TIMP-1HAPCⅢ在糖尿病肾病血瘀证中的表达

韩冉++++++路遥

[摘要] 目的 分析纤维化指标在糖尿病肾病（DN）血瘀证与非血瘀证间表达水平的差异，验证“血瘀证是导致DN肾纤维化的主要病机”的中医理论。 方法 依照中医辨证将本院60例以DN患者分为血瘀证组（A组）与非血瘀证组（B组），另设健康对照组（C组），检测各组的纤维化相关指标，并进行统计分析。 结果 A、B组的血清Ⅲ型前胶原（PCⅢ）、透明质酸（HA）、人基质金属蛋白酶组织抑制因子-1（TIMP-1）含量与健康对照组比较，差异有统计学意义（P<0.01），A、B组的TIMP-1含量比较，差异有统计学意义（P<0.01）。 结论 DN血瘀证组的纤维化程度重，与中医理论认为“血瘀是导致DN肾纤维化的主要病机”相符。

[关键词] 糖尿病肾病；肾纤维化；血瘀证；人基质金属蛋白酶组织抑制因子-1

[中图分类号] R587.2[文献标识码] A[文章编号] 1674-4721（2014）06（c）-0092-03

Expression of TIMP-1、HA、PCⅢ in blood stasis syndrome of diabetic nephropathy

HAN Ran LU Yao▲

Department of Laboratory,Oriental Hospital of Beijing University of Traditional Chinese Medicine, Beijing 100078,China

[Abstract] Objective To analyze the difference of expression level of fibrosis indexes between blood stasis syndrome and none-blood stasis syndrome in diabetic nephropathy (DN) to verify the theory of traditional Chinese medicine (TCM) that "blood stasis is the main pathogenesis of renal fibrosis in DN ". Methods According to syndrome differentiation of TCM,60 patients with DN in our hospital were divided into the blood stasis syndrome group (the group A) and the none-blood stasis syndrome group (the group B),another healthy control group (the group C) was set up,fibrosis related indicators of all samples were tested,and the data was analyzed. Results All DN patients′ serum HA,PCⅢ,TIMP-1 were higher than those the healthy control group (P<0.01),The difference of TIMP-1 level between between the blood stasis syndrome and the blood stasis syndrome group was significant (P<0.01). Conclusion The degree of fibrosis was heavy inblood stasis syndrome group of DN,it matches with the theory that "blood stasis is the main pathogenesis of renal fibrosis in DN" .

[Key words] Diabetic nephropathy;Renal fibrosis;Blood stasis syndrome;Tissue inhibitors to metalloproteinase-1

糖尿病肾病（diabetic nephropathy，DN）是糖尿病最主要的并发症之一，是糖尿病的主要致死原因，统计表明DN在终末期肾衰竭患者中占首位，约为36%[1]。DN的主要病理基础为肾脏的纤维化改变，肾纤维化包括肾小球硬化、肾间质纤维化，几乎是所有肾脏疾病进展至终末期肾衰竭的共同通路，有研究证明[2]，DN的纤维化在各种慢性肾脏疾病中最为显著。

纤维化属于现代医学的病理学概念，中医理论将其归纳为“络脉癥瘕”“血瘀”“积聚”，归属于中医“络病”的范畴，更有学者提出血瘀证贯穿DN始末的理论[3]。近年对于DN证型的研究表明，血瘀证在DN各期的出现率均为最高[4]，因此许多学者认为，血瘀是导致器官纤维化的重要病因病机[5-7]。

血清学纤维化指标已广泛运用于肝纤维化的诊断，运用其诊断肾脏的纤维化从取材和价格等方面考量优于肾组织活检，且亦可用于早期诊断，因此也被临床应用于肾纤维化的诊断。

1 资料与方法

1.1 一般资料

将2008年8月~2009年3月于本院就诊的60例DN患者依照中医辨证为血瘀证组（A组）与非血瘀证组（B组），每组各30例，并将来自本院体检中心的健康人群30例设为健康对照组。血瘀证组（A组）：男17例，女13例，年龄30～70 岁，平均（56.13±8.25）岁，中医辨证为血瘀证。非血瘀证组（B组）：男16例，女14例，年龄30～70岁，平均（53.23±8.41）岁，中医辨证为非血瘀证。健康对照组均为健康体检者，男15例，女15例，年龄25～50 岁，平均40.6岁，均无肝、肾、心、肺病史，且血、尿常规检查和肝肾功能、血脂、肝炎病毒血清标志物等检查正常。

