松果菊苷对帕金森病大鼠纹状体及海马细胞外液中单胺类神经递质的影响

张万鑫，马婧怡，陈 虹，姜 勇，屠鹏飞，丁 慧

(1.石河子大学药学院教育部新疆特种植物药资源重点实验室，新疆石河子 832002;2.北京大学中医药现代研究中心，北京 100083)

近年来，越来越多的研究表明，管花肉苁蓉(Tubulosa Cistanchis)及其所含的多种化学成分具有神经 保 护 作 用［1－2］，其 中 松 果 菊 苷 (echinacoside，ECH)经研究证明具有明显的抗氧化［3］、抗神经元凋亡［4］、抗衰老［5］和改善学习记忆能力［6］等神经保护作用。帕金森病(Parkinson's disease，PD)是一种慢性的中枢神经系统退化性失调，脑内需要多巴胺来指挥肌肉的活动，缺乏足够的多巴胺就产生各种活动障碍，损害患者的动作技能、语言能力以及其他功能。以往研究仅对给予药物ECH后PD大鼠纹状体细胞外液中DA、DOPAC、HVA含量的变化做出检测［7］，本研究在此基础上，除对纹状体中多种单胺类物质进行检测外，也对海马细胞外液中的5种单胺类物质进行检测，旨在进一步探讨ECH对PD大鼠脑神经保护作用的可能机制。

1 材料与方法

1.1 药物和试剂 水合氯醛(天津市福晨化学试剂厂);磷酸锌水门汀(上海医疗器械股份有限公司产品，由液体和粉剂组成);ECH由北京大学药学院屠鹏飞教授惠赠(纯度95%以上);美多巴(ROCHE公司);6-羟基多巴胺(6-OHDA)、多巴胺(DA)、3，4-二羟基苯乙酸(DOPAC)、高香草酸(HVA)、去甲肾上腺素(NE)、5-羟色胺(5-HT)(均为Sigma公司);一水合柠檬酸(天津市津科精细化工研究所);柠檬酸三钠(Acros公司);乙二胺四乙酸二钠(JTBaker Chemical co);八烷基硫酸钠(Sigma公司);甲醇(DIKMA公司);乙腈(DIKMA公司);脑微透析灌流液为复方氯化钠注射液(北京双鹤药业股份有限公司)。

1.2 仪器 美国BAS4100型大鼠脑立体定位仪;CMA/12探针及探针套管;CMA/120清醒动物装置;CMA/402微量泵;CMA/150低温样品自动收集器;岛津LC-20AB输液泵;岛津CTO-10ASVP柱温箱;ANTEC DECAED2SDC电化学检测器;玻璃碳工作电极和Ag/AgCl参考电极;C18色谱柱(Waters公司，ODS 5 μm，250 mm ×4.6 mm);岛津色谱工作站(Esa公司)。

1.3 实验动物分组及模型制备 清洁级♂ SD大鼠，体质量250～300g，购于新疆实验动物中心，许可证编号:SCXK(新)2011－0002。随机分为对照组(Control)、模型组(Model)、ECH高剂量组(ECHH)、ECH中剂量组(ECHM)、ECH低剂量组(ECHL)和阳性药美多巴组(MD)，每组8只。以质量分数为10%的水合氯醛(3.5 ml·kg－1)将大鼠麻醉后固定在定位仪上，颅顶皮肤脱毛，暴露出大鼠顶盖，参照George Paxinos《大鼠脑立体定位图谱》，利用三维立体定位技术，以前囟为基点，定位坐标为①AP:－0.2 mm;ML:+3.0 mm;DV:－4.5 mm。②AP:－0.2 mm;ML:+3.0 mm;DV:－5.5 mm，除对照组外，其余各组大鼠纹状体内双点注射6-OHDA，每点注射4 μl(3 g·L－1)，对照组注射等量的维C生理盐水，缝合皮肤切口。

