活血化瘀类中药对链脲佐菌素诱导糖尿病大鼠各器官的影响

吴爱军 王 倩 高海梅 卢泽原 高海成

(吉林省职业病防治院，吉林 长春 130061)

糖尿病(DM)可诱发多种脏器的病变发生，如脑血管、心血管、下肢血管、眼、肾脏及神经病变等〔1〕。其治疗主要通过胰岛素、基因治疗等。中药复方制剂与单纯对抗和补充的药物干预不同，以中医理论为指导的，针对患者的证和病达到整体的调节作用〔2〕。本实验探究巴天酸模、三七、红花、生姜、冰片、菊花、川芎等中药复方制剂对链脲佐菌素(STZ)诱导糖尿病大鼠各脏器的保护作用。

1 材料与方法

1.1实验动物、主要试剂和仪器 Wistar大鼠，雄性，体质量180～200 g，购自吉林大学白求恩医学院实验动物中心(动物合格证号：2007-003)。STZ为Sigma公司产品。血糖试剂盒购自北京康化公司。巴天酸模、三七、红花、生姜、冰片、菊花、川芎(长沙博健生物科技有限公司)。

1.2中药复方制剂制备 将巴天酸模、三七、红花、生姜、冰片、菊花、川芎粉碎成粗粉(20～40目)，用10 倍量、5 倍量的水分别煎煮60、30 min，保持微沸，冷却后，离心分离，合并上清液，浓缩至1倍量体积。加入选定倍量的不同浓度乙醇，搅拌，静置，待沉降完全后，离心，取上清液。浓缩液与白醋按4∶1混合和白醋的混合液与水按1∶20配比混合制中药复方制剂。

1.3糖尿病模型复制及实验分组与给药 Wistar雄性大鼠15只，随机分为正常组、模型组和中药复方制剂组(干预)组各5只。模型组和干预组，高脂饲料喂养4 w后，腹腔注射小剂量STZ(30 mg/kg)1次，3 d后检测空腹血糖≥7.8 mmol/L作为判断模型成功的标准。干预组每天灌胃复方中药5 ml，正常组和模型组每天给予9%生理盐水灌胃4 w。每周测大鼠空腹血糖，测量体质量。

1.4组织取材和HE染色 大鼠乙醚吸入麻醉，颈部脱臼处死，迅速取出心脏、肝脏和肾脏，固定于4%的甲醛中，待HE染色使用。切片烤片1 h，二甲苯脱蜡10 min×3次，100%、95%的乙醇中分别5 min×2次，流水中2 min，苏木素染色5 min，使用1%的盐酸乙醇溶液分化5～10 s，自来水中返蓝25 min，0.5%的伊红(水溶性)染色2 min，95%、100%的乙醇脱水5 min×2次，自然晾干，二甲苯透明5 min×2次，吸水纸吸干液体，中性树胶封片，显微镜下观察染色情况。

1.5统计方法 采用SPSS19.0统计软件进行t检验。

2 结 果

2.1各组体重变化 注射STZ 1 w后，模型组体重较正常组明显减轻(P<0.05)，干预组体重较模型组显著增高(P<0.05)，见表1。

表1 各组体重比较±s,n=5,g)

2.2各组血糖检测结果 正常组血糖值为4.9～6.1 mmol/L，模型组血糖较正常组升高明显(P<0.05)；干预组血糖较模型组有所降低(P<0.05)，见表2。

表2 各组血糖比较±s,n=5,mmol/L)

2.3各组心脏组织形态学变化 正常组心肌组织横纹较清晰，细胞排列较整齐，细胞核染色明显且大小均匀；模型组心肌细胞排列紊乱，细胞间隙增大，有少量细胞肿胀；干预组心肌组织损伤程度较模型组逐渐减轻，见图1。

2.4各组肝脏组织形态学变化 正常组肝脏细胞形态正常，细胞排列较整齐；模型组肝脏组织可见少量炎性细胞浸润，肝脏出现一定程度的损伤；干预组肝脏较模型组损伤程度逐渐减轻，见图1。

2.5各组肾脏组织形态学变化 正常组肾脏细胞排列较整齐；模型组肾脏组织，肾小球体积增大，且肾小管有一定程度的扩张，肾脏出现损伤；干预组肾脏的损伤程度较模型组逐渐减轻，见图1。