1.2 研究方法

1.2.1诊断及纳入标准

根据世界卫生组织（WHO）的糖尿病诊断标准进行DN的诊断：有明确糖尿病病史，病程常在6年以上；6个月内两次或两次以上尿微量白蛋白>30 mg/24 h；临床可诊断的Ⅲ、Ⅳ期患者。排除自身免疫性疾病者其他原因引起的肾病或尿微量白蛋白上升患者；DN已发展至肾衰竭期的患者；肝功能损害、慢性呼吸系统疾病、妊娠及哺乳期妇女；无法或不愿合作者。

血瘀证证候诊断参照《糖尿病（消渴病）中医诊治荟萃》[8]制订：定位刺痛，夜间加重；口唇舌暗或紫暗、瘀斑、舌下脉怒张；肌肤甲错等，有其中一项可诊断。

1.2.2仪器与方法

1.2.2.1样本的采集与预处理空腹采集静脉血，将样本离心后分离血清，待测血清于-40℃冰冻保存。

1.2.2.2检测程序使用Olympus AU640全自动生化分析仪、Olympus原厂生化试剂进行肝、肾功能检测；使用美国TPI公司生产的血清透明质酸（HA）、Ⅲ型前胶原（PCⅢ）ELISA试剂盒检测HA、PCⅢ；使用美国RD公司生产的ELISA试剂盒检测人基质金属蛋白酶组织抑制因子-1（TIMP-1），所有操作按照试剂说明书进行。

endprint

1.3统计方法

数据使用SPSS 11.5软件进行统计分析，计量资料用均数±标准差表示，符合正态分布的计量资料两组间比较采用成组设计t检验，不符合正态分布的采用秩和检验，计数资料用百分率（%）表示，采用确切概率法或χ2检验，所有的统计均采用双侧检验，以P<0.05为差异有统计学意义。

2 结果

2.1 3组血清Cr、BUN含量的比较

A、B组的Cr、BUN与健康对照组比较，明显增高，差异有统计学意义（P<0.01）；A、B组的Cr、BUN比较，差异无统计学意义（P>0.05）（表1）。

表1 3组血清Cr、BUN含量的比较（x±s）

与健康对照组比较，*P<0.01；与B组比较，#P>0.05

2.2 3组血清HA、PCⅢ、TIMP-1含量的比较

A、B组的HA、PCⅢ、TIMP-1含量均高于健康对照组（P<0.01），A、B组的HA、PCⅢ含量比较，差异无统计学意义（P>0.05），而A、B组的TIMP-1比较，差异有统计学意义（P<0.01）（表2）。

表2 3组血清HA、PCⅢ、TIMP-1含量的比较（x±s）

与健康对照组比较，*P<0.01；与B组比较，#P<0.01

3 讨论

DN是终末期肾衰竭的主要原因之一，其主要病理特征为肾纤维化，肾小球硬化和肾小管间质纤维化是DN的主要病理表现。肾小球硬化表现为肾小球基底膜增厚和细胞外基质（extracellular matrix，ECM）增多，以ECM的显著增生为重要标志。肾小管间质纤维化的主要病理改变为成纤维细胞及ECM增生，最终形成肾纤维化。基质金属蛋白酶（matrix metalloproteinases，MMPs）是一类分解细胞外基质组分的锌蛋白酶，在有机体生长发育中的细胞外基质逆转与重塑以及疾病的病理损害中起极为重要的作用。所有MMPs都受到天然抑制剂金属蛋白酶组织抑制剂（tissue inhibitor of matrix metalloproteinases，TIMPs）所抑制，TIMPs特异性抑制MMPs的活性。TIMPs与MMPs是调控ECM降解的重要酶系，正常情况下，MMPs和TIMPs相互作用，使ECM处于动态平衡中，MMPs活性增强或TIMPs活性降低都会破坏ECM的动态平衡，其中MMP-9是Ⅳ型胶原蛋白（Ⅳ-C）的主要降解酶系，在肾纤维化发生过程中有重要作用，参与了肾纤维化的产生。TIMP-1是体内MMP-9较特异的抑制物，TIMP-1通过抑制MMP-9的活性，达到降低其对胶原分解的作用，促进肾纤维化的形成[9]。有研究表明，多种肾脏疾病患者血清的TIMP-1浓度升高[10]，故此指标在肾纤维化的诊断中具有重要价值。