1.4 术后给药及微透析 于PD大鼠模型制作完毕后7 d，各组大鼠腹腔注射相应的药物或生理盐水，每天1次，连续4周。其中对照组和模型组分别给予等量质量分数为0.9%氯化钠注射液1 ml·kg－1;ECH 高、中、低剂量组分别给予 ECH 40、20、10 mg·kg－1;阳性药组给予 MD 4.5 mg·kg－1。给药结束后，依次以质量分数为10%的水合氯醛(3.5 ml·kg－1)麻醉大鼠，将套管植入大鼠右侧纹状体及海马中，定位坐标为① 纹状体:AP:－0.2 mm;ML:+3.0 mm;DV:－4.5 mm，② 海马:AP:+3.5 mm;ML:+2.0 mm;DV:－3.0 mm，待大鼠清醒后在其自由活动状态下插入微透析探针，用Ringer液以1.5 μl·min－1的速度同时灌流，每20 min 收集1 管透析液，每管透析液收集完毕后均立即置于－20℃冰箱保存，并在透析结束后转存至－70℃冰箱，择日测定。本实验中的 DA、DOPAC、HVA、NE、5-HT探针回收率分别为 49.89%、35.63%、28.42%、45.17%、24.22%。

1.5 HPLC-ECD分析 测定流动相每升含一水合柠檬酸15 g、柠檬酸三钠20.2 g、Na2EDTA 0.036 g、八烷基磺酸钠0.18 g、甲醇100 ml。清洗流动相为甲醇∶水(40∶60V/V)。设定流动相流速为1.0 ml·min－1，柱温箱温度40℃，电化学检测器工作电压750 mV，增益为2nA，进样量为 20 μl。标准曲线用12.5、25、50、100、250、500、1 000 μg·L－1的含 DA、DOPAC、HVA、NE、5-HT的混合标准溶液绘制。

2 结果

2.1 ECH对PD大鼠纹状体及海马细胞外液中DA含量的影响 由Tab 1、2可知:整个灌流期内，模型组大鼠的纹状体及海马细胞外液中DA含量均明显低于对照组(P＜0.01)，说明模型成功。与模型组比较，各给药组DA含量均有不同程度的升高(P＜0.05，P＜0.01)。

2.2 ECH对PD大鼠纹状体及海马细胞外液中DOPAC含量的影响 由Tab 3、4可知:整个灌流期内，模型组大鼠的纹状体及海马细胞外液中DOPAC

含量均明显低于对照组(P＜0.01)，这一结果间接说明模型成功。与模型组比较，各给药组DOPAC含量均有不同程度的升高(P＜0.05，P＜0.01)。

Tab 1Effects of echinacoside on striatal extracellular fluid of DA in Parkinson's disease rats(±s，n=8)

Tab 1Effects of echinacoside on striatal extracellular fluid of DA in Parkinson's disease rats(±s，n=8)

＊＊P ＜0.01 vs control group;△P ＜0.05，△△P ＜0.01 vs model group.

Perfusion time/min Content of DA in striatal extracellular fluid/μmol·L －1 Control Model ECHH ECHM ECHL MD 20 5.33 ±0.69 2.50 ±0.46＊＊ 5.01 ±0.28△ 4.85 ±0.86△ 4.81 ±0.59△ 5.11 ±0.82△△40 6.42 ±0.70 3.01 ±0.41＊＊ 5.83 ±0.68△△ 5.04 ±0.70△ 4.75 ±0.52△ 5.62 ±0.54△△60 8.56 ±0.63 4.03 ±0.54＊＊ 7.05 ±0.49△ 7.77 ±0.52△△ 7.01 ±0.26△ 8.25 ±0.69△△80 9.59 ±0.49 4.49 ±0.34＊＊ 8.55 ±0.63△△ 8.01 ±0.58△△ 7.36 ±0.47△ 8.36 ±0.51△△100 10.65 ±0.52 4.96 ±0.37＊＊ 9.58 ±0.58△△ 8.95 ±0.61△ 8.24 ±0.71△ 9.68 ±0.64△△120 11.56 ±0.49 5.41 ±0.44＊＊ 10.38 ±0.64△△ 9.82 ±0.35△ 8.95 ±0.69△ 10.29 ±0.58△△140 10.58 ±0.58 4.95 ±0.38＊＊ 9.34 ±0.52△ 8.62 ±0.67△ 7.79 ±0.48△ 9.87 ±0.35△△160 9.64 ±0.52 4.52 ±0.43＊＊ 9.05 ±0.69△△ 9.31 ±0.32△△ 8.96 ±0.44△ 8.86 ±0.38△△180 8.62 ±0.64 4.04 ±0.29＊＊ 8.25 ±0.56△△ 8.84 ±0.48△△ 7.92 ±0.39△ 8.31 ±0.47△△200 7.59 ±0.60 3.56 ±0.47＊＊ 7.06 ±0.60△△ 6.52 ±0.51△ 5.49 ±0.85△ 7.38 ±0.39△△

