手足口病(HFMD)患儿细胞免疫及体液免疫变化及与病情预后的关系探讨

武鸣凤 李 秋 单洪际

吉林省结核病医院，吉林长春 130500

手足口病(HFMD)是临床常见的婴幼儿传染性疾病[1]。发病人群多为5 岁以下儿童，临床症状主要有手、足、口腔等部位的疱疹或者是破溃性溃疡等，少数患儿可引发脑膜炎、心肌炎以及肺水肿等并发症。近几年来，HFMD 的发病率逐年升高，如何在发病早期进行有效评估并对重症患儿危险性给予及时干预，改善患儿病情预后，一直的临床研究的重点[2]。目前实验室T 细胞亚群及免疫球蛋白等免疫学检测指标，在一定程度上可有效反映HFMD 患儿的机体免疫状态[3]。该次研究抽选2010年7月—2014年5月175 例HFMD 患儿，对其不同病程患儿血清免疫球蛋白指标及T 细胞亚群相关指标进行分析，并与健康患儿进行对比，旨在探讨HFMD 患儿病情进展与细胞及体液免疫水平的关系，以及机体免疫水平在HFMD 患儿病情进展中的作用，现报道如下。

1 资料与方法

1.1 一般资料

随机抽选该院收治的175 例HFMD 患儿，诊断均符合《手足口病诊疗指南》[4]的诊断标准，其中男92 例，女83 例，年龄5 个月～8 岁，平均(2.85±1.07)岁；根据临床表现和病情发展分型：轻症型63 例，其中男42 例，女21 例，年龄5 个月～7 岁，平均(2.79±1.09)岁；重型60 例，其中男32 例，女28 例，年龄6 个月～8 岁，平均(2.83±1.05)岁；危重型52 例，其中男18 例，女34 例，年龄5 个月～7 岁，平均(2.80±1.11)岁；所有患者均未合并其他慢性疾病史，轻症型组均治愈好转，重型组病例中死亡3 例，危重型组死亡6例。同时抽选同期131 例健康体检儿为对照组，其中男75 例，女60 例，年龄4 个月～7 岁，平均(2.88±1.06)岁；各组间性别、年龄比较差异无统计学意义（P＞0.05）。

1.2 重型及危重型HFMD 患儿临床特性

重症均有如单纯脑炎、脑炎合并肺炎及其他上呼吸道感染等并发症。重型组指有发热、皮疹以及神经系统受累症状，表现为嗜睡、肢颤、阵发性抽搞、易惊吓等。危重型组临床表现为持续性高热（基础体温≥39.0℃），持续时间大约为2～7 d；病情危重，频繁抽搐以及有严重意识障碍，亦有循环、呼吸系统受累症状。

1.3 检测方法

各组患儿入院后2 h 内（未进行治疗前）抽取静脉血送检。采用免疫比浊法、HITACHI7600 全自动特定蛋白分析仪检测IgM、IgG、IgA 等体液免疫功能，试剂从ORION DIAGNOSTICA 公司（芬兰）选购，采用BD FACSCalihur 型号的流式细胞仪（FCM）检测CD3+、CD4+、CD8+等细胞免疫功能指标，取肝素抗凝新鲜全血1 mL,然后再50 μL 的样品试管中分别加入10 μL 剂量的相应单克隆抗体，充分混匀后室温避光放置15 min，采用PACS 做溶血，FCM 分>10 000 个细胞，仪器和试剂购自BD Biosciences公司（美国）。

表1 HFMD 患儿与健康对照组各免疫指标比较（±s）

表1 HFMD 患儿与健康对照组各免疫指标比较（±s）

项目HFMD 患儿健康对照组t 值P 值体液免疫（g/L）IgMIgGIgA细胞免疫（%）CD3+CD4+CD8+1.76±0.34 0.77±0.29 26.81<0.05 8.27±1.63 7.18±1.68 5.71<0.05 0.59±0.19 0.45±0.22 5.96<0.05 48.19±9.21 66.29±10.05 16.23<0.05 27.71±5.19 39.09±6.01 17.73<0.05 20.63±7.73 26.77±8.74 6.50<0.05

表2 HFMD 患儿不同病情程度各免疫指标比较（±s）

表2 HFMD 患儿不同病情程度各免疫指标比较（±s）

项目轻症型组重型组危重型组F 值P 值体液免疫（g/L）IgMIgGIgA细胞免疫（%）CD3+CD4+CD8+1.39±0.35 1.71±0.35 2.07±0.33 4.36<0.05 7.38±1.68 10.72±2.21 15.69±2.55 4.01<0.05 0.53±0.38 0.63±0.31 0.92±0.33 3.52<0.05 58.48±7.86 48.93±8.15 41.33±7.94 10.35<0.05 32.09±6.01 27.41±6.49 22.28±5.495 5.89<0.05 22.77±3.34 20.21±3.52 15.71±3.11 3.78<0.05

1.4 观察指标

包括各组患儿临床一般情况、表现、病情变化、体液免疫(IgM、IgG、IgA)及细胞免疫(CD3+、CD4+、CD8+)结果，判断疾病预后。

1.5 统计方法

采用SPSS17.0 软件对数据进行统计分析，计量资料以（±s）表示，两组间采用t 值检验，3 组均数采用F 值检验。

2 结果

2.1 HFMD 患儿与健康对照组各免疫指标比较

HFMD 患儿细胞免疫（CD3+、CD4+、CD8+等T 细胞亚群）水平均显著低于健康对照组（P<0.05）；体液免疫（IgM、IgG、IgA）水平明显高于健康对照组（P<0.05），比较差异有统计学意义（P<0.05）；见表1。

