青蟹池塘生态育苗试验
2014-12-15金中文王扬才吴仲宁戴海平蔡志立
金中文, 王扬才, 吴仲宁, 戴海平, 蔡志立
(1.宁波市海洋与渔业研究院, 浙江 宁波315012; 2.宁波市鄞州区渔业技术管理服务站, 浙江 宁波315100;3.宁波鄞州咸祥志立水产苗种养殖场, 浙江 宁波315100)
青蟹是我国沿海重要的养殖种类, 是珍贵的海珍品之一[1], 在我国养殖有近百年的历史。据中国渔业统计资料[2], 2010年全国青蟹年产量11.59×104t,然而, 青蟹养殖的苗种几乎依赖自然海区的野生苗种。虽然, 国内外对青蟹养殖开展长期的研究与技术开发, 青蟹苗种培育技术均采取工厂化人工育苗的方法, 但苗种产业化生产技术尚未取得根本性的突破[3], 养殖业也因此受到制约。青蟹苗种培育对于环境和营养的要求高于其他蟹类, 人工培育的亲蟹所产的卵, 可能存在先天的营养缺陷, 而工厂化人工育苗存在饲料营养不能满足幼体发育的营养需求,最终导致幼体变态率低, 不能顺利完成幼体全过程的变态。幼体培育的生态环境也是决定育苗成败的关键[4]。河蟹、梭子蟹土池育苗技术较为成熟, 已经普及推广并在养殖生产中发挥重要作用, 青蟹土池育苗尚未有成功的报道[5]。为此, 本文开展青蟹池塘生态育苗相关的基础研究, 探讨青蟹池塘生态育苗的可行性, 寻求青蟹苗种培育新的途径。
1 材料与方法
1.1 实验条件
2011年和2012年4~6月期间, 试验选择在浙江省宁波市位于象山港畔区域养殖场, 池塘2个, 育苗池形状为长方形, 每个池塘面积 300~500 m2, 池深1.2~1.5 m, 坡比1∶2。整个育苗池铺设防渗膜, 完全隔离与土壤的联系, 在防渗膜内外设有排水管和渗水排水管, 每口池塘安装水车式增氧机。
1.2 实验方法
1.2.1 亲蟹培育与幼体孵化
种蟹选择浙江省三门湾区域养殖场养殖的拟穴青蟹(Scylla paramamosai), 亲蟹壳宽(11.66±0.83) cm,壳高(8.35±0.58) cm。亲蟹放置在育苗室内培育, 抱卵蟹胚胎发育成熟, 心跳120次/min以上, 移至池塘中孵化, 掌握蟹卵集中在2 d内全部孵化, 每池放入抱卵蟹 5~7只。推算抱卵蟹卵数量平均 150×104粒,孵化率80%左右, 每只抱卵蟹孵化幼体120×104只[1]。幼体密度掌握在 1.2×104~2.8×104只/m3。
1.2.2 水质管理
育苗开始前 15 d, 蓄水池进水, 用漂白粉50 mg/L消毒, 孵化前 5 d, 将蓄水池的水抽入育苗池, 水位 80 cm, 进水后, 投施浮游藻类的营养素培养藻类。幼体培育15 d后开始换水, 换水量视水质状况决定, 定时开增氧机。观察水体浮游植物状态、数量, 适当添加藻类营养素或氮肥、磷肥和硅酸盐等,保持藻类良好的状态与适当的密度。
1.2.3 饵料投喂
幼体孵化后, 及时投喂轮虫和配合饲料。轮虫由专门土池塘培养, 密度为300~500个/L, 每日1~2次, 螺旋藻粉和日本对虾配合饲料, 每次用量各1mg/L, 每日3次。之后随着幼体发育进展, 加大轮虫投喂密度, 逐渐增至500~1000 个/L。幼体发育变态至蚤状幼体Ⅲ期(Z3)后, 开始投喂丰年虫幼体, 变态到大眼幼体阶段,增投丰年虫成虫, 幼蟹Ⅰ~Ⅱ期(C1~C2)阶段, 投喂冷冻的丰年虫成虫,投喂量为幼体总体质量的100%~200%。
1.3 采样与检测
1.3.1 浮游生物采样
浮游生物每 5 d采样一次, 浮游藻类采样水深0.5 cm, 水样1 L, 采得后立即加入15 mL鲁哥氏液固定。浮游动物用2.5 L采水器, 采样10 L, 现场利用浮游动物网(25号)过滤, 浓缩样品集中于500 mL塑料瓶中, 并加入7 mL甲醛(4%)固定,带回实验室鉴定和计数。浮游植物和浮游动物计数方法参考湖泊富营养化调查规范[6]。
1.3.2 水质检测