中医学认为肾纤维化可归入“癥瘕”“积聚”病变，属中医“络病”范畴。中医学中有“久病必瘀”“病久瘀甚”的传统理论，脏器纤维化的临床症状也与中医学的血瘀证症状相似，故将其归属于“血瘀”范畴，认为血瘀亦可能是导致器官纤维化的重要病机。已有临床和实验研究显示，从“肾络瘀阻”论治DN取得了较好的疗效，形成了独特的理论体系[11]。近年来不少研究显示，活血化瘀药物使DN实验模型TIMP-1等实验指标的表达水平明显降低，说明活血化瘀药物对DN纤维化的治疗有效[12-13]。

本研究结果显示，血瘀证与非血瘀证的血清PCⅢ、HA含量比较，差异无统计学意义（P>0.05），说明在非血瘀证DN患者中也出现了相同程度的细胞外基质的沉积。本组结果与张史昭等[14]的结果略有不同，其结果显示，血瘀与非血瘀证的层粘连蛋白（LN）、Ⅳ-C差异有统计学意义，两者研究结果间的差异可能与血瘀证的诊断标准不同有关。另外，在病例选择上两者所选择的病例差异较大，张史昭等选择了肾衰竭期的患者，而本研究选择了临床可诊断的早期DN病例。基于中医“病久瘀甚”的理论，本研究所选病例血瘀的程度可能较轻，因此在血瘀证与非血瘀证两组间的HA、PCⅢ含量比较，差异无统计学意义（P>0.05），两组的TIMP-1含量比较，差异有统计学意义（P<0.01），血瘀证组的TIMP-1表达水平明显增高，且临床上排除了肝、肺、胰等脏器的纤维化病变，因此，血瘀证组患者的血清TIMP-1 浓度升高由肾脏病变所致。血瘀证组患者的血清TIMP-1 浓度升高，提示血瘀证组的患者可能预后不良，病变进程快，与中医认为“血瘀证是导致器官纤维化的重要病因病机”这一理论相符，为此理论提供了实验依据。本研究中的健康对照组与DN患者间的血清纤维化指标含量比较，差异有统计学意义（P<0.01），提示血清的纤维化指标可以作为辅助诊断指标用于早期DN患者。

综上所述，血清纤维化指标可以反映DN患者肾脏纤维化的程度；DN患者纤维化指标——TIMP-1在血瘀证组的高表达，验证了血瘀可能是肾纤维化的主要病机，提示血瘀的程度对肾纤维化的程度有一定的代表性；而临床辨证为无血瘀证的非血瘀证组，纤维化指标血清HA、PCⅢ含量升高，与中医理论“血瘀贯穿DN的始末”相符。本组研究在排除了肝、肺、胰等脏器纤维化病变的前提下，对早期DN患者血清TIMP-1的研究亦表明，临床可以使用血清TIMP-1作为DN患者肾组织纤维化的辅助诊断指标，适用于肾活检禁忌证的患者。

[参考文献]

[1]Klahr S，Morrissey J，Hruska K，et al.New approaches to delay the progression of chronic renal failure[J].Kidney Int Suppl，2002，（80）：23-26.

[2]梁继铁.慢性肾脏疾病血清PCⅢ、HA、LN 检测及其临床意义[J].右江民族医学院学报，2005，27（4）：502-503.

[3]吕仁和.糖尿病及其并发症中西医诊治学[M].北京：人民卫生出版社，1997.

[4]朱勐，吴神，王怡.糖尿病肾病中医证型及其相关因素的多元分析[J].现代中西医结合杂志，2012，21（1）：18-20.

[5]牛建昭，姜术霞.多脏器纤维化的络病机制探讨[J].北京中医药大学学报，2004，27（6）：4-6.

[6]赵海，宴子友.浅议肾间质纤维化的病因病机[J].山西中医，2006，22（2）：62-63.

