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不同培养基类型对薄荷组织培养的影响

2014-12-23张倩管远清李青

山东农业科学 2014年11期
关键词:组织培养薄荷培养基

张倩+管远清+李青

摘 要:以薄荷茎段为外植体,研究了4种不同类型培养基(MS、1/2MS、B5、N6)对愈伤组织诱导、芽分化以及根诱导的影响。结果表明:1/2MS培养基愈伤组织诱导率最高,为100%,N6培养基愈伤组织的生长量最高;B5培养基芽的诱导率最高,为40%,但1/2MS培养基芽的长势较好;1/2MS培养基最适合根的诱导,诱导率为82.5%。综合分析确定薄荷愈伤组织和根系诱导的最适宜培养基为1/2MS培养基,芽分化的最适宜培养基为B5培养基。

关键词:薄荷;组织培养;培养基;诱导率

中图分类号:S567.23+5.035.3 文献标识号:A 文章编号:1001-4942(2014)11-0030-03

薄荷(Mentha canadensis L.)是唇形科多年生宿根性草本植物,味甘辛,性凉,归肺、肝经,具有清利头目、透疹、杀菌消炎等功效[1],在我国自古就有药食兼用的传统。目前,薄荷已被广泛应用于医学、食品、化妆品等工业,具有很高的经济价值。薄荷繁殖方式以扦插、种子和秧苗繁殖为主,存在品种更新缓慢、易感染病毒等缺点。应用组织培养技术可克服薄荷传统繁殖方式的缺点,已有诸多专家进行了相关研究[2~6]。本试验以薄荷的茎段为外植体,研究不同类型培养基(MS、1/2MS、B5、N6)对薄荷愈伤组织诱导、芽分化以及根诱导的影响,以利于薄荷组织培养中不同诱导目的适宜培养基的筛选。

1 材料与方法

1.1 试验材料

供试品种为葡萄柚薄荷(Mentha suaveolens× piperita),选取无病且生长健壮的葡萄柚薄荷茎段作为外植体,剪去茎段外层大叶片,用洗衣粉水和清水洗净,滤纸吸干其表面水分备用。

1.2 试验处理

试验于2013年4月至2013年11月进行,选取较常用的4种培养基:MS、1/2MS、B5、N6,培养基加琼脂8 g/L,蔗糖30 g/L。薄荷愈伤组织诱导的试验处理见表1,薄荷芽和根诱导的试验处理见表2。

1.3 接种外植体

将薄荷茎段置于干净烧杯中,先用75%酒精浸泡15 s,无菌水冲洗1~2次,再用 0.1% HgCl2浸泡60 s,无菌水冲洗多次。待滤纸吸干其表面水分后,切取0.5 cm长的茎段,接种到培养基上。

4月19日将薄荷外植体接种于1、2、3、4号培养基内,每个处理接种6瓶,每瓶接种5个,共30个外植体。7月9日、10月11日分别将薄荷外植体接种于5、6、7、8号培养基内,每个处理接种8瓶,每瓶接种5个,共40个外植体。

1.4 培养条件及观察

保持干球温度14.8℃,湿球温度(25±2)℃;光照强度为1 500~2 000 lx,12 h光暗交替处理。每天观测外植体分化情况,统计外植体开始萌动的时间,记录愈伤组织、芽、根的诱导及生长情况,并进行比较分析。

2 结果与分析

2.1 不同培养基对薄荷愈伤组织诱导率和生长量的影响

由表3可以看出,4种培养基对薄荷愈伤组织的诱导率均在90%以上。其中,以1/2MS培养基诱导率最高,为100.0%,其次是MS培养基,诱导率为96.7%,N6和B5培养基稍差,诱导率分别为93.3%和90.0%,但1/2MS和MS培养基愈伤组织生长量明显低于B5和N6培养基。

2.2 不同培养基对薄荷芽诱导率和生长量的影响

由表4可以看出,4种培养基对薄荷芽诱导率的影响差异较大,其中以MS和1/2MS培养基较好,芽诱导率分别为25.0%和27.5%,平均芽重均高于N6和B5培养基。B5培养基芽诱导率虽高于MS和1/2MS培养基,但芽平均重量低于二者。N6培养基芽诱导效果最差。

2.3 不同培养基对薄荷根诱导率的影响

由表5可以看出,4种不同类型培养基中,以1/2MS培养基对根的诱导率最高,为82.5%,其次是MS培养基,根诱导率为60.0%,而N6和B5培养基均未诱导出根。

3 结论与讨论

综合分析本试验结果,4种不同类型培养基以1/2MS培养基对薄荷茎段的诱导效果最好,愈伤组织和根的诱导率最高,分别为100%和82.5%,对芽的诱导率也达27.5%,其次是MS培养基。B5培养基对薄荷芽的诱导率虽高达40%,但未诱导出根,其它指标也低于1/2MS和MS培养基。N6培养基的诱导效果最差。