Tab 2 Effects of echinacoside on hippocampus extracellular fluid of DA in Parkinson's disease rats(±s，n=8)

Tab 2 Effects of echinacoside on hippocampus extracellular fluid of DA in Parkinson's disease rats(±s，n=8)

＊＊P ＜0.01 vs control group;△P ＜0.05，△△P ＜0.01 vs model group.

Perfusion time/min Content of DA in hippocampus extracellular fluid/μmol·L －1 Control Model ECHH ECHM ECHL MD 20 5.81 ±0.55 2.88 ±0.32＊＊ 5.50 ±0.35△ 5.36 ±0.67△ 5.25 ±0.43△ 5.59 ±0.43△△40 6.98 ±0.61 3.53 ±0.51＊＊ 6.35 ±0.56△△ 5.57 ±0.51△ 5.20 ±0.32△ 6.21 ±0.56△△60 9.03 ±0.56 4.52 ±0.47＊＊ 7.53 ±0.31△ 7.19 ±0.48△ 7.47 ±0.28△ 8.76 ±0.58△△80 9.94 ±0.62 4.91 ±0.35＊＊ 9.11 ±0.47△△ 8.50 ±0.39△ 7.88 ±0.56△ 8.84 ±0.44△△100 11.12 ±0.49 5.40 ±0.46＊＊ 10.29 ±0.53△△ 9.42 ±0.35△ 8.69 ±0.53△ 10.20 ±0.37△△120 12.15 ±0.51 5.92 ±0.54＊＊ 10.87 ±0.57△△ 10.15 ±0.42△ 9.34 ±0.37△ 10.72 ±0.52△△140 11.16 ±0.45 5.32 ±0.40＊＊ 9.90 ±0.44△△ 9.11 ±0.56△ 8.27 ±0.42△ 10.31 ±0.31△△160 10.09 ±0.59 4.91 ±0.39＊＊ 9.48 ±0.59△△ 9.04 ±0.50△△ 9.05 ±0.38△ 8.96 ±0.38△△180 9.09 ±0.63 4.39 ±0.35＊＊ 8.79 ±0.43△△ 7.77 ±0.44△ 8.21 ±0.29△ 8.73 ±0.55△△200 8.23 ±0.57 3.98 ±0.41＊＊ 7.58 ±0.52△△ 6.89 ±0.39△ 5.98 ±0.35△ 7.96 ±0.36△△

Tab 3Effects of echinacoside on striatal extracellular fluid of DOPAC in Parkinson's disease rats(±s，n=8)

Tab 3Effects of echinacoside on striatal extracellular fluid of DOPAC in Parkinson's disease rats(±s，n=8)

＊＊P＜0.01 vs control group;△P＜0.05，△△P＜0.01 vs model group.