[7]戴芹，王怡.中医对肾纤维化的研究概况[J].江苏中医药，2005，26（11）：77-78.

[8]晏子友，皮持衡.中药抗肾纤维化研究概况[J].江西中医药，2000，31（4）：55.

[9]Yoshiji H，Kuriyamas S，Miyamoto Y，et al.Tissue inhibitor of metal loproteinases-1 promotes liver fibrosis development in a transgenic mouse model[J].Hepatology，2000，32（6）：1248-1254.

[10]Akiyama K，Shikata K，Sugimoto H，et al.Changes in serum concentrations of matrix metalloproteinases,tissue inhibitor of metalloproteinases and type Ⅳ collagen in patients with various types of glomerulonephritis[J].Res Commun Mol Pathol Pharmacol，1997，95（2）：115-128.

[11]许成群，王元，孙永亮.糖尿病肾病“肾络瘀阻”理论及其应用[J].中医研究，2013，26（4）：3-6.

[12]余红，石明隽，肖瑛，等.丹芪合剂对糖尿病肾病大鼠肾脏组织TIMP-1，TIMP-2表达的影响[J].时珍国医国药，2012，23（3）：667-669.

[13]胡波，李锋，王燕午，等.丹参对糖尿病肾病大鼠MMP-2,TIMP-1,TGF-β1和Ⅳ-C表达的影响[J].时珍国医国药，2008，19（12）：3020-3022.

[14]张史昭，潘达亮，于伟，等.肾络瘀阻与肾纤维化关系的临床研究[J].中国中西医结合肾病杂志，2003，4（8）：458-459.

（收稿日期：2014-04-14本文编辑：许俊琴）

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1.3统计方法

数据使用SPSS 11.5软件进行统计分析，计量资料用均数±标准差表示，符合正态分布的计量资料两组间比较采用成组设计t检验，不符合正态分布的采用秩和检验，计数资料用百分率（%）表示，采用确切概率法或χ2检验，所有的统计均采用双侧检验，以P<0.05为差异有统计学意义。

2 结果

2.1 3组血清Cr、BUN含量的比较

A、B组的Cr、BUN与健康对照组比较，明显增高，差异有统计学意义（P<0.01）；A、B组的Cr、BUN比较，差异无统计学意义（P>0.05）（表1）。

表1 3组血清Cr、BUN含量的比较（x±s）

与健康对照组比较，*P<0.01；与B组比较，#P>0.05

2.2 3组血清HA、PCⅢ、TIMP-1含量的比较

A、B组的HA、PCⅢ、TIMP-1含量均高于健康对照组（P<0.01），A、B组的HA、PCⅢ含量比较，差异无统计学意义（P>0.05），而A、B组的TIMP-1比较，差异有统计学意义（P<0.01）（表2）。

表2 3组血清HA、PCⅢ、TIMP-1含量的比较（x±s）

与健康对照组比较，*P<0.01；与B组比较，#P<0.01

3 讨论

DN是终末期肾衰竭的主要原因之一，其主要病理特征为肾纤维化，肾小球硬化和肾小管间质纤维化是DN的主要病理表现。肾小球硬化表现为肾小球基底膜增厚和细胞外基质（extracellular matrix，ECM）增多，以ECM的显著增生为重要标志。肾小管间质纤维化的主要病理改变为成纤维细胞及ECM增生，最终形成肾纤维化。基质金属蛋白酶（matrix metalloproteinases，MMPs）是一类分解细胞外基质组分的锌蛋白酶，在有机体生长发育中的细胞外基质逆转与重塑以及疾病的病理损害中起极为重要的作用。所有MMPs都受到天然抑制剂金属蛋白酶组织抑制剂（tissue inhibitor of matrix metalloproteinases，TIMPs）所抑制，TIMPs特异性抑制MMPs的活性。TIMPs与MMPs是调控ECM降解的重要酶系，正常情况下，MMPs和TIMPs相互作用，使ECM处于动态平衡中，MMPs活性增强或TIMPs活性降低都会破坏ECM的动态平衡，其中MMP-9是Ⅳ型胶原蛋白（Ⅳ-C）的主要降解酶系，在肾纤维化发生过程中有重要作用，参与了肾纤维化的产生。TIMP-1是体内MMP-9较特异的抑制物，TIMP-1通过抑制MMP-9的活性，达到降低其对胶原分解的作用，促进肾纤维化的形成[9]。有研究表明，多种肾脏疾病患者血清的TIMP-1浓度升高[10]，故此指标在肾纤维化的诊断中具有重要价值。

