常包括不典型腺上皮细胞(AGC)和腺癌(AC)[5]。TCT诊断为无明确诊断意义的不典型鳞状细胞(ASCUS)及以上者为阳性，宫颈高度病变标准为LSIL及以上[6]。根据TBS系统，LSIL包括HPV感染引起的细胞病理改变和宫颈上皮内瘤变1级(CIN Ⅰ)，HSIL包括CIN Ⅱ级和CIN Ⅲ级[7]。

1.2.2 高危型人乳头瘤病毒(HR-HPV DNA)检测

标本采集均采用一次性取样器，采用HPV DNAⅡ代杂交捕获法试验(HC-2) 检测13种HR-HPV DNA(16，18，31，33，35，39，45，51，52，56，58，59，68)。依据标本的荧光光度值与阳性定标的比值判定结果，HPV-DNA≥1.0 pg/mL定为检测阳性[8]。扩增目的基因片段，结合基因芯片对HPV进行分型检测，样品广谱扩增杂交显色后，以各型别信号位置灰度值与背景灰度值差>4，判断为阳性。

1.2.3 病理组织学检查

针对TCT和HPV阳性者行阴道镜活检，未见明显异常者常规行3，6，9及12多点活检及宫颈管搔刮术，送组织病理学检查。根据病变的严重程度划分为慢性宫颈炎，宫颈湿疣，宫颈上皮内瘤变(CIN Ⅰ级，CIN Ⅱ级，CIN Ⅲ级)，宫颈癌。CIN Ⅰ级及以上为阳性。

1.3 观察项目

记录HR-HPV、TCT及组织病理学结果，计算其诊断价值指标。灵敏度=真阳性/(真阳性+假阴性)×100%；特异度=真阴性/(真阴性+假阳性)×100%；正确诊断指数=(灵敏度 +特异度)-1；阴性预测值=真阴性/(真阴性+假阴性)×100%；阳性预测值= 真阳性/(真阳性+假阳性)×100%。联合应用时有任一种方法检查结果为阳性即判断为阳性，两种方法均显示阴性可判断为阴性。

1.4 统计学方法 采用SPSS 13.00软件进行数据的处理和统计分析。计数资料行2检验。P<0.05为差异有统计学意义。

2 结 果

2.1TCT与组织病理学检查结果

2140例受检者组织病理学结果：正常或炎症1 864例，CIN Ⅰ级132例，CIN Ⅱ级86例，CIN Ⅲ级45例，SCC 13例。TCT诊断结果：NILM 1 449例(67.71%)，ASCUS 348例(16.26%)，ASCUS-H 85例(3.97)，LSIL 169例(7.90%)，HSIL 76例(3.55%)，SCC细胞13例(0.61%)，TCT诊断阳性率32.29%。其中CIN Ⅰ～Ⅲ型及SCC组TCT阳性率均显著高于正常或炎症组(P<0.01)。见表1。

2.2 HR-HPV检测与组织病理学检查结果 2140例受检者HR-HPV检测单一型HPV感染404例(18.88%)，HR-HPV多重感染262例(12.24%)，阳性率31.12%。CIN Ⅰ～Ⅲ级及SCC组的高危型HPV感染均显著高于正常或炎症组(P<0.05)，并且CIN Ⅰ～Ⅲ级及SCC组HR-HPV多重感染与正常或炎症组HR-HPV检出阳性率比较(P均<0.01)。见表2。

表1 组织病理学检查结果与TCT检测结果比较 例(%)

注：①与正常或炎症组比较，P<0.01。

2.3 HR-HPV DNA检测联合TCT对宫颈高度病变的诊断价值 HR-HPV DNA检测联合TCT敏感度、正确诊断指数、阳性预测值及阴性预测值与单独检查比较均有显著提高(P均<0.05)。见表3。

3 讨 论

宫颈癌为女性生殖系统最常见的恶性肿瘤，发病率仅次于乳腺癌，HR-HPV感染是其根本性致病因子。宫颈癌的发病、发展过程长，从CIN发展到最终的宫颈癌需要10～15年[9]，若能在早期阶段得到治疗，就能预防宫颈癌的发生，经早期诊断、早期治疗，其5年治愈率为80%～90%[10]。但是由于宫颈癌早期症状特异性低，患者容易忽略，因此通过宫颈癌筛查提早发现异常细胞就显得尤为重要。目前采用TCT或HPV检测等方法筛查宫颈癌，以便更早准确诊断和及时治疗，明显降低宫颈癌的发生率及病死率。临床上应用较为常用的宫颈癌筛查方法为TCT及HR-HPV DNA检查。

