草莓玻璃化苗的分析
2016-08-30胡颖
在进行草莓组织培养时,通常会观察到小苗出现类似玻璃的半透明的水浸状,将其称之为玻璃化苗,这种苗叶片比较脆,用镊子夹取组培苗的时候容易碎,试管苗矮小、肿胀失绿,整个生长异常。玻璃化苗是由于培养环境中的一些物理、化学因子一起导致植物组织代谢失调引起的,玻璃化现象一般不出现在自然生长的植株上,其是植物组织培养中很独特的一种生理病变。用组织培养技术进行植株快繁时由于玻璃苗的出现,使试管苗的生理功能发生障碍,移栽大田不易成活,已成为茎尖脱毒、工厂化育苗和材料保存等方面的严重障碍,是进行组培工作中的一大难题,也是组培扩大生产亟待解决的问题之一。
玻璃苗的发生因素很多,不同植物的主导影响因素往往因种类而异。尽管试管苗有的时候在后期的继代转接中可改善玻璃化的状态,偶尔可恢复,但继代培养如果不能消除玻璃化现象,不仅试管苗的分化能力低下,难以继代增殖,并且试管苗也难以发根成苗,致使移栽也不易成活,因而研究玻璃化苗发生的原因和预防措施,消除玻璃化苗是植物组培中至关重要的环节。
1 减少玻璃化苗的措施
1.1 封口膜的透气性与草莓玻璃化苗的关系
将接种好的草莓组培苗放入带有琼脂的锥形瓶中,培养基浓度为 MS+6-BA0.6毫克/升+NAA0.05毫克/升,封口膜有两种,一种是单层聚丙烯膜,另一种是双层聚丙烯中间夹一层无纺布透气膜,两者的透气性不同对组培苗产生的效果不一样,培养30天,数据结果见表1。
表1 不同封口膜对草莓玻璃化的影响
由表1可以看出封口膜的透气程度越大,玻璃花苗越少。
1.2 不同琼脂浓度与草莓玻璃化苗的关系
在生产中我们所说的培养基做的稀还是干,取决于放的琼脂浓度。试验研究:8克 /升,7克 /升,6.5克/升,每个梯度接种 20瓶,接完苗后的结论依次为:8克 /升的基本没有玻璃化苗,7克 /升的有 6瓶玻璃化苗,6.5克/升的有10瓶玻璃化苗。由此下结论,随着琼脂浓度的递减接种的试管苗玻璃化逐渐增多。
1.3 不同浓度 6-BA与草莓玻璃化苗关系
不同6-BA的浓度对玻璃化苗影响不同,设置 6-BA浓度为0.8克 /升,1.0克 /升,1.5克 /升,2.0克 /升,接种 30天后的统计结果见表2。
表2 不同6-BA的浓度对玻璃化苗的影响
由表2可以看出6-BA浓度越高玻璃化苗越严重。
1.4 不同碳源与草莓玻璃化苗的关系
一般在组培上使用的碳源都是蔗糖,也有用果糖和葡萄糖的,详见表3。
表3 不同碳源对草莓玻璃化的影响
由表 3可见:用蔗糖作为碳源玻璃化苗最少。
1.5 铵离子浓度与草莓玻璃化苗的关系
适当降低培养基的铵根离子浓度也能减少玻璃化苗,铵根离子多数来自于NH4O3,想要降低铵根离子浓度,那么就要在配置MS母液的时候减少NH4NO3的放入量,如表4进行讨论。
表4 不同铵根离子对草莓玻璃化的影响
由表4可见:随着铵根离子的减少玻璃化苗叶随之减少。
2 结果与讨论
封口膜越是透气玻璃化苗越少。琼脂浓度越大玻璃花苗越少,一般8克/升最佳;适当降低6-BA浓度能减少玻璃化苗;选择适当的碳源对降低玻璃花苗有好处;适当降低铵根离子浓度叶能减少玻璃化苗。
预防措施:在选材的时候尽量选取不易玻璃化的外植体作培养材料;在制作培养基的时候要控制水分;配制培养基时,选用的激素浓度要反复推敲,选用的激素浓度做出的组培苗在生产上得看栽培效果,比如草莓出瓶后是否结果,增加培养容器的通气度,选择透气性好的封口膜,降低瓶内湿度,采用棉塞,透气膜等透气性好的作为封口材料;培养瓶采用容积较大容器培养,并且尽可能的减少接种密度;培养过程中注意控制室温,以减少玻璃化苗的发生。
草莓玻璃化苗的分析
胡颖
(沈阳市农业科学院,辽宁沈阳110000)
本文针对草莓组培苗的玻璃化问题进行分析和讨论。封口透气膜的透气程度影响草莓组培苗的玻璃化;琼脂浓度的多少影响草莓组培苗的玻璃化;6-BA浓度影响草莓组培苗的玻璃化;不同碳源影响草莓组培苗的玻璃化;铵根离子浓度影响草莓组培苗的玻璃化。针对玻璃化草莓苗采取的预防措施。
草莓苗玻璃化;封口透气膜;琼脂浓度;6—BA;碳源;铵根离子浓度
S668
A
10.14025/j.cnki.jlny.2016.15.037
胡颖,沈阳市农业科学院,中级农艺师,研究方向:组织培养(草莓组织培养,大白菜小孢子技术)。