在池塘设固定水质检测点, 用美国产“QUANTA”水质检测仪, 现场测定溶解氧、温度、盐度、pH值、饱和度, 营养盐测定方法, 按照《海洋调查规范》进行[7]。
1.3.3 幼体生长指标测定
每个变态期对幼体取样, 取变态前1 d和刚变态的幼体。幼体体质量检测方法, 用吸纸吸除幼体体表的水分, 然后进行称质量。
13.4 数据分析
使用Prime软件中Simper分析群落的优势物种,用SPSS软件进行统计分析。
2 结果与分析
2.1 育苗数量与幼体成活率
2011年和2012年实验的两口池塘, 共培育出蟹苗(稚蟹Ⅰ至Ⅱ期)34.1×104只。2011年单位产苗量107.00只/m2, 2012年为 212.38 只/m2, 单位水体育苗最高产量为383.00只/m2。2011年幼体成活率平均0.89%, 2012年2.10%, 幼体成活率(Z1至C1~2)最高为3.19%(表2和表3)。
表1 饵料投喂量参考表Tab.1 Bait feeding quantity
表2 2011年青蟹育苗量统计表Tab.2 Seedling quantity statistics in 2011
表3 2012年青蟹育苗量统计表Tab.3 Seedling quantity statistics in 2012
2.2 幼体变态与生长
幼体生长(蚤状幼体Ⅰ期至大眼幼体阶段)符合指数生长, 计算生长曲线方程:y=0.14e0.497x(图1),大眼幼体平均体质量3.43 mg, 稚蟹Ⅰ期(C1)平均体质量18.13 mg。
图1 幼体体质量增长结果Fig.1 Larvae weight growth curve
从蚤状幼体孵出至蟹苗销售的时间需要33~34 d, 出售蟹苗规格为稚蟹Ⅰ至Ⅱ期, 幼体全部变态至稚蟹再继续培育约一周后。幼体的变态时间,Z1变态至 C1约 23~25 d(表4)。
表4 幼体变态天数Tab.4 Larva abnormal days
2.3 育苗池塘水质因子变化
2011年育苗期间, 池塘水温(24.85±26.50)℃, 盐度(S)26.50±4.64。2012 年池塘水温(23.13±1.25)℃, 盐度 20.18±1.37(图2, 图3), 溶解氧(DO)(7.20±0.67)mg/L, pH8.65±0.39。
图2 2011年育苗池塘盐度变化Fig.2 Changes of water salinity in seedling pond in 2012
图3 2012年育苗池塘盐度变化Fig.3 Changes of water salinity in seedling pond in 2012
表5 2012年池塘营养盐分析Tab.5 Pond nutrients in 2012
池塘氨氮浓度为(0.037±0.012) mg/L, 亚硝酸盐浓度为(0.026±0.012) mg/L, 硝酸盐浓度为(0.186±0.136 ) mg/L(表5)。
2.4 浮游生物种类与群落特征
2.4.1 浮游植物
鉴定出藻类20种。硅藻门:尖刺菱形藻(Nitzschia pungens Grunow),小环藻(Cyclotellasp.),曲舟藻(Pleurosigma affine), 舟形藻(Naviculasp), 角毛藻(Chaetoceros.sp.), 菱形藻(Nitzschiasp), 双尖菱形藻(Nitzschia amphioxys), 奇异菱形藻(Nitzschia paradoxa), 楔形藻(Licmophorsp.); 绿藻门: 小球藻(Chlorella), 扁藻(Tetraselmischui), 盘星藻(Pediastrum), 卵囊藻(Oocystis), 小形平藻(Pedinomona sminor), 栅藻(Scenedesmus quadricanda), 绿球藻(Chlorellasp.); 甲藻门:裸甲藻(Gymnodinium aerucyinosum), 多甲藻(Peridinium conicum); 蓝藻门:颤藻(Oscillatoria), 螺旋藻(Arthrospira)。