图1 各组心脏、肝脏、肾脏的病理学改变

3 讨 论

中药治疗糖尿病的机制主要包括：①改善胰岛素抵抗；②保护和修复胰岛β细胞；③调剂糖代谢等〔3～5〕。研究表明：巴天酸模、三七、红花、生姜、冰片、菊花、川芎等中药复方制剂中，巴天酸模的根提取物具有抗氧化和清除自由基的能力，并且随着浓度和时间的变化而增加，可一定程度降低2型糖尿病大鼠的血糖和糖化血红蛋白水平，保护胰岛细胞〔6〕。药理研究显示，三七具有多种药理活性，对血液、心血管、神经、免疫、物质代谢系统均具有较好的调节作用〔7〕，三七皂苷能够提高KK-Ay鼠对胰岛素的敏感性和降低瘦素的抵抗〔8〕。红花的药理作用广泛且毒副作用小，对心脏、肝脏、免疫系统等均具有保护作用〔9〕。生姜具有多种药理活性，对1和2型糖尿病均具有治疗作用，给予糖尿病大鼠生姜汁可以明显降低空腹血糖和升高胰岛素水平从而达到抗糖尿病的作用〔10〕。同时生姜还具有其他药理作用，如抗氧化、降低胆固醇、抗炎、抗肿瘤等〔11〕。冰片是一味常用的佐药，其主要药理活性是调节中枢神经系统，保护心脑等器官，抗炎抗病毒等〔12〕。菊花的主要药理活性是抗炎、免疫调节、抗肿瘤、保肝和保护心血管等〔13〕。而川芎的药理活性是保护心血管心痛、抗血栓形成、解痉、镇痛等，用于治疗糖尿病时，其可一定程度控制糖尿病大鼠的血糖，保护糖尿病大鼠的肾脏〔14〕。本实验结果显示，巴天酸模、三七、红花、生姜、冰片、菊花、川芎所组成的中药复方制剂具有抗炎抗氧化、提高胰腺的功能以及调节免疫的作用。

4 参考文献

1Blake R，Trounce IA.Mitochondrial dysfunction and complications associated with diabetes 〔J〕.Fron Mitoch Res,2014；1840(4)：1404-12.

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5Liu SZ,Deng YX,Chen B,etal.Antihyperglycemic effect of the traditional Chinese scutellaria-coptis herb couple and its main components in streptozotocin-induced diabetic rats〔J〕.Ethnopharmacology,2013；145(2)：490-8.

6Degirmenci I，Ustuner MC，Kalender Y，etal.The effects of acarbose and Rumex patientia L.on ultrastructural and biochemical changes of pancreatic B cells in streptozotocin-induced diabetic rats〔J〕.Ethnopharmacology,2005;97(3)：555-9.

7唐 娇，黄俊明，张印红，等.三七的药理活性及毒理学研究进展〔J〕.毒理学杂志，2012；26(3)：228-31.

8钟振东，王春梅，汪 为，等.三七总皂苷的抗糖尿病机理及其降血糖成分研究〔J〕.四川大学学报，2014；45(2)：235-9.

9Zhou X,Tang L,Xu Y,etal.Towards a better understanding of medicinal uses of Carthamus tinctorius L.in traditional Chinese medicine：A phytochemical and pharmacological review 〔J〕.Ethnopharmacology，2014；151(1)：27-43.

10Darvishzadeh-Mahani F, Esmaeili-Mahani S, Komeili G,etal. Ginger (Zingiber officinale Roscoe) prevents the development of morphine analgesic tolerance and physical dependence in rats〔J〕. J Ethnopharmacol， 2012；141(3):901-7.

11韩燕全，洪 燕，姜 蕾，等.姜的炮制、质控和药理研究进展〔J〕.中国现代中药，2011；13(4)：48-51.

12刘磊刚.冰片的药理研究及与临床应用〔J〕.中国药物经济学，2014；26(2)：26-7.

13陆 华.浅析不同菊花的药理作用及临床应用〔J〕.中国现代药物应用，2013；7(5)：129-30.

14Yang QH,Liang Y,Xu Q,etal.Protective effect of tetramethylpyrazine isolated from Ligusticum chuanxiong on nephropathy in rats with streptozotocin-induced diabetes 〔J〕.Phytomedicine，2011；18(18)：1148-52.