试验看出,不同类型培养基对薄荷茎段的诱导效果有较大差异,1/2MS和MS培养基诱导的各项指标比较均衡,而B5培养基对薄荷愈伤组织和芽的诱导率较多,虽未诱导出根,但可作为薄荷芽诱导的专用培养基。本试验是在基本条件一致的情况下,研究了薄荷愈伤组织诱导、芽分化及根诱导的最佳培养基类型,在此基础上,提高其诱导率的培养基配方,如生长调节剂的种类及浓度有待于进一步研究。

参 考 文 献:

[1] 李辰飞,刘帅. 薄荷的妙用[J].中老年保健,2011(6):5.

[2] 丁琤,徐卫红. 薄荷脱毒苗的离体培养及快速繁殖[J].上饶师范学院学报:自然科学版,2004,24(6):69-72.

[3] 李延红. 薄荷茎段诱导愈伤组织的研究[J].北方园艺,2008(10):163-165.

[4] 钱森和,厉荣玉,王洲,等. 薄荷离体培养及植株再生的研究[J].作物杂志,2008(6):41-44.

[5] 李格,吕国华,贾晓鹰,等. 6-BA、NAA及其组合对诱导薄荷茎段分化与增殖的影响[J].石河子大学学报:自然科学版,2004,22(4):305-308.

[6] 张泽宏,王兵丽,陈巧玲. 薄荷组织和细胞培养的研究进展[J]. 漳州师范学院学报:自然科学版,2013,26(3):93-95. 山 东 农 业 科 学 2014,46(11):39~42

摘 要:以薄荷茎段为外植体,研究了4种不同类型培养基(MS、1/2MS、B5、N6)对愈伤组织诱导、芽分化以及根诱导的影响。结果表明:1/2MS培养基愈伤组织诱导率最高,为100%,N6培养基愈伤组织的生长量最高;B5培养基芽的诱导率最高,为40%,但1/2MS培养基芽的长势较好;1/2MS培养基最适合根的诱导,诱导率为82.5%。综合分析确定薄荷愈伤组织和根系诱导的最适宜培养基为1/2MS培养基,芽分化的最适宜培养基为B5培养基。

关键词:薄荷;组织培养;培养基;诱导率

中图分类号:S567.23+5.035.3 文献标识号:A 文章编号:1001-4942(2014)11-0030-03

薄荷(Mentha canadensis L.)是唇形科多年生宿根性草本植物,味甘辛,性凉,归肺、肝经,具有清利头目、透疹、杀菌消炎等功效[1],在我国自古就有药食兼用的传统。目前,薄荷已被广泛应用于医学、食品、化妆品等工业,具有很高的经济价值。薄荷繁殖方式以扦插、种子和秧苗繁殖为主,存在品种更新缓慢、易感染病毒等缺点。应用组织培养技术可克服薄荷传统繁殖方式的缺点,已有诸多专家进行了相关研究[2~6]。本试验以薄荷的茎段为外植体,研究不同类型培养基(MS、1/2MS、B5、N6)对薄荷愈伤组织诱导、芽分化以及根诱导的影响,以利于薄荷组织培养中不同诱导目的适宜培养基的筛选。

1 材料与方法

1.1 试验材料

供试品种为葡萄柚薄荷(Mentha suaveolens× piperita),选取无病且生长健壮的葡萄柚薄荷茎段作为外植体,剪去茎段外层大叶片,用洗衣粉水和清水洗净,滤纸吸干其表面水分备用。

1.2 试验处理

试验于2013年4月至2013年11月进行,选取较常用的4种培养基:MS、1/2MS、B5、N6,培养基加琼脂8 g/L,蔗糖30 g/L。薄荷愈伤组织诱导的试验处理见表1,薄荷芽和根诱导的试验处理见表2。

1.3 接种外植体

将薄荷茎段置于干净烧杯中,先用75%酒精浸泡15 s,无菌水冲洗1~2次,再用 0.1% HgCl2浸泡60 s,无菌水冲洗多次。待滤纸吸干其表面水分后,切取0.5 cm长的茎段,接种到培养基上。

4月19日将薄荷外植体接种于1、2、3、4号培养基内,每个处理接种6瓶,每瓶接种5个,共30个外植体。7月9日、10月11日分别将薄荷外植体接种于5、6、7、8号培养基内,每个处理接种8瓶,每瓶接种5个,共40个外植体。

1.4 培养条件及观察

保持干球温度14.8℃,湿球温度(25±2)℃;光照强度为1 500~2 000 lx,12 h光暗交替处理。每天观测外植体分化情况,统计外植体开始萌动的时间,记录愈伤组织、芽、根的诱导及生长情况,并进行比较分析。

