四季秋海棠组培快繁技术研究

雷 颖，吴莉红

（甘肃林业职业技术学院园林工程系，甘肃 天水 741020）

四季秋海棠组培快繁技术研究

雷 颖，吴莉红

（甘肃林业职业技术学院园林工程系，甘肃 天水 741020）

以四季秋海棠茎切段为外植体，研究四季秋海棠组培快繁技术。结果表明，在MS+500 mg/L LH+ 3.0 mg/L 6-BA+0.4 mg/L NAA培养基上，不定芽诱导效果较好，分化率达100%。适合四季秋海棠继代培养的培养基为MS+2.0 mg/L 6-BA+0.3 mg/L IAA+0.3 mg/L GA3和MS+2.0 mg/L 6-BA+0.3 mg/L NAA+0.5 mg/L GA3。适宜的生根培养基为1/2 MS+0.2 mg/L IAA，生根率为100%，移栽后成活率达97%。

四季秋海棠；组织培养；快速繁殖

四季秋海棠（Begonia semper florens Link et Otto.），别名瓜子海棠或玻璃秋海棠，是秋海棠科秋海棠属多年生宿根花卉［1～2］。株高20～40 cm，茎稍多汁，叶互生、翠绿色、卵圆形至广椭圆形，叶基部偏斜，聚伞花序腋生，花大；因其花、叶、茎都呈肉质，酷似玻璃而得名。玻璃海棠枝叶青翠，花色妖艳浓郁，如同盛装美人，如栽培得当，可四季开花，是良好的室内小型盆栽观赏花卉。亦作花坛用花，温暖地区或温暖季节可布置于庭院或花坛［3］。

四季秋海棠容荣花贵，易养护管理，颇受广大消费者喜爱，有较大的推广和应用空间。但在我国北方，种子早期未熟先落，采用扦插繁殖数量有限，因此应用组织培养技术繁殖试管苗具有重要的意义。我们通过试验研究取得了较好的培养方案，增殖率高，幼苗健壮，移栽成活率高，可为四季秋海棠规模化生产提供技术支持。

1 材料与方法

1.1 材料

培养材料为甘肃林业职业技术学院花卉品种示范基地种植的四季秋海棠幼苗或幼嫩新枝。

1.2 方法

1.2.1 外植体建立 选取四季秋海棠幼苗或幼茎，剪去叶片，切成2～3 cm小段，用清水处理干净，在超净工作台上用70%酒精浸泡30 s，用无菌水冲3遍，再转入0.1%升汞浸5 min，用无菌水冲洗5遍［4～6］，然后置于高压灭菌过的铺有滤纸的培养皿中，剪成长0.5～1.0 cm，含有1个节的小茎段，接种在分化培养基中进行培养。

1.2.2 初代培养 初代培养以MS+500 mg/L LH为基础培养基［7～8］，分别添加0.5、1.0、2.0、3.0、4.0 mg/L 6-BA和0.1、0.2、0.3、0.4 mg/L NAA，观察记载平均芽数、苗高等指标，20 d后统计分化率。

1.2.3 继代培养 将初代培养所得的簇生嫩茎切成长1.0～1.5 cm的小段，转接到以MS为基本培养基，添加1.0、2.0、3.0、4.0 mg/L 6-BA和0.1、0.3、0.5 mg/L NAA和0.1、0.3、0.5 mg/L IAA以及0.1、0.2、0.3、0.5、0.8、1.0 mg/L GA3的继代培养基中培养。观察记载生长情况，30 d后统计玻璃苗比例。

1.2.4 生根培养 将继代培养所得的嫩茎切下，转入以1/2MS为基本培养基，分别添加0.1 mg/L NAA和0.1、0.2、0.5 mg/L IAA以及0.1、0.3 mg/L IBA的生根培养基中培养，观察生根情况，20 d后统计生根率。

1.2.5 移栽 将生根后的试管苗不开盖在温室中置3 d后，开盖置6 d，然后移栽于珍珠岩的基质中，每天喷水3次，15 d后上盆，统计成活率。

1.3 培养条件

所有培养基都添加蔗糖3%、琼脂0.6%，pH 5.6。培养基在1.5 kg/cm2压力、121℃湿热灭菌20 min［9］。培养室温度为（20±2）℃［10］，光照14 h/d，光照度2 000 Lx［11］。

