黄精多糖对顺铂致肾损害大鼠的肾功能和抗氧化指标的影响

李超彦 周媛媛 赵克芳 王福青

(漯河医学高等专科学校生理教研室，河南 漯河 462002)

顺铂(DDP)是一种非特异性铂类抗癌药，在临床治疗中对各类肿瘤均具有较强的抑制和杀伤作用，但其细胞毒作用也是治疗过程中亟待解决的问题，其对肾脏的毒性为其主要的不良反应〔1，2〕。黄精多糖是黄精的主要有效成分，研究发现其具有一定的增强免疫力、降脂、降血糖、抗氧化作用〔3，4〕等多种药理作用；但其对DDP导致的肾功能损害是否具有保护作用却未见报道。本实验观察黄精多糖对DDP致大鼠肾功能损害的保护作用及抗氧化指标的影响。

1 材料与方法

1.1实验动物 成年健康清洁级SD大鼠48只，雌雄不限，体重160～180 g，由河南医学实验动物中心提供(合格证号医动字第410109号)。

1.2药品与试剂 黄精多糖，浓度50%，由陕西杨凌东科麦迪森制药有限公司提供。超氧化物歧化酶(SOD)、丙二醛(MDA)、谷胱甘肽过氧化酶(GSH-Px)试剂盒尿素氮(BUN)试剂盒、肌酐(Cr)试剂盒、均购自南京建成生物工程研究所。DDP冻干粉，20 mg，齐鲁制药有限公司生产，临用前0.9%氯化钠溶液配制。

1.3仪器 721-分光光度计(上海第三分析仪器厂)，超低温冰箱(美国ThermoForma702)，AU2700全自动生化分析仪(日本奥林巴斯公司)，MSE-25型高速冷冻离心机(上海科学仪器厂)。

1.4分组与给药 随机分为4组，每组12只。空白组：灌胃生理盐水3 ml/d，连续10 d；模型组：灌胃生理盐水3 ml/d，连续10 d，于第6天开始腹腔注射顺铂2 mg·kg-1·d-1，连续5 d；黄精多糖小剂量组：灌胃黄精多糖5 g·kg-1·d-1，连续10 d，于第6天开始腹腔注射顺铂2 mg·kg-1·d-1，连续5 d； ④黄精多糖大剂量组：灌胃黄精多糖20 g·kg-1·d-1，连续10 d，于第6天开始腹腔注射顺铂2 mg·kg-1·d-1，连续5 d。

1.5血清学标本制备 各组大鼠麻醉后腹主动脉取血4 ml，放置于预先加入肝素抗凝的试管内，4 ℃，3 000 r/min离心10 min后，采用全自动生化分析仪测定血清BUN及SCr含量。

1.6肾组织匀浆制备 剖腹后迅速取出大鼠肾脏，置于-40℃冰箱速冻，速冻后取出切下肾皮质，制成10%肾皮质组织匀浆，3 000 r/min离心10 min，取上清液置4 ℃冰箱备用。SOD、GSH-Px、MDA测定均严格按试剂盒说明书检测。

1.7统计学处理 采用SPSS13.0统计软件进行单因素方差分析。

2 结 果

2.1黄精多糖对血清BUN、SCr的影响 与空白组比较，模型组大鼠SCr、BUN含量均明显升高(P<0.01)；与模型组比较，各治疗组大鼠SCr、BUN含量均明显降低(P<0.05或P<0.01)，且黄精多糖大剂量组治疗效果优于小剂量组(P<0.05)。见表1。

2.2黄精多糖对肾组织匀浆SOD、GSH-Px、MDA的影响 与空白组比较，模型组大鼠肾组织匀浆中SOD、GSH-Px均明显下降(P<0.01)，MDA含量明显升高(P<0.01)；与模型组比较，各治疗组大鼠肾组织匀浆中SOD、GSH-Px均明显升高(P<0.01)，MDA含量明显下降(P<0.01)，且黄精多糖大剂量组治疗效果优于小剂量组(P<0.05)。

组别BUN (mmol/L)SCr (μmol/L)空白组8.30± 1.5179.81±13.37模型组14.62±0.811)127.02±13.301)黄精多糖小剂量组12.14±1.502)116.74±10.612)黄精多糖大剂量组10.91±3.043)4)93.56±12.633)4)

组别SOD(U/mg)MDA(nmol/mg)GSH-Px(U/mg)空白组301.30± 21.514.81±0.37291.38± 61.90模型组187.62±28.551)6.02±0.391)201.30± 41.581)黄精多糖小剂量组212.14±31.502)5.24±0.412)240.23± 30.562)黄精多糖大剂量组285.91±15.843)4)4.56±0.663)4)287.45± 55.343)4)

3 讨 论

DDP是临床上常用的抗肿瘤药物，对多种恶性肿瘤包括泌尿系统肿瘤、生殖系统及胃肠道肿瘤均有明显的杀伤作用〔2〕，但由于其剂量依赖性的细胞毒作用，尤其是急性肾脏毒性作用〔2〕，限制了其大剂量及更广泛的临床应用。DDP致肾脏毒性作用机制目前尚不明确，研究发现可能与其所致脂质过氧化反应增强有关，导致氧化代谢产物MDA的升高，细胞内代谢废物堆积，引发肾小管及肾小球细胞损伤、坏死、凋亡、导致急性肾功能障碍等一系列肾脏毒性反应〔5，6〕。因此抑制氧自由基生成，提供抗氧化功能及增加SOD等抗氧化酶类含量可能是降低DDP致肾脏毒性作用的研究方向之一。

黄精多糖是黄精主要生物学活性成分之一，近年来研究发现黄精多糖具有一定的抗氧化作用，可降低大鼠心、脑及肝脏组织中脂质过氧化产物的含量〔7〕；但其对DDP所致肾损害是否具有保护作用尚未见报道。本实验结果表明黄精多糖可保护肾功能；黄精多糖对DDP致大鼠肾功能的保护存在剂量依赖性，具体的剂量依赖关系有待于进一步实验证实。

黄精多糖能改善DDP所致大鼠肾功能损害，考虑机制可能与其抗氧化作用有关，通过降低DDP所致的细胞脂质过氧化增强能力，减轻了其对肾小球及肾小管细胞的毒性作用。黄精多糖作为外源性抗氧化物质，其增强机体内源性抗氧化能力增强的机制尚不明确；但提高肾脏组织中SOD、GSH-Px活性，降低MDA含量，可能是其保护肾脏功能的机制之一。

4 参考文献

1Gonzalez VM,Fuertes MA,Alonso C.Is cisplatin cell death always produced by apoptosis〔J〕.Mol Pharacol,2001;59(4):657-63.

2Stewart JD,Bolt HM.Cisplatin-induced nephrotoxicity〔J〕.Arch Toxicol,2012;86(8):1155-6.

3张 涛，金 英，魏晓东，等.黄精多糖对衰老小鼠肝线粒体呼吸链酶及DNA聚合酶γ表达的影响〔J〕.中国老年学杂志，2009；29(16)：2076-7.

4刘 萍.黄精多糖对老龄大鼠老化相关酶的影响〔J〕.华西医学，2010；25(7)：1259-61.

5冉志华.顺铂对表达Hsp 27基因细胞株的细胞毒影响的实验观察〔J〕.肿瘤学杂志，2001；7(2)：76-8.

6曾 健，劳 山.顺铂肾毒性机制及其防护的研究进展〔J〕.中国实用医药，2008；3(10)：194-5.

7张庭廷，夏晓凯，陈传平，等.黄精多糖的生物活性研究〔J〕.中国实验方剂学杂志，2006；2(7)：42-4.