2.2 HFMD 患儿不同病情程度各免疫指标比较

随着病情严重程度的加重，轻症型、重型、危重型患儿的CD3+、CD4+、CD8+水平不断降低，IgM、IgG、IgA 水平升高，3 组比较差异有统计学意义（P<0.05），见表2。

3 讨论

手足口病(HFMD)是因感染肠道2 病毒而导致的一种传染性疾病，可引发HFMD 的肠道病毒多达20 多种类型，其中以Cox-A16 及EV71 最为常见。多数患儿感染HFMD 后预后良好，有少部分重症患儿可并发脑膜炎、心肌炎以及肺水肿等并发症，个别重症患儿由于病情发展快速，抢救无效而发生死亡。有学者[5]认为HFMD 的病情转归与人体免疫功能可能存在重要相关性。

目前，临床通常采用T 细胞亚群测定来准确判断病人机体细胞免疫功能。越来越多的研究[6-7]表明，T 细胞在人体肠道病毒感染后起着重要的免疫介导作用，可释放出多种细胞因子，在机体抗感染、抗病毒感染免疫应答机制中发挥重要作用。CD4+、CD8+能够调节T 细胞的免疫功能，其中CD4+对B 淋巴细胞分化功能具有调节作用，刺激产生抗体；而CD8+对抗体合成以及分泌具有抑制作用，同时可抑制T 细胞增殖，两者的协调作用使机体免疫应答维持正常。T 细胞亚群中的CD3+表达水平代表外周血成熟T 细胞总数，CD3+可通过向T 细胞内传导TCR 双识别信号而促进T 细胞活化，分布于所有活化T 细胞表面。CD4+又称为Th 细胞，是一种辅助诱导性T 细胞亚群，CD4+上的TCR 能够识别出抗原肽-II 类分子复合物，从而参与Th2 细胞激活。CD8+是一种抑制性(Ts)以及细胞毒性(Tc)细胞亚群，可识别并结合抗原肽-II 类分子，激活细胞毒性T 细胞。CD4+与CD8+的比值能够反映出Th 与Tc 功能间的动态平衡状态，是机体免疫内环境稳定的一项最重要的监测指标，其比值下降，则表示机体免疫力下降[8]。该研究HFMD 患儿细胞免疫（CD3+、CD4+、CD8+等T细胞亚群）水平均显著低于健康对照组（P<0.05），并且CD4+下降程度高于CD8+，因此CD4+/CD8+比值降低。提示HFMD 患儿机体活化的T 淋巴细胞明显较少，免疫功能下降，病毒入浸及发病几率增大，出现了细胞免疫功能紊乱。并且表2 还显示随着病情严重程度的加重，轻症型、重型、危重型患儿的CD3+、CD4+、CD8+水平不断降低（P<0.05），说明感染HFMD 病毒后，随着病情加重，患儿细胞免疫功能进一步下降。可能是因为重症HFMD 患儿免疫应答更为强烈，在机体免疫保护、恢复疾病的同时，可能造成的免疫损伤更为严重，使部分患儿向危重症型进展。

免疫球蛋白可使体液免疫增强，IgA、IgG 能够增强巨噬及NK 细胞的免疫吞噬功能，IgA 通过经典途径还能对补体系统产生激活作用，使得机体免疫应答反应明显增强。有研究显示，HFMD 患儿体液免疫亢进，并且同病情程度存在相关相关性，重症患儿体液免疫亢进表现更为明显，可能与HFMD 患儿机体防御有关。本研究中，HFMD 患儿体液免疫（IgM、IgG、IgA）水平明显高于健康对照组（P<0.05）；提示HFMD 患儿体液免疫功能被激活，出现了强烈的免疫反应。并且随着病情严重程度的加重，轻症型、重型、危重型患儿IgM、IgG、IgA 水平不断升高，3 组比较差异有统计学意义（P<0.05）。田健美等研究报道显示轻症组和重、危重症组HFMD 患儿的IgA、IgG、IgM 水平存在明显异常；而轻症组与重、危重症组两组对比差异有统计学意义(P<0.05)；危重症组各项免疫球蛋白表达水平高于轻症组（P<0.05），与该研究结果相一致（P<0.05）。提示HFMD 患儿体液免疫指标增加要引起临床的高度重视，可能将要进一步向危重症发展，需及早进行治疗干预。

综上所述，HFMD 患儿尤其是有脑炎合并症的重症患儿会出现显著的细胞及体液免疫功能低下及调节紊乱，与疾病严重程度存在相关性。

[1]周杰林.不同病程的手足口病患儿体液免疫状况分析[J].现代实用医学,2012,24(8):883-885.

[2]熊金凤，王云芬，杨兴林，等.手足口病患儿免疫球蛋自检测结果分析[J].检验医学与临床,2012,9(7):837-838.

[3]亚敏，王春妍，宋立文，等.手足口病患儿体液免疫检测分析[J].临床和实验医学杂志，2009,8(8):73-74.

[4]胡淑琴，李娜，王绪韶，等.手足口病患儿免疫球蛋自及补体检测的临床意义[J].中国中西医结合儿科杂志，2012,4(5):433-434.

[5]李振华，周涛.手足口病患儿体液免疫功能与病情转归的关系[J].中国中西医结合儿科学,2010,2(6):510-511.

[6]田健美，李健琴，孔小行，等.144 例手足口病患儿细胞和体液免疫变化及意义[J].床儿科杂志，2011,29(12):1156-1158.

[7]刘国军,彭倩,郑雪芳,等.手足口病患儿细胞免疫水平临床分析[J].中国热带医学,2013,13(11):1413-1414.

[8]赵青,康丽敏,孙晋芳,等.560 例手足口病患儿细胞免疫的变化[J].中国医师杂志,2013,15(11):1515-1518.