X线辐射及TMZ化疗联合应用对脑胶质瘤表达干细胞标志物的影响

李高伟 苏晓娜 王 阁

第三军医大学第三附属医院肿瘤中心 重庆 400042

脑胶质瘤为起源于神经胶质细胞的，发病率较高的颅内肿瘤［1-2］。本病随着胶质瘤分级及生长部位不同，其疾病程度严重也不同［3］。目前虽然临床已有大量的研究显示，在脑胶质瘤接受手术治疗后给予放化疗治疗对于改善患者的预后有极为重要的作用［4-5］，但对于手术放化疗改善患者预后的作用机制仍不明确。本文通过对接受脑胶质瘤患者进行体外研究，分析联合X线辐射及TMZ化疗干预后脑胶质瘤干细胞标志物的表达情况，现介绍如下。

1 资料与方法

1.1 标本采集 将51例我院于2012-12—2014-08经病理学检查明确诊断为脑胶质瘤的手术标本作为观察对象。将所有标本根据脑胶质瘤分级分为低级别组及高级别组。其中低级别组标本22例，脑胶质瘤分级为Ⅰ～Ⅱ级；高级别组标本29例，脑胶质瘤分级为Ⅲ～Ⅳ级。所有入选标本患者在入组前均未接受放化疗治疗。

1.2 标本干预方法 所有标本均需接受X线辐射及TMZ化疗治疗。X线辐射吸收剂量给予6Gy，按200cGy／min为吸收率。辐射结束后给予TMZ化疗处理，即给予半数抑制浓度的药物计量对细胞进行处理。

1.3 标本干细胞标志物检测方法及观察方法 取得标本后立即进行血清培养及非血清培养，于标本在显微镜下可见到有球形生长且可经轻微震荡后出现明显晃动时进行离心，并洗涤细胞，以作备用。将每个标本经培养及洗涤后的细胞均分为A及B两份，其中A份立即进行CD133及ABCG2的表达情况检测，作为干预前检测所用标本，B份立即给予X线辐射及TMZ化疗干预，作为干预后检测所用标本。CD133及ABCG2的表达情况检测均应用流式细胞仪进行，计算每组干预前后CD133及ABCG2的阳性表达情况，并进行对比。同时对治疗前后CD133及ABCG2的阳性表达改善情况与标本恶性程度的相关性进行分析。

1.4 统计学分析 以SPSS 19.0作为统计分析软件，计数资料以%表示，采用χ2检验，分别应用χ2检验及直线相关分析进行检测，P＜0.05为差异有统计学意义。

2 结果

2.1 干预前后CD133及ABCG2的阳性表达情况比较 2组间CD133及ABCG2的表达均存在显著的差异，高级别组表达程度均明显高于低级别组（P＜0.05）；2组在接受联合X线辐射及TMZ化疗干预后，CD133及ABCG2均明显改善，以低级别组改善更为明显（P＜0.05）。见表1。

表1 干预前后CD133及ABCG2的阳性表达情况比较 ［n（%）］

2.2 CD133及ABCG2阳性表达改善情况与恶性程度相关性分析 治疗前后CD133及ABCG2改善度与细胞恶性程度存在负向直线相关性（P＜0.05），见表2。

表2 CD133及ABCG2阳性表达改善情况与恶性程度相关性分析

3 讨论

目前，随着临床对于脑胶质瘤研究的深入，已有大量的研究显示，在患有脑胶质瘤的患者中，患者的预后与肿瘤分级、分期，治疗并发症及手术切除程度均存在密切相关性［6-7］。同时，临床通过对比研究也证实，在患有脑胶质瘤患者的治疗中，以手术后联合放疗化疗治疗的有效率最高［8-9］。为深入了解脑胶质瘤患者在行手术治疗后联合接受放化疗对患者预后的改善作用，本文将我院近年来所收治的行手术治疗的脑胶质瘤患者作为观察对象，将手术所得的病理标本作为观察标本，通过干细胞标志物的阳性表达程度来分析其预后改善的作用机制。

本研究选取了在恶性肿瘤干细胞中与细胞恶性程度有着密切相关性的CD133及ABCG2作为观察指标［10］，以期可以更好的对临床作用机制进行分析。其中CD133是为相对分子量较大的跨膜蛋白之一，是临床具有极高评估作用的胶质瘤细胞干细胞标志物。而ABCG2为首先于乳腺癌细胞中被发现的干细胞标志物，其属ABC基因族，为该基因族中最为重要的一个标志物。同时近年来研究显示，在胶质瘤干细胞中其含量的升高对于患者的耐药性有一定相关性。本文将两者作为观察指标，以提高研究的准确性。本研究首先对不同恶性程度的脑胶质瘤标本间CD133及ABCG2的差异进行比较显示，2组间CD133及ABCG2的表达均存在显著的差异，高级别组表达程度均明显高于低级别组，可见CD133及ABCG2对于评价脑胶质瘤恶性程度同样有显著意义。而进一步即对联合X线及TMZ化疗干预的作用价值进行分析显示，在接受干预后，CD133及ABCG2均明显改善，以低级别组改善更为明显。可见在不同恶性程度的患者中，虽然联合两种干预方式均可达到有效的改善CD133及ABCG2的效果，但是以临床恶性程度轻者其改善更为明显。为进一步对CD133及ABCG2改善程度与肿瘤细胞恶性程度间的关系进行探讨，本文对CD133及ABCG2改善程度与肿瘤细胞恶性程度进行相关性分析，结果显示，治疗前后CD133及ABCG2改善度与细胞恶性程度存在负向直线相关性。

综上所述，不同恶性程度的胶质瘤细胞中CD133及ABCG2的表达存在显著差异。联合X线辐射及TMZ化疗可有效改善CD133及ABCG2表达，且与细胞恶性程度存在负向直线相关性。

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