草莓玻璃化苗的分析

摘要：本文针对草莓组培苗的玻璃化问题进行分析和讨论。封口透气膜的透气程度影响草莓组培苗的玻璃化；琼脂浓度的多少影响草莓组培苗的玻璃化；6-BA浓度影响草莓组培苗的玻璃化；不同碳源影响草莓组培苗的玻璃化；铵根离子浓度影响草莓组培苗的玻璃化。针对玻璃化草莓苗采取的预防措施。

关键词：草莓苗玻璃化；封口透气膜；琼脂浓度；6—BA；碳源；铵根离子浓度

中图分类号： S668 文献标识码： A DOI编号： 10.14025/j.cnki.jlny.2016.15.037

在进行草莓组织培养时，通常会观察到小苗出现类似玻璃的半透明的水浸状，将其称之为玻璃化苗，这种苗叶片比较脆，用镊子夹取组培苗的时候容易碎，试管苗矮小、肿胀失绿，整个生长异常。玻璃化苗是由于培养环境中的一些物理、化学因子一起导致植物组织代谢失调引起的，玻璃化现象一般不出现在自然生长的植株上，其是植物组织培养中很独特的一种生理病变。用组织培养技术进行植株快繁时由于玻璃苗的出现，使试管苗的生理功能发生障碍，移栽大田不易成活，已成为茎尖脱毒、工厂化育苗和材料保存等方面的严重障碍，是进行组培工作中的一大难题，也是组培扩大生产亟待解决的问题之一。

玻璃苗的发生因素很多，不同植物的主导影响因素往往因种类而异。尽管试管苗有的时候在后期的继代转接中可改善玻璃化的状态，偶尔可恢复，但继代培养如果不能消除玻璃化现象，不仅试管苗的分化能力低下，难以继代增殖，并且试管苗也难以发根成苗，致使移栽也不易成活，因而研究玻璃化苗发生的原因和预防措施，消除玻璃化苗是植物组培中至关重要的环节。

1减少玻璃化苗的措施

1.1封口膜的透气性与草莓玻璃化苗的关系

将接种好的草莓组培苗放入带有琼脂的锥形瓶中，培养基浓度为MS+6-BA0.6毫克/升+NAA0.05 毫克/升，封口膜有两种，一种是单层聚丙烯膜，另一种是双层聚丙烯中间夹一层无纺布透气膜，两者的透气性不同对组培苗产生的效果不一样，培养30天，数据结果见表1。

由表1可以看出封口膜的透气程度越大，玻璃花苗越少。

1.2不同琼脂浓度与草莓玻璃化苗的关系

在生产中我们所说的培养基做的稀还是干，取决于放的琼脂浓度。试验研究：8克/升，7克/升，6.5克/升，每个梯度接种20瓶，接完苗后的结论依次为：8克/升的基本没有玻璃化苗，7克/升的有6瓶玻璃化苗，6.5克/升的有10瓶玻璃化苗。由此下结论，随着琼脂浓度的递减接种的试管苗玻璃化逐渐增多。

1.3不同浓度6-BA与草莓玻璃化苗关系

不同6-BA的浓度对玻璃化苗影响不同，设置6-BA浓度为0.8克/升，1.0克/升，1.5克/升，2.0克/升，接种30天后的统计结果见表2。

由表2可以看出6-BA浓度越高玻璃化苗越严重。

1.4不同碳源与草莓玻璃化苗的关系

一般在组培上使用的碳源都是蔗糖，也有用果糖和葡萄糖的，详见表3。

由表3可见：用蔗糖作为碳源玻璃化苗最少。

1.5铵离子浓度与草莓玻璃化苗的关系

适当降低培养基的铵根离子浓度也能减少玻璃化苗，铵根离子多数来自于NH4O3，想要降低铵根离子浓度，那么就要在配置MS母液的时候减少NH4NO3的放入量，如表4进行讨论。

由表4可见：随着铵根离子的减少玻璃化苗叶随之减少。

2结果与讨论

封口膜越是透气玻璃化苗越少。琼脂浓度越大玻璃花苗越少，一般8克/升最佳；适当降低6-BA浓度能减少玻璃化苗；选择适当的碳源对降低玻璃花苗有好处；适当降低铵根离子浓度叶能减少玻璃化苗。

预防措施：在选材的时候尽量选取不易玻璃化的外植体作培养材料；在制作培养基的时候要控制水分；配制培养基时，选用的激素浓度要反复推敲，选用的激素浓度做出的组培苗在生产上得看栽培效果，比如草莓出瓶后是否结果，增加培养容器的通气度，选择透气性好的封口膜，降低瓶内湿度，采用棉塞，透气膜等透气性好的作为封口材料；培养瓶采用容积较大容器培养，并且尽可能的减少接种密度；培养过程中注意控制室温，以减少玻璃化苗的发生。

作者简介：胡颖，沈阳市农业科学院，中级农艺师，研究方向：组织培养（草莓组织培养，大白菜小孢子技术）。