中医学认为肾纤维化可归入“癥瘕”“积聚”病变，属中医“络病”范畴。中医学中有“久病必瘀”“病久瘀甚”的传统理论，脏器纤维化的临床症状也与中医学的血瘀证症状相似，故将其归属于“血瘀”范畴，认为血瘀亦可能是导致器官纤维化的重要病机。已有临床和实验研究显示，从“肾络瘀阻”论治DN取得了较好的疗效，形成了独特的理论体系[11]。近年来不少研究显示，活血化瘀药物使DN实验模型TIMP-1等实验指标的表达水平明显降低，说明活血化瘀药物对DN纤维化的治疗有效[12-13]。

本研究结果显示，血瘀证与非血瘀证的血清PCⅢ、HA含量比较，差异无统计学意义（P>0.05），说明在非血瘀证DN患者中也出现了相同程度的细胞外基质的沉积。本组结果与张史昭等[14]的结果略有不同，其结果显示，血瘀与非血瘀证的层粘连蛋白（LN）、Ⅳ-C差异有统计学意义，两者研究结果间的差异可能与血瘀证的诊断标准不同有关。另外，在病例选择上两者所选择的病例差异较大，张史昭等选择了肾衰竭期的患者，而本研究选择了临床可诊断的早期DN病例。基于中医“病久瘀甚”的理论，本研究所选病例血瘀的程度可能较轻，因此在血瘀证与非血瘀证两组间的HA、PCⅢ含量比较，差异无统计学意义（P>0.05），两组的TIMP-1含量比较，差异有统计学意义（P<0.01），血瘀证组的TIMP-1表达水平明显增高，且临床上排除了肝、肺、胰等脏器的纤维化病变，因此，血瘀证组患者的血清TIMP-1 浓度升高由肾脏病变所致。血瘀证组患者的血清TIMP-1 浓度升高，提示血瘀证组的患者可能预后不良，病变进程快，与中医认为“血瘀证是导致器官纤维化的重要病因病机”这一理论相符，为此理论提供了实验依据。本研究中的健康对照组与DN患者间的血清纤维化指标含量比较，差异有统计学意义（P<0.01），提示血清的纤维化指标可以作为辅助诊断指标用于早期DN患者。

综上所述，血清纤维化指标可以反映DN患者肾脏纤维化的程度；DN患者纤维化指标——TIMP-1在血瘀证组的高表达，验证了血瘀可能是肾纤维化的主要病机，提示血瘀的程度对肾纤维化的程度有一定的代表性；而临床辨证为无血瘀证的非血瘀证组，纤维化指标血清HA、PCⅢ含量升高，与中医理论“血瘀贯穿DN的始末”相符。本组研究在排除了肝、肺、胰等脏器纤维化病变的前提下，对早期DN患者血清TIMP-1的研究亦表明，临床可以使用血清TIMP-1作为DN患者肾组织纤维化的辅助诊断指标，适用于肾活检禁忌证的患者。

[参考文献]

[1]Klahr S，Morrissey J，Hruska K，et al.New approaches to delay the progression of chronic renal failure[J].Kidney Int Suppl，2002，（80）：23-26.

[2]梁继铁.慢性肾脏疾病血清PCⅢ、HA、LN 检测及其临床意义[J].右江民族医学院学报，2005，27（4）：502-503.

[3]吕仁和.糖尿病及其并发症中西医诊治学[M].北京：人民卫生出版社，1997.

[4]朱勐，吴神，王怡.糖尿病肾病中医证型及其相关因素的多元分析[J].现代中西医结合杂志，2012，21（1）：18-20.

[5]牛建昭，姜术霞.多脏器纤维化的络病机制探讨[J].北京中医药大学学报，2004，27（6）：4-6.

[6]赵海，宴子友.浅议肾间质纤维化的病因病机[J].山西中医，2006，22（2）：62-63.