细胞密度(1760.2×104±5119.4×104)个/L。藻类群落以小球藻(Chlorella), 扁藻(Tetraselmischui), 尖刺菱形藻(Nitzschia pungensGrunow), 小环藻(Cyclotellasp.),舟形藻(Naviculasp.), 菱形藻(Nitzschiasp.), 出现的频度较高, 细胞密度大(表6)。
表6 主要藻类种类以及密度Tab.6 The main plankton species and density
2.4.2 浮游动物
鉴定出大型浮游动物种类 11种, 原生动物 12种。桡足类: 尖额真猛水蚤(Euterpe acutifrons)、透明温剑水蚤(Thermocyclops hyalinus)、无节幼虫(Nauplius)、精致真刺水蚤(Euchaeta concinna)、刺尾纺锤水蚤(Acartia spinicauda)、红小毛猛水蚤(Microsetella rosea); 轮虫: 皱褶臂尾轮虫(Brachionus plicatilis); 幼体: 辐射幼虫(Actinula)、摇蚊幼虫(Chironomidae larva)、纤毛幼虫(Zoanthina larva); 线虫: 线虫(Nematoda)。密度(646.28±899.17)个/L(表7, 图4, 图5)。
原生动物: 膜袋虫(Cyclidiumsp.)、纤毛虫(Ciliophorasp)、蚤状中缢虫(Mesodinium pulex)、急游虫(Strombidiumsp.)、草履虫(paramoeciumsp.)、单柱偏体虫(Dysteria monostyla)、辐射变形虫(Amoeba radiosa)、尾毛虫(Uronemasp.)、袋形虫(Bursariasp.)、游仆虫(Euplotessp.)、优雅拟盗虫(Strombidinopsis elegans)、钟虫游泳体(Vorticellasp.)。密度(6.66×104±18.57 )个/L。优势种类有: 游仆虫、丁丁急游虫、水虱幼体(表8, 图6, 图7)。
表7 主要大型浮游动物种类及密度Tab.7 The main species and density of zooplankton
图4 1#池塘浮游动物密度变化Fig.4 Dynamics of zooplankton in pond 1#
图5 2#池塘浮游动物密度变化Fig.5 Dynamics of zooplankton in pond 2#
浮游动物群落以桡足类和轮虫生物量最大。人工投喂的皱褶臂尾轮虫在蚤状幼体培育的前两周,1#池塘密度维持在 250~300个/L, 2#池塘密度200~1500 个/L, 之后, 也保持一定的数量。育苗开始约20 d(池塘进水时开始计算)后, 尖额真猛水蚤数量上升, 密度 100~250 个/L, 无节幼虫在进水 1~2周时出现峰值。1#池塘的原生动物在育苗开始的一周后, 数量减少, 2#池塘原生动物在育苗开始15 d后,丁丁急游虫等原生动物数量增加。固着类纤毛虫以及幼体在育苗开始后20~25 d出现高峰。
表8 主要原生动物种类及密度Tab.8 The main species and density of protozoon
图6 1#池塘原生动物密度变化Fig.6 Dynamics of protozoon in pond 1#
图7 2#池塘原生动物密度变化Fig.7 Dynamics of protozoon in pond 2#
3 讨论
