内皮素受体对食管下括约肌的作用

张珂 刘俊峰

作者简介： 张珂（1977-），男，河北省保定市人，主治医师，博士， 【摘要】目的 研究内皮素受体对人食管下括约肌所发挥作用。方法 将30例食管癌患者手术标本制备肌条，浸于浴槽中。分别加入内皮素受体A、B亚型的拮抗剂（10-7mol/L）后，再加不同浓度的内皮素-1，观察张力变化。结果 BQ-123(F=31.3 P=0.0000)、BQ-788(F=5.6 P=0.02511)在内皮素-1（10-9、10-8、10-7、10-6mol/L）浓度下可部分拮抗收缩作用。BQ-123拮抗作用较大(F=11.5 P=0.0021)。两种肌条上拮抗效应无显著性区别(F=0.25 P=0.62)。 结论BQ-123和BQ-788均可以部分拮抗内皮素-1的收缩作用。说明内皮素受体A、B激动后肌条收缩。A亚型收缩效应大于B。两种肌条上效应无显著性区别。

【关键词】 内皮素；受体；食管下括约肌；人

【中图分类号】R722.12 【文献标识码】B【文章编号】1004-4949(2014)07-0533-02

1 研究背景

人食管下括约肌(LES)由胃大弯侧套索纤维(sling fibres)和胃小弯侧钩状纤维(clasp fibres)组成，静息状态下收缩，生理功能受体液、肌源性、神经源性因素影响。当LES出现异常导致食管运动性疾病的发生，如：贲门失驰缓症、胃食管返流病等［2］ 。

内皮素(Endothelin，ET) 被发现能收缩血管、收缩平滑肌作用，且其通过内皮素受体（ETR）发挥作用［3］。因此，探讨ETR在LES上功能可能为治疗食管疾病发现更有效的治疗方法。

2 临床资料

1．1一般资料 选2011年12月到2013年8月在河北大学附属医院食管癌手术患者40例。男性21例，女性19例，平均63岁。病理证实为食管鳞癌。未发现转移。

1．2纳入标准 标本新鲜完整，肉眼及镜下无肿瘤，残端陰性。

1．3排除标准 术前均无返酸、烧心，也无导致LES功能障碍的疾病。过敏体质者；合并心血管、肝、肾、脑疾病的患者排除。

2 材料与方法

2．1肌条制备：标本剪下食管胃结合部。剥除粘膜、粘膜下层，定位胃小弯侧的钩状纤维与位于胃大弯侧的套索纤维。沿两种肌纤维走行方向剪成2 mm× 10mm肌条。

2．2 实验方法：肌条置于含Krebs液的浴槽中（95%O2和5%CO2混合气通气）下端固定，上端系换能器上。调整张力于400mg，长度为初长度L0，再多次牵拉至L0的200％，记为最适初长度。随后实验均在此长度下进行。稳定40分钟后，先加入10-6 mol/L的卡巴胆碱(Carbachol)，产生的收缩力为参照，再洗脱。先加入拮抗剂，30分钟后再以浓度累积方式加入ET-1 (10-10、10-9、10-8、10-7、10-6 mol/L) ，加药间隔为5分钟。记录肌张力变化绘制浓度-反应曲线。

2．3统计学方法：SPSS13进行方差分析，P ＜0．05判断为有统计学意义。

3结果

表1 单独应用内皮素-1和经选择性内皮素处理后应用内皮素-1的肌条产生的收缩效应（ X±s）

组别 收缩力占卡巴胆碱1×10-9mol/L 产生的收缩力的百分比(%) 10-10 10-9 10-8 10-7 10-6单独应用ET-1 0±0 9.90±2.2 29.45±3.35 58.3±4.5 54.75±5.45+BQ-788 0±0 4.65±1.55 21.6±2.8 43.4±3.5 48.3±5.52+BQ-123 0±0 1.90±0.31 10.35±2.75 20.95±2.85 34.05±4.65图1 BQ-788和BQ-123对内皮素-1的拮抗效应有统计学差异(F=67.9 P=0.000)。

ETR选择性拮抗剂能部分拮抗激动剂的收缩效应。(F=67.9 P=0.000)。应用内皮素受体A（ETA）选择性阻滞剂BQ-123 (F=31.3 P=0.0000)和内皮素受体B（ETB）选择性阻滞剂BQ-788(F=5.6 P=0.02511)在ET-1（10-9、10-8、10-7、10-6mol/L）浓度下均可部分拮抗收缩。BQ-123拮抗作用较大(F=11.5 P=0.0021)。两种肌条上拮抗效应无显著性区别(F=0.25 P=0.62)（图表未显示）。

5讨论

ET有缩血管、收缩平滑肌的作用。ET与ETR结合发挥作用，人体内只发现ETA和B ［3］。他们有共同的信号转导通路：G蛋白受体与内皮素内多肽结合后激活磷脂酶C，水解4，5双磷酸脂酰肌醇。

通过对人LES的研究发现：ET-1可使人LES收缩。随浓度的升高达到最大收缩，两种肌条张力变化无统计学差异。ET-1的收缩效应能被BQ-123和BQ-788部分拮抗，且BQ123的拮抗作用大于BQ-788。证明ETA和ETB均诱导人LES收缩。另外ETA参与收缩效应大于ETB。两种肌条上效应无显著性区别。如根据这一研究结果，可开发出药物治疗食管动力性疾病。

参考文献

［1］ RYAN JP, SNAPE WJ JR, COHEN S. Influence of vagal cooling on esophageal function ［J］. Am J Physiol Endocrinol Metab Gastrointest Physiol, 1977, 232(3):E159-E164

［2］ 谭浩翔，李良庆，张声，等．内皮素-1与肿瘤血管生成的关系［J］．世界肿瘤杂志, 2004, 3(1):100-103

［3］ SIMONSON MS, DUNN MJ. The molecular mechanisms of cardiovascular and renal regulation by endothelin peptides ［J］. J Lab Clin Med, 1992, 11 9(1):622-639