2 结果与分析

2.1 初代培养

从表1可知，四季秋海棠初代培养基中，在一定范围内，随着6-BA和NAA的浓度的增大，分化率增大、平均芽数增多、平均苗高增高，其中MS+500 mg/L LH+3.0 mg/L 6-BA+0.4 mg/L NAA培养基对丛生芽的诱导率较高，为100%，平均芽数为6.0。但当6-BA浓度大于3.0 mg/L、NAA浓度大于0.4 mg/L时，平均芽数减少，平均苗高降低，且分化时间推迟。可见，MS+500 mg/L LH+ 3.0 mg/L 6-BA+0.4 mg/L NAA培养基适合四季秋海棠的初代培养。

2.2 继代培养

30 d后的增殖结果因激素配比不同而异（表2），嫩茎增殖倍数随6-BA浓度的增高呈现增大后减少的趋势，浓度过高会影响芽苗的高生长，且有玻璃化现象产生。从试验结果可知，MS+2.0 mg/L 6-BA+0.3 mg/L IAA与MS+2.0 mg/L 6-BA+0.3 mg/L NAA是四季秋海棠较为理想的继代培养基，增殖倍数分别为 7.1和 7.8，但 MS+2.0 mg/L 6-BA+0.3 mg/L NAA培养基中的芽苗玻璃化程度相对较高。

表1 不同培养基上四季秋海棠初代培养结果

表2 不同培养基上四季秋海棠继代培养结果

在四季秋海棠的继代培养过程中，6-BA对芽苗的增殖起着决定性的作用，但其浓度较高时，芽苗高生长受到拟制，且会出现玻璃苗［12～13］，而浓度降低分化率又随之下降。在原基础上加入不同浓度的GA3进行试验［14］，20 d后的结果（表3）显示，加入一定浓度的GA3对芽苗高生长具有显著影响，且随着GA3浓度的升高，苗高呈增高趋势，但当GA3浓度大于1.0 mg/L时，苗茎细弱，叶片皱缩，降低GA3浓度可恢复正常。GA3浓度为0.1～0.5 mg/L时植株玻璃化程度较低，芽苗分化较好。综合分析以上结果，适合四季秋海棠继代培养的培养基为MS+2.0 mg/L 6-BA+0.3 mg/L IAA+0.3 mg/L GA3和MS+2.0 mg/L 6-BA+0.3 mg/L NAA+0.5 mg/L GA3。

表3 添加GA3对四季秋海棠继代生长的影响

表4 不同生根培养基四季秋海棠试管苗生根情况

2.3 试管苗生根与移栽

生根培养20 d后观察，以添加一定浓度的IAA培养基生根效果较好（表4），每个嫩茎基部有根3～5条，长约3～5 cm，IAA浓度为0.2 mg/L时效果更好，再生后的完整植株苗形美观，色泽深绿，移栽后成活率高达97%。

3 小结

试验结果表明，MS+500 mg/L LH+3.0 mg/L 6-BA+0.4 mg/L NAA培养基对丛生芽的诱导率较高，为100%，平均芽数为6.0个，是四季秋海棠最适合的初代培养基。在继代培养阶段，对芽苗增殖产生明显影响的因素是6-BA，但当浓度较高时会使芽苗出现玻璃化，而GA3的加入使玻璃苗的概率显著降低。适合四季秋海棠继代培养的培养基为MS+2.0 mg/L 6-BA+0.3 mg/L IAA+0.3 mg/L GA3和MS+2.0 mg/L 6-BA+0.3 mg/L NAA+0.5 mg/L GA3。添加浓度为0.2 mg/L的IAA，有利于四季秋海棠试管苗的生根。

［1］ 北京林业大学园林系花卉教研室.花卉学［M］.北京：中国林业出版社，1999.

［2］ 夏春森，朱义君.名新花卉标准化栽培［M］.北京：中国农业出版社，2005.

［3］ 陈俊愉，刘师汉.园林花卉［M］.上海：上海科技出版社，1980.

［4］ 刘 敏.花卉组织培养与工厂化生产［M］.北京：地质出版社，2002.

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（本文责编：陈 珩）

S682.1；Q813.1

A

1001-1463（2015）02-0034-03

10.3969/j.issn.1001-1463.2015.02.013

2014-08-15；

2014-12-02

雷 颖（1966—），女，甘肃天水人，副教授，主要从事遗传育种学与园林植物栽培养护学的教学与研究。联系电话：（0）13629388692。