Perfusion time/min Content of DOPAC in striatal extracellular fluid/μmol·L －1 Control Model ECHH ECHM ECHL MD 20 14.83 ±1.27 6.73 ±0.58＊＊ 11.75 ±0.86△△ 10.58 ±1.12△ 8.87 ±0.87△ 12.14 ±0.69△△40 15.44 ±1.11 7.15 ±0.61＊＊ 12.57 ±1.05△△ 13.21 ±0.98△△ 10.58 ±0.69△ 12.21 ±0.52△△60 16.01 ±1.01 7.60 ±0.55＊＊ 14.23 ±0.89△△ 14.14 ±1.25△△ 12.51 ±0.92△ 13.89 ±1.05△△80 16.70 ±0.91 7.97 ±0.44＊＊ 14.46 ±1.21△△ 14.68 ±0.87△△ 12.21 ±1.02△ 14.21 ±0.65△△100 17.27 ±0.93 8.42 ±0.26＊＊ 14.66 ±0.96△ 15.21 ±1.04△△ 13.38 ±0.85△ 15.38 ±0.96△△120 17.92 ±0.85 8.80 ±0.85＊＊ 15.12 ±1.03△△ 14.96 ±0.79△ 13.89 ±0.77△ 15.35 ±0.57△△140 17.29 ±0.94 8.44 ±0.30＊＊ 14.38 ±0.87△ 14.21 ±0.96△ 11.52 ±1.06△ 15.04 ±1.01△△160 16.72 ±0.85 7.98 ±0.29＊＊ 14.26 ±0.97△△ 13.86 ±0.91△ 12.15 ±0.94△ 14.38 ±0.99△△180 15.95 ±0.85 7.61 ±0.40＊＊ 13.86 ±1.05△△ 13.51 ±1.08△ 10.26 ±0.38△ 14.01 ±0.85△△200 15.24 ±1.03 7.16 ±0.48＊＊ 13.25 ±1.01△△ 12.48 ±0.85△ 11.14 ±0.52△ 13.16 ±1.08△△

Tab 4 Effects of echinacoside on hippocampus extracellular fluid of DOPAC in Parkinson's disease rats(±s，n=8)

Tab 4 Effects of echinacoside on hippocampus extracellular fluid of DOPAC in Parkinson's disease rats(±s，n=8)

＊＊P＜0.01 vs control group;△P＜0.05，△△P＜0.01 vs model group.

Perfusion time/min Content of DOPAC in hippocampus extracellular fluid/μmol·L －1 Control Model ECHH ECHM ECHL MD 20 15.89 ±1.02 7.78 ±0.99＊＊ 12.95 ±0.55△ 11.68 ±0.69△ 9.65 ±1.01△ 13.57 ±0.94△△40 16.43 ±0.97 8.11 ±1.02＊＊ 13.68 ±1.12△△ 13.27 ±1.01△△ 11.35 ±0.89△ 13.68 ±0.85△△60 17.10 ±1.15 8.59 ±0.75＊＊ 15.24 ±0.69△△ 14.15 ±0.95△ 13.27 ±0.72△ 15.31 ±0.68△△80 17.94 ±0.89 9.03 ±0.89＊＊ 15.73 ±0.73△△ 15.90 ±0.83△△ 13.30 ±1.03△ 15.52 ±1.04△△100 18.46 ±0.87 9.37 ±0.52＊＊ 15.87 ±1.01△ 16.23 ±0.59△ 14.16 ±0.69△ 16.61 ±0.83△△120 19.11 ±1.20 9.69 ±1.13＊＊ 16.23 ±0.84△△ 16.07 ±1.02△ 14.69 ±1.02△ 16.59 ±0.77△△140 18.52 ±0.82 9.32 ±0.68＊＊ 15.51 ±0.90△ 15.30 ±0.74△ 13.34 ±1.18△ 16.34 ±0.63△△160 17.79 ±1.01 8.90 ±1.06＊＊ 15.43 ±1.05△△ 15.05 ±0.63△ 13.06 ±0.99△ 15.65 ±1.10△△180 17.12 ±0.97 8.48 ±0.75＊＊ 14.98 ±0.73△ 14.71 ±0.81△ 12.84 ±0.84△ 15.31 ±0.79△△200 16.40 ±0.73 8.07 ±0.94＊＊ 14.37 ±0.83△△ 13.88 ±0.97△ 12.01 ±1.05△ 14.48 ±0.92△△

2.3 ECH对PD大鼠纹状体及海马细胞外液中HVA含量的影响 由Tab 5、6可知:整个灌流期内，模型组大鼠的纹状体及海马细胞外液中HVA含量均明显低于对照组(P＜0.01)，这一结果也间接说明模型成功。与模型组比较，各给药组HVA含量均有不同程度的升高(P＜0.05，P＜0.01)。

