缺血后处理对鼠脊髓缺血-再灌注损伤中MDA和SOD的影响

张 铨 陈明华（通讯作者） 吴俊山 朱庆斌

福建福州总医院九五临床部 莆田 351100

近年来，如何有效避免和治疗脊髓损伤是临床上研究的重点，有学者主张缺血后处理和缺氧后处理的改变，可有效减轻脊髓缺血-再灌注损伤，从而达到保护脊髓的作用［1］。但对于该方法的治疗机制尚未明确。本研究主要以48只雄性大鼠为研究对象，分析了缺血后处理对鼠脊髓缺血-再灌注损伤中MDA和SOD的影响。具体介绍如下。

1 资料与方法

1.1 一般资料 选择48只雄性大鼠，将其随机分成对照组、PA、PB、PC 4组，每组12只，对照组给予单纯缺血-再灌注处理，PA、PB、PC分别于缺血后15s、30s、60s后阻闭腹主动脉15min，继续灌注15s、30s、60s，如此反复操作3次。PA、PB、PC 3组大鼠均在最后一次缺血处理后再灌注1h。

1.2 方法 实验前所有动物严格禁食，实验当天给予浓度为20g／L的戊巴比妥钠对大鼠进行静脉注射，手术过程中持续输注4mL／（kg·h）复方乳酸钠，并进行股动脉穿刺，通过压力传感器对大鼠的股动脉压进行监测，读取脉率（PR），从大鼠肛门放入温度探头对肛门温度持续监测。对缺血前、缺血15min，再灌注15minPaCO2、PaO2、pH及血糖进行测定。另外，对所有大鼠缺血前、缺血15min以及再灌注1h时的MDA含量、SOD活性进行测定，试剂盒由南京建成生物工程研究所提供，分光光度计由美国Deckman公司生产的DU800型核酸蛋白分析仪。所有操作步骤严格按照试剂盒说明书进行。

1.3 统计学分析 采用SPSS 19.0进行统计分析。计量资料以（±s）表示，采用两样本独立t检验，P＜0.05为差异有统计学意义。

2 结果

血浆中MDA含量及SOD活性测定，见表1。由表中数据可知，缺血前和缺血10min，4组大鼠血浆中MDA含量及SOD活性差异不显著，而再灌注1h，PA、PBMDA含量较对照组明显更低，SOD活性较对照组明显更高，差异具有统计学意义（P＜0.05）。

表1 血浆中MDA含量及SOD活性测定

3 讨论

缺血后处理和缺血预处理不同，预处理具有早期和延迟两种保护作用，而后处理通常是在早期进行脊髓缺血-再灌注的保护［2-3］。临床研究发现［4-5］，鼠脊髓缺血后再灌注期间，随着氧自由基含量的升高，SOD活性会下降，提示氧自由基在脊髓缺血再灌注中具有重要参与作用。另外，机体主要通过非酶系统和酶系统产生氧自由基，非酶系统对生物膜中的多不饱和脂肪酸具有攻击作用，产生醛基、羟基、酮基、羧基等脂质过氧化物，因此，MDA含量的测定可以有效反映脂质过氧化的程度，一定程度上反映细胞损伤的程度［6-7］。以适当的间隔短期内进行HBO-PC可诱导脊髓持续性缺血耐受，其机制可能是HBO-PC生成反应性氧自由基，介导NF-KB DNA结合活性于预处理早期、晚期两时相增高，以及反复预处理刺激后的时相延长作用导致Bcl-2在预处理后早、中、晚三个时相表达增高。高压氧预处理所诱导的脊髓持续性缺血耐受的机制与NF-KB的产生有关［8］。SOD作为细胞内主要的自由基清除剂和抗氧化酶，其表达水平的降低，可表明SOD对组织细胞免受毒性氧自由基损伤的保护效果减弱。缺血后处理可减少再灌注后氧自由基的过度生成，使其清除作用加强，从而缓解生物膜结构和功能受到氧自由基的破坏，阻断氧自由基的凋亡途径，较好地拮抗细胞凋亡的发生，达到较好的保护作用。因此，我们认为，早期短时间缺血后处理在预防大鼠脊髓缺血-再灌注损伤中具有较高的临床应用价值。

综上所述，进行早期短时间缺血后处理可有效抑制再灌注后生成过量氧自由基，可以一定程度上保护大鼠脊髓缺血-再灌注损伤。

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