[7]戴芹，王怡.中医对肾纤维化的研究概况[J].江苏中医药，2005，26（11）：77-78.

[8]晏子友，皮持衡.中药抗肾纤维化研究概况[J].江西中医药，2000，31（4）：55.

[9]Yoshiji H，Kuriyamas S，Miyamoto Y，et al.Tissue inhibitor of metal loproteinases-1 promotes liver fibrosis development in a transgenic mouse model[J].Hepatology，2000，32（6）：1248-1254.

[10]Akiyama K，Shikata K，Sugimoto H，et al.Changes in serum concentrations of matrix metalloproteinases,tissue inhibitor of metalloproteinases and type Ⅳ collagen in patients with various types of glomerulonephritis[J].Res Commun Mol Pathol Pharmacol，1997，95（2）：115-128.

[11]许成群，王元，孙永亮.糖尿病肾病“肾络瘀阻”理论及其应用[J].中医研究，2013，26（4）：3-6.

[12]余红，石明隽，肖瑛，等.丹芪合剂对糖尿病肾病大鼠肾脏组织TIMP-1，TIMP-2表达的影响[J].时珍国医国药，2012，23（3）：667-669.

[13]胡波，李锋，王燕午，等.丹参对糖尿病肾病大鼠MMP-2,TIMP-1,TGF-β1和Ⅳ-C表达的影响[J].时珍国医国药，2008，19（12）：3020-3022.

[14]张史昭，潘达亮，于伟，等.肾络瘀阻与肾纤维化关系的临床研究[J].中国中西医结合肾病杂志，2003，4（8）：458-459.

（收稿日期：2014-04-14本文编辑：许俊琴）

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1.3统计方法

数据使用SPSS 11.5软件进行统计分析，计量资料用均数±标准差表示，符合正态分布的计量资料两组间比较采用成组设计t检验，不符合正态分布的采用秩和检验，计数资料用百分率（%）表示，采用确切概率法或χ2检验，所有的统计均采用双侧检验，以P<0.05为差异有统计学意义。

2 结果

2.1 3组血清Cr、BUN含量的比较

A、B组的Cr、BUN与健康对照组比较，明显增高，差异有统计学意义（P<0.01）；A、B组的Cr、BUN比较，差异无统计学意义（P>0.05）（表1）。

表1 3组血清Cr、BUN含量的比较（x±s）

与健康对照组比较，*P<0.01；与B组比较，#P>0.05

2.2 3组血清HA、PCⅢ、TIMP-1含量的比较

A、B组的HA、PCⅢ、TIMP-1含量均高于健康对照组（P<0.01），A、B组的HA、PCⅢ含量比较，差异无统计学意义（P>0.05），而A、B组的TIMP-1比较，差异有统计学意义（P<0.01）（表2）。

表2 3组血清HA、PCⅢ、TIMP-1含量的比较（x±s）

与健康对照组比较，*P<0.01；与B组比较，#P<0.01

3 讨论

DN是终末期肾衰竭的主要原因之一，其主要病理特征为肾纤维化，肾小球硬化和肾小管间质纤维化是DN的主要病理表现。肾小球硬化表现为肾小球基底膜增厚和细胞外基质（extracellular matrix，ECM）增多，以ECM的显著增生为重要标志。肾小管间质纤维化的主要病理改变为成纤维细胞及ECM增生，最终形成肾纤维化。基质金属蛋白酶（matrix metalloproteinases，MMPs）是一类分解细胞外基质组分的锌蛋白酶，在有机体生长发育中的细胞外基质逆转与重塑以及疾病的病理损害中起极为重要的作用。所有MMPs都受到天然抑制剂金属蛋白酶组织抑制剂（tissue inhibitor of matrix metalloproteinases，TIMPs）所抑制，TIMPs特异性抑制MMPs的活性。TIMPs与MMPs是调控ECM降解的重要酶系，正常情况下，MMPs和TIMPs相互作用，使ECM处于动态平衡中，MMPs活性增强或TIMPs活性降低都会破坏ECM的动态平衡，其中MMP-9是Ⅳ型胶原蛋白（Ⅳ-C）的主要降解酶系，在肾纤维化发生过程中有重要作用，参与了肾纤维化的产生。TIMP-1是体内MMP-9较特异的抑制物，TIMP-1通过抑制MMP-9的活性，达到降低其对胶原分解的作用，促进肾纤维化的形成[9]。有研究表明，多种肾脏疾病患者血清的TIMP-1浓度升高[10]，故此指标在肾纤维化的诊断中具有重要价值。