2.4 ECH对PD大鼠纹状体及海马细胞外液中NE含量的影响 由Tab 7、8可知:整个灌流期内，模型组大鼠的纹状体及海马细胞外液中NE含量均明显低于对照组(P＜0.01)，说明模型成功。与模型组比较，各给药组NE含量均有不同程度的升高(P＜0.05，P＜0.01)。

2.5 ECH对PD大鼠纹状体及海马细胞外液中5-HT含量的影响 由Tab 9、10可知:整个灌流期内，模型组大鼠的纹状体及海马细胞外液中5-HT含量均明显低于对照组(P＜0.01)，说明模型成功。与模型组比较，各给药组5-HT含量均有不同程度的升高(P＜0.05，P＜0.01)。

Tab 5Effects of echinacoside on striatal extracellular fluid of HVA in Parkinson's disease rats(±s，n=8)

Tab 5Effects of echinacoside on striatal extracellular fluid of HVA in Parkinson's disease rats(±s，n=8)

＊＊P＜0.01 vs control group;△P＜0.05，△△P＜0.01 vs model group.

Perfusion time/min Content of HVA in striatal extracellular fluid/μmol·L －1 Control Model ECHH ECHM ECHL MD 20 14.34 ±0.48 6.83 ±0.21＊＊ 11.26 ±0.51△△ 9.87 ±0.26△ 8.52 ±0.31△ 11.52 ±0.41△△40 14.74 ±0.46 7.04 ±0.22＊＊ 11.58 ±0.65△△ 10.08 ±0.31△ 8.69 ±0.58△ 11.61 ±0.59△△60 15.16 ±0.46 7.23 ±0.19＊＊ 12.35 ±0.39△△ 10.16 ±0.46△ 8.58 ±0.43△ 12.26 ±0.19△△80 15.56 ±0.42 7.24 ±0.19＊＊ 12.68 ±0.84△△ 12.35 ±0.69△ 9.87 ±0.62△ 12.75 ±0.57△△100 16.00 ±0.41 7.35 ±0.24＊＊ 13.41 ±0.57△△ 11.14 ±0.38△ 10.29 ±0.57△ 13.58 ±0.52△△120 16.35 ±0.38 7.81 ±0.14＊＊ 13.62 ±0.52△△ 11.19 ±0.52△ 9.97 ±0.36△ 13.49 ±0.73△△140 15.95 ±0.45 7.60 ±0.21＊＊ 13.01 ±0.14△ 10.95 ±0.28△ 9.85 ±0.62△ 13.69 ±0.54△△160 15.53 ±0.52 7.39 ±0.26＊＊ 12.69 ±0.38△△ 10.39 ±0.47△ 9.29 ±0.68△ 12.57 ±0.38△△180 15.15 ±0.52 7.18 ±0.18＊＊ 11.96 ±0.59△△ 10.09 ±0.46△ 8.89 ±0.75△ 11.59 ±0.19△△200 14.76 ±0.58 7.07 ±0.23＊＊ 11.39 ±0.24△△ 9.89 ±0.25△ 8.96 ±0.54△ 10.69 ±0.24△△

Tab 6Effects of echinacoside on hippocampus extracellular fluid of HVA in Parkinson's disease rats(±s，n=8)

Tab 6Effects of echinacoside on hippocampus extracellular fluid of HVA in Parkinson's disease rats(±s，n=8)

＊＊P＜0.01 vs control group;△P＜0.05，△△P＜0.01 vs model group.

