灸法治疗类风湿关节炎动物实验研究进展

王婕　尚秀葵

摘要：目的研究灸法治疗类风湿关节炎动物实验研究的最新进展。方法从神经-免疫-内分泌网络、细胞因子、蛋白、信号分子的调控及镇痛和抗炎免疫作用等6个方面对自2008年至今灸法治疗类风湿性关节炎的动物实验研究进行总结论述。结论通过以上总结提出问题并在此基础上对今后动物实验的研究方向和研究思路进行展望。

关键词：类风湿关节炎；灸法；动物实验

中图分类号：R593文献标志码：A文章编号：1007-2349（2014）05-0084-03

类风湿关节炎（Rheumatoid Arthritis，RA）是以类风湿致病因子侵犯关节和周围组织为主的一种慢性全身性自身免疫性疾病[1]，属于中医“痹证”范畴。现代医学研究中医药治疗类风湿性关节炎具有良好的前景，为广泛运用艾灸有效治疗关节炎，探讨其作用机制研究，现将近几年来有关艾灸对类风湿性关节炎的动物实验研究按其作用机制综述如下。

1神经-免疫-内分泌网络的调整

灸法是通过神经-免疫-内分泌调节网络来调整内分泌系统的功能[2]。周海燕[3]研究艾灸肾俞、足三里穴对RA大鼠炎症的影响，发现艾灸能明显抑制实验性RA大鼠的炎症反应，调控RA大鼠CRH、ACTH、GC的异常水平，但在腹腔注射GR激动剂后这些作用均消失，提示GR激动剂在艾灸的抗炎作用及其对神经-免疫-内分泌调节网络的调整中具有重要地位和作用。

2镇痛作用

方若仪等[4]观察温和灸对实验性关节炎大鼠足趾肿胀及痛阈的影响，发现艾灸组大鼠的机械痛阈明显高于模型组，且艾灸组的热疼痛潜伏期较长，表明温和灸能显著提高实验性关节炎大鼠的机械痛阈，且有一定的镇痛作用。郑保主[5]研究发现艾灸能提高大鼠下丘脑POMC mRNA和PDYN mRNA的表达，增强机体的镇痛能力，从而起到提高压痛阈的效果，以此证明艾灸具有镇痛作用。

3对细胞因子的调节作用

目前细胞因子已对关节炎症和关节损伤具有重要的作用[6]。高骏等[7]发现艾灸肾俞和足三里可以抑制Th1致炎因子且促进Th2抗炎因子分泌，发挥艾灸的整体调节及双向良性调整作用，调整Th1/Th2细胞因子失衡，可以从从整体上治疗类风湿关节炎，恢复RA过程中的致炎因子与抑炎因子失衡。并且研究[8]艾灸肾俞、足三里可能通过下调血清褪黑激素水平，促进抗炎因子IL-4分泌，调节Th1/Th2细胞因子平衡，从而发挥抗炎作用，对缓解RA慢性病程以及RA预后都可能起到积极的治疗意义。罗磊等[9]观察艾灸肾俞、足三里对类风湿关节炎模型大鼠跖关节中细胞因子的影响，证明艾灸具有降低局部跖关节中促炎症细胞因子IL-1β和TNF-α，提高T细胞生长因子IL-2的效应，可良性调整Th1/Th2平衡，纠正细胞免疫紊乱。刘明雪等[10]研究艾灸对佐剂性关节炎大鼠血清TNF-α、IFN-γ的影响差异，TNF-α是一种主要由单核细胞和巨噬细胞产生的单核因子，IFN-γ又称免疫干扰素，IFN-γ对关节肿胀、晨僵改善明显，因此，降低TNF-α水平、升高IFN-γ是治疗类风湿关节炎获效环节之一，且证明艾灸降低TNF-α水平和升高IFN-γ水平作用更为显著。周峰等[11]通过观察艾灸对类风湿关节炎模型大鼠血清及滑膜组织细胞间黏附分子-1（ICAM-1）的影响，与模型组相比，艾灸可降低类风湿关节炎大鼠血清中ICAM-1含量，可使滑膜组织中ICAM-1表达显著降低，从而抑制炎性细胞的浸润、黏附、跨内皮移动，使滑膜炎症逐渐好转，关节肿胀、关节僵硬等症状得到缓解。杨涵淇等[12]研究发现不同灸法治疗类风湿关节炎有明显的抗炎效应，且以隔姜灸作用最为显著；不同灸法抑制IL-1、TNF-α炎性反应因子表达可能是其发挥抗炎效应的重要机制之一。

4对蛋白的调节作用

魏铮等[13]对实验性类风湿关节炎大鼠艾灸治疗后，滑膜细胞CyclinD1和CDK4蛋白的表达降低，表明CyclinD1和CDK4可能是类风湿关节炎滑膜细胞异常增殖的关键蛋白之一。CyclinD1和CDK4蛋白的上调，使类风湿关节炎滑膜细胞内形成的CyclinD1和CDK4复合物明显增多，继而完成细胞异常增殖，而艾灸对类风湿关节炎的滑膜细胞异常增殖有抑制作用，而且可能是通过抑制CyclinD1和CDK4蛋白的过度表达而完成的。马腾等[14]观察不同灸法（温和灸和疤痕灸）对类风湿关节炎大鼠下丘脑HSP7O的表达，与模型组相比，温和灸组和瘢痕灸组可以降低下丘脑HSP70的表达，提高炎症组织HSP7O的表达，不同灸法（温和灸和瘢痕灸）抗炎效应的机制可能是灸法的温热刺激调节了中枢器官下丘脑HSP70的表达，从而激发了炎症组织HSP7O的大量表达。彭传玉等[15]观察艾灸对类风湿关节炎大鼠的治疗作用及其发生机制，发现艾灸治疗能显著改善大鼠类风湿关节炎的症状，调节关节滑膜中 Fas/FasL 蛋白的表达，使滑膜细胞逐渐凋亡，这是艾灸发挥温通作用的有效机制之一。