2 结果与分析

2.1 不同培养基对薄荷愈伤组织诱导率和生长量的影响

由表3可以看出,4种培养基对薄荷愈伤组织的诱导率均在90%以上。其中,以1/2MS培养基诱导率最高,为100.0%,其次是MS培养基,诱导率为96.7%,N6和B5培养基稍差,诱导率分别为93.3%和90.0%,但1/2MS和MS培养基愈伤组织生长量明显低于B5和N6培养基。

2.2 不同培养基对薄荷芽诱导率和生长量的影响

由表4可以看出,4种培养基对薄荷芽诱导率的影响差异较大,其中以MS和1/2MS培养基较好,芽诱导率分别为25.0%和27.5%,平均芽重均高于N6和B5培养基。B5培养基芽诱导率虽高于MS和1/2MS培养基,但芽平均重量低于二者。N6培养基芽诱导效果最差。

2.3 不同培养基对薄荷根诱导率的影响

由表5可以看出,4种不同类型培养基中,以1/2MS培养基对根的诱导率最高,为82.5%,其次是MS培养基,根诱导率为60.0%,而N6和B5培养基均未诱导出根。

3 结论与讨论

综合分析本试验结果,4种不同类型培养基以1/2MS培养基对薄荷茎段的诱导效果最好,愈伤组织和根的诱导率最高,分别为100%和82.5%,对芽的诱导率也达27.5%,其次是MS培养基。B5培养基对薄荷芽的诱导率虽高达40%,但未诱导出根,其它指标也低于1/2MS和MS培养基。N6培养基的诱导效果最差。

试验看出,不同类型培养基对薄荷茎段的诱导效果有较大差异,1/2MS和MS培养基诱导的各项指标比较均衡,而B5培养基对薄荷愈伤组织和芽的诱导率较多,虽未诱导出根,但可作为薄荷芽诱导的专用培养基。本试验是在基本条件一致的情况下,研究了薄荷愈伤组织诱导、芽分化及根诱导的最佳培养基类型,在此基础上,提高其诱导率的培养基配方,如生长调节剂的种类及浓度有待于进一步研究。

参 考 文 献:

[1] 李辰飞,刘帅. 薄荷的妙用[J].中老年保健,2011(6):5.

[2] 丁琤,徐卫红. 薄荷脱毒苗的离体培养及快速繁殖[J].上饶师范学院学报:自然科学版,2004,24(6):69-72.

[3] 李延红. 薄荷茎段诱导愈伤组织的研究[J].北方园艺,2008(10):163-165.

[4] 钱森和,厉荣玉,王洲,等. 薄荷离体培养及植株再生的研究[J].作物杂志,2008(6):41-44.

[5] 李格,吕国华,贾晓鹰,等. 6-BA、NAA及其组合对诱导薄荷茎段分化与增殖的影响[J].石河子大学学报:自然科学版,2004,22(4):305-308.

[6] 张泽宏,王兵丽,陈巧玲. 薄荷组织和细胞培养的研究进展[J]. 漳州师范学院学报:自然科学版,2013,26(3):93-95. 山 东 农 业 科 学 2014,46(11):39~42

摘 要:以薄荷茎段为外植体,研究了4种不同类型培养基(MS、1/2MS、B5、N6)对愈伤组织诱导、芽分化以及根诱导的影响。结果表明:1/2MS培养基愈伤组织诱导率最高,为100%,N6培养基愈伤组织的生长量最高;B5培养基芽的诱导率最高,为40%,但1/2MS培养基芽的长势较好;1/2MS培养基最适合根的诱导,诱导率为82.5%。综合分析确定薄荷愈伤组织和根系诱导的最适宜培养基为1/2MS培养基,芽分化的最适宜培养基为B5培养基。

关键词:薄荷;组织培养;培养基;诱导率

中图分类号:S567.23+5.035.3 文献标识号:A 文章编号:1001-4942(2014)11-0030-03

薄荷(Mentha canadensis L.)是唇形科多年生宿根性草本植物,味甘辛,性凉,归肺、肝经,具有清利头目、透疹、杀菌消炎等功效[1],在我国自古就有药食兼用的传统。目前,薄荷已被广泛应用于医学、食品、化妆品等工业,具有很高的经济价值。薄荷繁殖方式以扦插、种子和秧苗繁殖为主,存在品种更新缓慢、易感染病毒等缺点。应用组织培养技术可克服薄荷传统繁殖方式的缺点,已有诸多专家进行了相关研究[2~6]。本试验以薄荷的茎段为外植体,研究不同类型培养基(MS、1/2MS、B5、N6)对薄荷愈伤组织诱导、芽分化以及根诱导的影响,以利于薄荷组织培养中不同诱导目的适宜培养基的筛选。