Perfusion time/min Content of HVA in hippocampus extracellular fluid/μmol·L －1 Control Model ECHH ECHM ECHL MD 20 15.41 ±0.42 7.67 ±0.39＊＊ 12.45 ±0.55△△ 11.08 ±0.69△ 9.45 ±0.45△ 12.77 ±0.44△△40 15.83 ±0.56 7.90 ±0.42＊＊ 12.88 ±0.42△△ 11.27 ±0.51△ 9.56 ±0.39△ 12.98 ±0.27△△60 16.28 ±0.73 8.12 ±0.55＊＊ 13.64 ±0.69△△ 11.35 ±0.42△ 9.52 ±0.56△ 13.41 ±0.51△△80 16.70 ±0.48 8.15 ±0.59＊＊ 13.93 ±0.23△△ 13.49 ±0.43△△ 10.70 ±0.33△ 14.11 ±0.32△△100 17.04 ±0.33 8.20 ±0.62＊＊ 14.67 ±0.51△△ 12.23 ±0.62△ 11.19 ±0.69△ 14.86 ±0.62△△120 17.54 ±0.41 8.56 ±0.63＊＊ 14.93 ±0.44△△ 12.37 ±0.27△ 10.86 ±0.51△ 14.71 ±0.36△△140 17.10 ±0.56 8.43 ±0.38＊＊ 14.52 ±0.30△△ 12.10 ±0.34△ 10.72 ±0.29△ 14.98 ±0.69△△160 16.73 ±0.62 8.21 ±0.46＊＊ 13.93 ±0.55△△ 11.44 ±0.48△ 10.17 ±0.39△ 13.84 ±0.53△△180 16.32 ±0.28 8.08 ±0.55＊＊ 13.28 ±0.23△△ 11.19 ±0.35△ 9.78 ±0.14△ 12.88 ±0.44△△200 15.89 ±0.37 7.90 ±0.54＊＊ 12.57 ±0.53△△ 10.98 ±0.56△ 9.69 ±0.54△ 12.89 ±0.29△△

Tab 7Effects of echinacoside on striatal extracellular fluid of NE in Parkinson's disease rats(±s，n=8)

Tab 7Effects of echinacoside on striatal extracellular fluid of NE in Parkinson's disease rats(±s，n=8)

＊＊P ＜0.01 vs control group;△P ＜0.05，△△P ＜0.01 vs model group.

Perfusion time/min Content of NE in striatal extracellular fluid/μmol·L －1 Control Model ECHH ECHM ECHL MD 20 22.26 ±0.26 10.56 ±0.35＊＊ 19.86 ±0.48△△ 17.36 ±0.57△ 16.98 ±0.26△ 20.36 ±0.25△△40 24.35 ±0.37 10.94 ±0.27＊＊ 20.27 ±0.37△ 18.15 ±0.28△ 18.05 ±0.55△ 20.59 ±0.61△△60 24.98 ±0.49 11.05 ±0.39＊＊ 21.42 ±0.26△△ 18.49 ±0.35△ 18.31 ±0.52△ 21.24 ±0.33△△80 25.66 ±0.51 11.31 ±0.47＊＊ 21.68 ±0.54△△ 19.11 ±0.44△ 19.06 ±0.32△ 21.39 ±0.56△△100 26.04 ±0.44 11.42 ±0.36＊＊ 22.31 ±0.67△△ 20.24 ±0.43△ 19.98 ±0.61△ 22.58 ±0.45△△120 26.28 ±0.39 11.78 ±0.52＊＊ 22.62 ±0.37△△ 19.92 ±0.43△ 19.57 ±0.43△ 22.46 ±0.68△△140 25.77 ±0.41 11.59 ±0.25＊＊ 23.01 ±0.28△△ 20.35 ±0.61△ 19.99 ±0.58△ 22.97 ±0.34△△160 25.39 ±0.56 11.27 ±0.71＊＊ 22.64 ±0.46△△ 20.26 ±0.51△ 19.34 ±0.71△ 22.69 ±0.29△△180 25.02 ±0.71 11.04 ±0.44＊＊ 20.73 ±0.57△△ 19.91 ±0.48△ 18.75 ±0.58△ 20.61 ±0.35△△200 24.45 ±0.38 10.88 ±0.35＊＊ 20.20 ±0.29△ 19.67 ±0.36△ 18.59 ±0.61△ 20.34 ±0.55△△

Tab 8Effects of echinacoside on hippocampus extracellular fluid of NE in Parkinson's disease rats(±s，n=8)

Tab 8Effects of echinacoside on hippocampus extracellular fluid of NE in Parkinson's disease rats(±s，n=8)

＊＊P ＜0.01 vs control group;△P ＜0.05，△△P ＜0.01 vs model group.