中医学认为肾纤维化可归入“癥瘕”“积聚”病变，属中医“络病”范畴。中医学中有“久病必瘀”“病久瘀甚”的传统理论，脏器纤维化的临床症状也与中医学的血瘀证症状相似，故将其归属于“血瘀”范畴，认为血瘀亦可能是导致器官纤维化的重要病机。已有临床和实验研究显示，从“肾络瘀阻”论治DN取得了较好的疗效，形成了独特的理论体系[11]。近年来不少研究显示，活血化瘀药物使DN实验模型TIMP-1等实验指标的表达水平明显降低，说明活血化瘀药物对DN纤维化的治疗有效[12-13]。

本研究结果显示，血瘀证与非血瘀证的血清PCⅢ、HA含量比较，差异无统计学意义（P>0.05），说明在非血瘀证DN患者中也出现了相同程度的细胞外基质的沉积。本组结果与张史昭等[14]的结果略有不同，其结果显示，血瘀与非血瘀证的层粘连蛋白（LN）、Ⅳ-C差异有统计学意义，两者研究结果间的差异可能与血瘀证的诊断标准不同有关。另外，在病例选择上两者所选择的病例差异较大，张史昭等选择了肾衰竭期的患者，而本研究选择了临床可诊断的早期DN病例。基于中医“病久瘀甚”的理论，本研究所选病例血瘀的程度可能较轻，因此在血瘀证与非血瘀证两组间的HA、PCⅢ含量比较，差异无统计学意义（P>0.05），两组的TIMP-1含量比较，差异有统计学意义（P<0.01），血瘀证组的TIMP-1表达水平明显增高，且临床上排除了肝、肺、胰等脏器的纤维化病变，因此，血瘀证组患者的血清TIMP-1 浓度升高由肾脏病变所致。血瘀证组患者的血清TIMP-1 浓度升高，提示血瘀证组的患者可能预后不良，病变进程快，与中医认为“血瘀证是导致器官纤维化的重要病因病机”这一理论相符，为此理论提供了实验依据。本研究中的健康对照组与DN患者间的血清纤维化指标含量比较，差异有统计学意义（P<0.01），提示血清的纤维化指标可以作为辅助诊断指标用于早期DN患者。

综上所述，血清纤维化指标可以反映DN患者肾脏纤维化的程度；DN患者纤维化指标——TIMP-1在血瘀证组的高表达，验证了血瘀可能是肾纤维化的主要病机，提示血瘀的程度对肾纤维化的程度有一定的代表性；而临床辨证为无血瘀证的非血瘀证组，纤维化指标血清HA、PCⅢ含量升高，与中医理论“血瘀贯穿DN的始末”相符。本组研究在排除了肝、肺、胰等脏器纤维化病变的前提下，对早期DN患者血清TIMP-1的研究亦表明，临床可以使用血清TIMP-1作为DN患者肾组织纤维化的辅助诊断指标，适用于肾活检禁忌证的患者。

[参考文献]

[1]Klahr S，Morrissey J，Hruska K，et al.New approaches to delay the progression of chronic renal failure[J].Kidney Int Suppl，2002，（80）：23-26.

[2]梁继铁.慢性肾脏疾病血清PCⅢ、HA、LN 检测及其临床意义[J].右江民族医学院学报，2005，27（4）：502-503.

[3]吕仁和.糖尿病及其并发症中西医诊治学[M].北京：人民卫生出版社，1997.

[4]朱勐，吴神，王怡.糖尿病肾病中医证型及其相关因素的多元分析[J].现代中西医结合杂志，2012，21（1）：18-20.

[5]牛建昭，姜术霞.多脏器纤维化的络病机制探讨[J].北京中医药大学学报，2004，27（6）：4-6.

[6]赵海，宴子友.浅议肾间质纤维化的病因病机[J].山西中医，2006，22（2）：62-63.

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（收稿日期：2014-04-14本文编辑：许俊琴）

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