育苗池塘的盐度呈初期高, 后期低, 符合自然海区中青蟹幼体的生长发育过程经历了从高盐到低盐的过渡[8]。陈弘成和郑金华[9]青蟹早期幼体适宜盐度为25~30, 后期适宜盐度为20~25。2012年育苗盐度低, 平均 20.18±1.37, 1#池塘盐度从 5月 29日的20.27到 6月 4日持续下降至 15.66, 期间观察到 Z5幼体密度明显减少, 育苗成活率可能与盐度偏低有关,推测蚤状幼体Ⅴ期至大眼幼体阶段盐度应高于20。
水温是选择合适的育苗季节的主要依据。浙江宁波沿海4月份气温较低, 冷空气频繁, 直至5月上中旬也有多个冷空气影响, 6月份水温稳定并趋于明显的上升, 鉴于当地青蟹养殖一般在 6月上旬之前放养, 产品当年可以上市的习惯, 5月上旬育苗时段显得十分重要。幼体变态速度与水温有密切关系[10],整个育苗期间的水温范围, 2011年为(23.13±1.25)℃,2012年为(24.85±26.50)℃。幼体变态至稚蟹的时间(Z1~C1)25d左右, 整个育苗周期33 d左右, 池塘培育幼体变态时间与曾朝曙等[10]所需时间基本一致。锯缘青蟹蚤状幼体生长发育的适温范围为25~30℃。温度对蚤状幼体变态过程有明显影响, 水温大于或达到 30℃时不利于变态的进行, 但变态后的大眼幼体对高温适应力增强[10]。宁波地区青蟹池塘育苗时间,春夏季选择在 5~7月, 此时, 水温稳定在 23℃以上,开展池塘育苗较为合适。
育苗期间, 池塘溶解氧处在较高的水平, pH值在正常范围之内, 各池塘的氨氮、硝酸盐、亚硝酸盐浓度不存在显著差异(P>0.05), 浓度普遍较低。这可能与育苗时间短, 投喂活饵料和控制配合饵料投量,加之, 池塘用防渗膜与土壤隔离以后, 大幅度减少池塘底部有机物数量有关。以上水质指标反映池塘的物质代谢顺畅, 水质相对稳定, 对育苗是十分有利的。
育苗池塘浮游藻类以硅藻、小球藻和扁藻为优势。小球藻作为轮虫的营养强化饵料和保持水质稳定性发挥十分重要作用, 不仅可以提高轮虫的 EPA和DHA含量, 尤其是DHA含量, 将有利于锯缘青蟹幼体的存活和发育[11-13], 硅藻和扁藻是虾蟹类幼体的优良饵料。池塘桡足类丰富, 后期幼体投喂桡足类可以提高成活率[14]。可见, 池塘育苗过程中幼体可以获得更全面和优质的饵料营养。
育苗过程中, 尖额真猛水蚤等水蚤密度过大,合计达到120.27 个/L, 尖额真猛水蚤的繁殖速度快,日增值率 0.149[15], 而且, 猛水蚤与其幼体的游泳速度极快, 与青蟹幼体产生饵料和水体空间的竞争。青蟹幼体捕食水蚤与其幼体的的机会十分有限。
青蟹幼体发生固着性纤毛虫附着现象比较普遍,纤毛虫病在河蟹和三疣梭子蟹土池育苗同样存在严重的危害[16-17]。2012年育苗的1#池塘没有检测到纤毛虫, 2#池塘, 后期纤毛虫密度呈高达 10×104ind/L,严重危害幼体的摄食和活动, 纤毛虫可能是造成幼体成活率低的主要原因之一。纤毛虫的主要来源可能从投喂轮虫时携带入池塘, 土池培养轮虫, 预防纤毛虫十分关键。才女虫(Polydorasp)对中华绒螯蟹(Eriocheir sinens)、梭子蟹土池育苗造成严重危害,防渗膜围隔可以彻底避免才女虫的滋生[18], 育苗过程中未发生才女虫危害。
青蟹池塘生态育苗试验表明: 池塘饵料丰富,幼体可以获得更全面和优质的饵料营养, 水体环境良好, 经过两年的试验, 在自然条件下成功培育出蟹苗, 幼体成活率和单位产量与梭子蟹地膜池塘育苗幼体成活率为6.95%, 单位产量1325.8只/m2[16]的结果接近。地膜池塘培育梭子蟹苗试验[18]结果, 梭子蟹幼体成活率有显著提高(P<0.05), 平均出苗量比较土池塘的出苗量提高 16.24%, 育成率提高 63.53%,试验池塘的蟹苗捕捞更方便、彻底。只要选择合适的季节, 做好竞争性生物和病害的预防, 可以获得量产的目标, 池塘生态育苗方法培育青蟹苗是可行的, 并有可能获得规模化生产的重大突破。
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