ime Content of NE in hippocampus extracellular fluid/μmol·L －1 Perfusion t/min Control Model ECHH ECHM ECHL MD 20 23.89 ±0.35 11.76 ±0.41＊＊ 21.40 ±0.45△△ 18.91 ±0.25△ 18.41 ±0.31△ 21.97 ±0.27△△40 25.93 ±0.46 11.99 ±0.52＊＊ 21.77 ±0.27△ 19.69 ±0.26△ 19.44 ±0.27△ 22.24 ±0.38△△60 26.62 ±0.42 12.13 ±0.67＊＊ 22.97 ±0.36△△ 20.10 ±0.36△ 19.76 ±0.37△ 22.96 ±0.55△△80 27.41 ±0.58 12.37 ±0.29＊＊ 23.19 ±0.51△△ 20.64 ±0.31△ 20.70 ±0.42△ 23.13 ±0.49△△100 27.60 ±0.41 12.48 ±0.36＊＊ 23.84 ±0.28△ 21.73 ±0.51△ 21.51 ±0.57△ 24.21 ±0.52△△120 27.94 ±0.39 12.88 ±0.48＊＊ 24.15 ±0.32△△ 21.45 ±0.44△ 21.03 ±0.26△ 24.16 ±0.54△△140 27.40 ±0.51 12.67 ±0.35＊＊ 24.65 ±0.35△△ 21.78 ±0.46△ 21.39 ±0.31△ 24.56 ±0.37△△160 26.93 ±0.47 12.29 ±0.26＊＊ 24.21 ±0.24△ 21.79 ±0.29△ 20.77 ±0.44△ 24.36 ±0.57△△180 26.58 ±0.33 12.13 ±0.19＊＊ 22.32 ±0.47△△ 21.50 ±0.32△ 20.12 ±0.57△ 22.20 ±0.38△△200 25.99 ±0.40 11.90 ±0.22＊＊ 21.74 ±0.59△△ 21.23 ±0.43△ 20.01 ±0.29△ 21.94 ±0.33△△

Tab 9 Effects of echinacoside on striatal extracellular fluid of 5-HT in Parkinson's disease rats(±s，n=8)

Tab 9 Effects of echinacoside on striatal extracellular fluid of 5-HT in Parkinson's disease rats(±s，n=8)

＊＊P ＜0.01 vs control group;△P ＜0.05，△△P ＜0.01 vs model group.

Perfusion time/min Content of 5-HT in striatal extracellular fluid/μmol·L －1 Control Model ECHH ECHM ECHL MD 20 8.35 ±0.26 4.28 ±0.43＊＊ 6.58 ±0.37△△ 5.87 ±0.27△ 5.24 ±0.31△ 6.47 ±0.87△△40 8.86 ±0.37 3.96 ±0.38＊＊ 6.95 ±0.31△ 6.03 ±0.37△ 5.67 ±0.47△ 6.89 ±0.92△△60 9.49 ±0.49 4.18 ±0.25＊＊ 7.31 ±0.41△△ 6.34 ±0.42△ 6.15 ±0.38△ 7.42 ±0.48△△80 10.31 ±0.51 4.55 ±0.53＊＊ 7.59 ±0.45△△ 6.86 ±0.51△ 6.74 ±0.52△ 7.66 ±0.62△△100 11.05 ±0.44 5.26 ±0.47＊＊ 7.98 ±0.54△△ 7.21 ±0.62△ 7.01 ±0.63△ 7.95 ±0.53△△120 11.28 ±0.39 5.86 ±0.61＊＊ 8.53 ±0.35△ 7.63 ±0.74△ 7.34 ±0.72△ 8.65 ±0.74△△140 10.82 ±0.41 5.11 ±0.72＊＊ 8.04 ±0.36△△ 7.52 ±0.48△ 7.33 ±0.69△ 8.06 ±0.28△△160 10.43 ±0.56 4.48 ±0.74＊＊ 7.58 ±0.72△△ 7.09 ±0.54△ 6.86 ±0.58△ 7.71 ±0.54△△180 10.01 ±0.71 4.01 ±0.38＊＊ 7.11 ±0.59△△ 6.85 ±0.43△ 6.41 ±0.69△ 7.30 ±0.37△△200 9.36 ±0.38 3.97 ±0.45＊＊ 6.87 ±0.44△△ 6.52 ±0.63△△ 5.95 ±0.74△ 6.94 ±0.46△△