1 材料与方法

1.1 试验材料

供试品种为葡萄柚薄荷(Mentha suaveolens× piperita),选取无病且生长健壮的葡萄柚薄荷茎段作为外植体,剪去茎段外层大叶片,用洗衣粉水和清水洗净,滤纸吸干其表面水分备用。

1.2 试验处理

试验于2013年4月至2013年11月进行,选取较常用的4种培养基:MS、1/2MS、B5、N6,培养基加琼脂8 g/L,蔗糖30 g/L。薄荷愈伤组织诱导的试验处理见表1,薄荷芽和根诱导的试验处理见表2。

1.3 接种外植体

将薄荷茎段置于干净烧杯中,先用75%酒精浸泡15 s,无菌水冲洗1~2次,再用 0.1% HgCl2浸泡60 s,无菌水冲洗多次。待滤纸吸干其表面水分后,切取0.5 cm长的茎段,接种到培养基上。

4月19日将薄荷外植体接种于1、2、3、4号培养基内,每个处理接种6瓶,每瓶接种5个,共30个外植体。7月9日、10月11日分别将薄荷外植体接种于5、6、7、8号培养基内,每个处理接种8瓶,每瓶接种5个,共40个外植体。

1.4 培养条件及观察

保持干球温度14.8℃,湿球温度(25±2)℃;光照强度为1 500~2 000 lx,12 h光暗交替处理。每天观测外植体分化情况,统计外植体开始萌动的时间,记录愈伤组织、芽、根的诱导及生长情况,并进行比较分析。

2 结果与分析

2.1 不同培养基对薄荷愈伤组织诱导率和生长量的影响

由表3可以看出,4种培养基对薄荷愈伤组织的诱导率均在90%以上。其中,以1/2MS培养基诱导率最高,为100.0%,其次是MS培养基,诱导率为96.7%,N6和B5培养基稍差,诱导率分别为93.3%和90.0%,但1/2MS和MS培养基愈伤组织生长量明显低于B5和N6培养基。

2.2 不同培养基对薄荷芽诱导率和生长量的影响

由表4可以看出,4种培养基对薄荷芽诱导率的影响差异较大,其中以MS和1/2MS培养基较好,芽诱导率分别为25.0%和27.5%,平均芽重均高于N6和B5培养基。B5培养基芽诱导率虽高于MS和1/2MS培养基,但芽平均重量低于二者。N6培养基芽诱导效果最差。

2.3 不同培养基对薄荷根诱导率的影响

由表5可以看出,4种不同类型培养基中,以1/2MS培养基对根的诱导率最高,为82.5%,其次是MS培养基,根诱导率为60.0%,而N6和B5培养基均未诱导出根。

3 结论与讨论

综合分析本试验结果,4种不同类型培养基以1/2MS培养基对薄荷茎段的诱导效果最好,愈伤组织和根的诱导率最高,分别为100%和82.5%,对芽的诱导率也达27.5%,其次是MS培养基。B5培养基对薄荷芽的诱导率虽高达40%,但未诱导出根,其它指标也低于1/2MS和MS培养基。N6培养基的诱导效果最差。

试验看出,不同类型培养基对薄荷茎段的诱导效果有较大差异,1/2MS和MS培养基诱导的各项指标比较均衡,而B5培养基对薄荷愈伤组织和芽的诱导率较多,虽未诱导出根,但可作为薄荷芽诱导的专用培养基。本试验是在基本条件一致的情况下,研究了薄荷愈伤组织诱导、芽分化及根诱导的最佳培养基类型,在此基础上,提高其诱导率的培养基配方,如生长调节剂的种类及浓度有待于进一步研究。

参 考 文 献:

[1] 李辰飞,刘帅. 薄荷的妙用[J].中老年保健,2011(6):5.

[2] 丁琤,徐卫红. 薄荷脱毒苗的离体培养及快速繁殖[J].上饶师范学院学报:自然科学版,2004,24(6):69-72.

[3] 李延红. 薄荷茎段诱导愈伤组织的研究[J].北方园艺,2008(10):163-165.

[4] 钱森和,厉荣玉,王洲,等. 薄荷离体培养及植株再生的研究[J].作物杂志,2008(6):41-44.

[5] 李格,吕国华,贾晓鹰,等. 6-BA、NAA及其组合对诱导薄荷茎段分化与增殖的影响[J].石河子大学学报:自然科学版,2004,22(4):305-308.

[6] 张泽宏,王兵丽,陈巧玲. 薄荷组织和细胞培养的研究进展[J]. 漳州师范学院学报:自然科学版,2013,26(3):93-95. 山 东 农 业 科 学 2014,46(11):39~42

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