5对免疫功能的影响

艾灸能改善机体免疫功能是通过抗炎免疫作用达到的[16]。李建武等[17]采用隔物温和灸治疗类风湿关节炎大鼠，观察大鼠趾围变化及血清中的sIL-2R的变化，实验结果显示隔物温和灸能抑制血清中sIL-2R分泌，减轻类风湿关节炎大鼠的关节肿胀，并且隔物温和灸还能抑制类风湿关节炎大鼠血清中IL-1B、TNF-A的分泌水平，减轻类风湿关节炎大鼠足跖关节的肿胀程度。

6对信号分子的调控

高骏等[18]对下丘脑-垂体-肾上腺轴在艾灸治疗类风湿性关节炎大鼠滑膜组织核转录因子信号通路中的作用进行了相关性分析，深入探讨艾灸治疗类风湿关节炎抗炎效应的细胞信号转导发生、发展的作用机制。认为艾灸可以通过调节下丘脑-垂体-肾上腺轴的功能抑制类风湿性关节炎的发病及迁延的过程。杨馨等[19]采用基因芯片检测及生物信息分析技术观察艾灸对滑膜细胞JAK-STAT信号通路相关信号分子表达的影响，表示艾灸肾俞可明显改善实验性类风湿关节炎家兔膝关节肿胀，揭示艾灸具有明显的抗炎消肿作用。类风湿关节炎家兔造模后滑膜细胞PK通路上大量信号分子表达上调，而经艾灸肾俞治疗后，这些相关信号分子的表达均下调。说明艾灸对类风湿关节炎的滑膜细胞MAPK信号通路中相关信号分子表达具有调控作用。endprint

7展望

目前该病病因及发病机制尚不明确，纵观近年来的大量研究，类风湿关节炎的发病被认为是一个受抗原驱动的连锁反应的病理过程。炎症、细胞分子及自身的免疫反应是类风湿关节炎发生及发展的关键环节[20]。而遗传、内分泌和环境因素等则加剧了类风湿关节炎的易感性。其中免疫异常可能是主要因素。而受遗传因素的影响，机体在体内、外致病因素的反应作用下，致免疫功能平衡失调，反应亢进，产生自身抗体，激发各个血管、细胞，产生致炎性物质，引起炎症，再演变成软骨和骨质等组织损伤。西医对类风湿关节炎的诊断和治疗上针对性较强，大多要求依靠客观的理化检查指标，但是结果症状缓解、实验室指标恢复正常并不意味着病情得到控制。就此，中医可以防治疾病并注重人体自身内在机能状态的调整，还可起到预防的作用。艾灸治疗关节炎的机制研究表明，艾灸不仅可以缓解关节形态肿胀，保护软骨和骨质，同时可调节自身免疫反应，影响关节组织的肿胀、炎症与增殖，起到抗炎免疫的作用。

综上所述，艾灸治疗RA的实验研究已开展开展起来。灸法可以调整RA机体的机能活动，有很好的疗效。但仍存在诸多问题：（1）目前艾灸对于类风湿的机理研究多为温和灸或单一灸法作为干预手段的研究对象，而不同艾灸模式（如铺灸、隔物灸等）对RA的实验性研究相对较少，基于艾灸方法不同治疗实验性RA的疗效比较和作用机制尚需进一步深入细致的研究；（2）灸法可治疗多种疾病，但取效的关键与其灸时、灸量密切相关，选取方法针对不同程度的疾病能起到针对性的治疗效果，但目前这方面的研究较少，没有将灸时、灸量与疗效的关系联系在一起，尚需展开研究。（3）以上实验研究结果与临床疗效的评判仍存在一定距离，尚需将二者紧密联系起来，将动物实验与临床研究相结合，将作用机制与疗效相结合，以进一步探明灸法治疗关节炎的机理，更好地提高临床疗效。（4）艾灸对于细胞因子和蛋白等研究尚多，但目前主要是集中在其中个别的几种细胞因子及蛋白，尚不能用以说明全部的细胞因子和蛋白，所研究的个别指标也不够典型，仍需按照其分类进行多方面展开研究与探索。（5）以上研究表明灸法对神经-免疫-内分泌网络、细胞因子、蛋白、信号分子的调控及镇痛和抗炎免疫作用等方面的研究已取得一定进展，但仍需要扩展至其他各个领域加以研究，目前已有人从RNA领域探索艾灸机制，Stanczyk等[21]发现，与骨关节炎患者相比，在RA患者关节滑液及滑膜组织中miRNA-155高表达，同时RA患者滑液CD14+细胞和外周血CD14+细胞的miRNA-155的水平也升高。Nakasa等[22]报道，miRNA-146在类风湿关节炎发病中起重要的作用，研究证实miRNA-146a在类风湿关节炎关节滑膜组织中的表达主要集中在原始CD68+巨噬细胞中，也可见其存在于少量CD3+T 细胞及CD79+B细胞中。目前，已经有越来越多的研究证实miRNA异常与RA的发生密切相关，但其作用机制还不是很清楚，基于现阶段的研究，miRNA很可能作为新的诊断标志和治疗靶点应用于临床，相信miRNA将会给类风湿关节炎疾病的诊疗带来新的希望[23]。如果能从艾灸方向找到与这一新指标的相应关系，那么对灸法治疗类风湿关节炎将会有新的突破。

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（收稿日期：2014-02-24）endprint