Tab 10Effects of echinacoside on hippocampus extracellular fluid of 5-HT in Parkinson's disease rats(±s，n=8)

Tab 10Effects of echinacoside on hippocampus extracellular fluid of 5-HT in Parkinson's disease rats(±s，n=8)

＊＊P ＜0.01 vs control group;△P ＜0.05，△△P ＜0.01 vs model group.

Perfusion time/min Content of 5-HT in hippocampus extracellular fluid/μmol·L －1 Control Model ECHH ECHM ECHL MD 20 9.16 ±0.45 4.92 ±0.25＊＊ 7.47 ±0.34△△ 6.69 ±0.31△△ 6.00 ±0.22△ 7.33 ±0.35△△40 9.72 ±0.37 4.88 ±0.18＊＊ 7.94 ±0.25△△ 6.88 ±0.46△ 6.51 ±0.35△ 7.96 ±0.54△△60 10.31 ±0.54 4.93 ±0.33＊＊ 8.53 ±0.27△△ 7.21 ±0.50△ 6.87 ±0.41△ 8.36 ±0.27△△80 11.29 ±0.61 5.45 ±0.28＊＊ 8.51 ±0.56△△ 7.69 ±0.28△ 7.44 ±0.42△ 8.60 ±0.38△△100 11.70 ±0.36 6.04 ±0.46＊＊ 8.90 ±0.62△△ 8.10 ±0.43△ 7.65 ±0.36△ 8.93 ±0.46△△120 12.15 ±0.42 6.72 ±0.35＊＊ 9.51 ±0.47△△ 8.57 ±0.24△ 8.21 ±0.43△ 9.62 ±0.51△△140 11.76 ±0.54 5.73 ±0.29＊＊ 8.99 ±0.44△△ 8.35 ±0.31△ 8.19 ±0.35△ 9.03 ±0.37△△160 11.32 ±0.33 5.30 ±0.17＊＊ 8.53 ±0.27△△ 7.92 ±0.25△ 7.59 ±0.19△ 8.75 ±0.25△△180 10.90 ±0.51 4.65 ±0.27＊＊ 8.02 ±0.38△△ 7.63 ±0.36△△ 7.15 ±0.27△ 8.34 ±0.36△△200 10.17 ±0.47 4.31 ±0.32＊＊ 7.81 ±0.30△△ 7.29 ±0.22△ 6.79 ±0.30△ 7.94 ±0.42△△

3 讨论

研究表明，PD的病变主要发生在黑质和纹状体，多巴胺能神经元丧失，导致纹状体内乙酰胆碱－多巴胺两种递质失去平衡而发病［8］，从而导致PD大鼠出现静止性震颤、肌强直、运动徐缓、姿势反射减少、甚至会出现明显的学习记忆障碍，并发痴呆等。由于大脑海马区主要负责学习和记忆，因此本实验旨在研究PD的形成是否还与海马细胞外液神经递质的变化有关，进一步探讨ECH治疗PD大鼠的可能机制。

从以上结果可以看出，在整个灌流期内，模型组大鼠纹状体及海马细胞外液中各时间点的5种神经递质含量均明显低于对照组(P＜0.01)，说明模型成功且可靠，PD大鼠除纹状体外，海马内这5种递质的含量也有明显的变化。而与模型组比较，ECH高、中、低剂量组和阳性药MD组各时间点5种递质的含量均有不同程度的升高(P＜0.05，P＜0.01)，其中ECH高剂量组与阳性药MD组相差不大，个别存在一定误差，可能是因为存在个体差异，以及个体对药物的耐受程度不同。

综上，ECH对PD大鼠纹状体及海马细胞外液中的单胺类神经递质的含量减少具有改善作用，对于PD具有一定的治疗作用，这是ECH对PD大鼠脑神经保护作用的可能机制之一。

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