表2 组织病理学检查与HR-HPV检测结果比较 例(%)

注：①与正常或炎症组比较，P<0.01；②与正常或炎症组比较，P<0.05。

表3 HR-HPV DNA检测、TCT及联合对宫颈高度病变的诊断价值比较

注：①与HR-HPV+TCT比较，P<0.05。

美国FDA认为TCT检测具有较高敏感度和特异性，其改善了细胞学制片质量，提高了LSIL、HSIL的检出率，主要与其标本的采集、玻片的制备过程有关，同时可发现部分癌前病变和微生物感染。与HR-HPV DNA检测比较具有较好的敏感度与正确诊断指数。一般来说TCT诊断与组织病理学检查诊断宫颈病变程度有相当好的一致性，并随着细胞学病变程度的增高而增高。本资料中TCT与病理组织结果对比，CIN Ⅰ～Ⅲ级及SCC病变具有较高阳性率，可见细胞学级别越高，TCT筛查假阳性率越低，筛查意义越大。但由于TCT检查受制片质量和阅片者技术等限制，也会出现一定程度的假阳性，ASCUS患者比较明显，这类涂片多为血液多、黏液多的标本，染色过深或鳞状细胞数量少，少数为用药期间细胞学改变。所以TCT取样需注意：尽量错过经期，取材前24 h内不用药、不冲洗、不过性生活、不做妇科检查，不用润滑剂(润滑剂会影响标本的后期制备效果)；妊娠期妇女应在妊娠中期取样；接受激素替代治疗不影响筛查；分泌物较多先用棉签轻轻擦拭干净；取材时宫颈明显出血，停止；3个月内不重复取材，防止假阴性。 由于TCT检查会出现一定的假阳性率，为了提高筛查的准确性，减少有创的阴道镜病理检测，有必要将HPV列入宫颈防癌的筛查工作中。HR-HPV持续感染是宫颈癌的危险因素，是病变演变为宫颈癌的必要条件，同时HPV检测也可分流ASCUS患者。HC2是目前唯一被FDA批准的宫颈癌筛查HPV检测法，具有敏感度高、阴性预测值高的特点。本组资料中HR-HPV DNA检查结果大于CIN Ⅰ级患者中，HR-HPV检查阳性率均高于正常及炎症组，并随CIN Ⅰ级到SCC各阶段，HR-HPV感染由单一型别感染趋向多重感染。

TCT与HR-HPV检测都能发现早期宫颈病变，其中TCT只能筛查出已发生细胞学改变的宫颈病变，不能筛查高风险女性，HR-HPV只能明确HR-HPV感染，却无法判断是否存在宫颈病变。国内研究表明HR-HPV检测对筛查CIN Ⅰ级、CIN Ⅱ级和早期宫颈癌敏感度较高，能够把高风险人群筛查出来，缩短随访时间，全面预防宫颈恶性病变的发生。因此主张在对宫颈病变的筛查中，应同时进行HPV和TCT检测[11]。

TCT和HR-HPV联合检测提高了筛查灵敏度，本研究中，TCT的灵敏度明显低于联合检测，提示单纯HPV感染引起的早期CIN并不一定伴随细胞学的改变；且TCT的阴性预测值明显低于联合检测，漏诊率极低。对于TCT与HR-HPV均阳性者，立即行阴道镜下病理组织学检查，可早发现，早治疗；TCT阳性而HR-HPV阴性者，应定期随访，或直接行病理组织学检查，以病理组织学为金标准，排除假阳性。

综上所述，宫颈癌及宫颈癌前病变是可以预防、可以早期发现并治疗的，所以进行筛查依然很重要。高危型HPV感染是宫颈癌的危险因素，TCT和HR-HPV DNA检测是目前常用的筛查方法，联合高危型HPV检测与TCT对宫颈癌的筛查，对病情、临床处理、患者顾虑和临床治疗等都具有重要的意义。

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10.3969/j.issn.1008-8849.2015.11.015

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1008-8849(2015)11-1184-03

2014-06-05