盐酸吉西他滨联合顺铂对非小细胞肺癌外周血调节性T细胞水平影响的研究

彭东旭+++方晓娟+++++杜均祥+++梁翠微++++潘莹

[摘要] 目的 探讨盐酸吉西他滨联合顺铂对非小细胞肺癌外周血调节性T细胞水平的影响，从而为相关临床研究提供依据和参考。 方法 本次研究入选的病例均为本院2009年1月～2012年12月收治的非小细胞肺癌患者50例（非小细胞癌组），同期健康体检者34例（健康对照组），观察记录全部研究对象以及患者实施治疗前后CD4+CD25+Foxp3+/CD4+水平，并对相关数据进行统计学分析。 结果 健康对照组的CD4+CD25+Foxp3+/CD4+显著低于非小细胞癌组，且组间比较差异有统计学意义；不同类型的非小细胞癌患者实施治疗后，较治疗前该项指标水平得到显著降低，且治疗前后比较差异均有统计学意义（P<0.05）。 结论 盐酸吉西他滨联合顺铂的治疗方案可以显著调节非小细胞肺癌患者的外周血调节性T细胞水平，可有效调节患者的肿瘤免疫耐受，从而显著改善患者的免疫功能，是临床治疗非小细胞肺癌的理想选择。

[关键词] 盐酸吉西他滨联合顺铂；非小细胞肺癌；外周血调节性T细胞

[中图分类号] R734.2[文献标识码] A[文章编号] 1674-4721（2014）06（b）-0075-03

Impact study of gemcitabine hydrochloride combining with cis-platinum on levels of regulatory T cells in peripheral blood in patients with non-small cell lung cancer

PENG Dong-xu1 FANG Xiao-juan2 DU Jun-xiang1 LIANG Cui-wei1 PAN Ying1

1.Department of Oncology,Zhuhai People′s Hospital of Guangdong Province,Zhuhai 519000,China;2.Coronary Care Unit,the Fifth Affiliated Hospital,Sun Yat-Sen University,Zhuhai 519000,China

[Abstract] Objective To further explore the impact of gemcitabine hydrochloride combining with cis-platinum on levels of regulatory T cells in peripheral blood in patients with non-small cell lung cancer (NSCLC) aiming at providing basis and reference for related clinical researches. Methods 50 NSCLC patients admitted into our hospital from January 2009 to December 2012 were selected.Another 34 healthy participants in the same period were chosen as healthy control group.Clinical data from all participants and levels of CD4+CD25+Foxp3+/CD4+ before and after therapy were observed and recorded, and the related data were comparatively analyzed. Results With regard to CD4+CD25+Foxp3+/CD4+, the level in the healthy control group was lower than that in the NSCLC group with a statistical difference.After treatment,levels of CD4+CD25+Foxp3+/CD4+ in different types of NSCLC patients remarkably decreased in comparison with those before treatment respectively,which all displayed statistical differences (P<0.05). Conclusion Therapeutic regimen of gemcitabine hydrochloride combining with cis-platinum can remarkably regulate regulatory T cells in peripheral blood in NSCLC patients and tumor immune tolerance,and finally improve patient′s immunity,which is an optimal option for NSCLC patients in clinic.

[Key words] Gemcitabine hydrochloride combining with cis-platinum;Non-small cell lung cancer (NSCLC);Regulatory T cells in peripheral blood

临床非小细胞肺癌患者往往属于晚期，因此主要的治疗方法为化疗，常用的治疗方案为盐酸吉西他滨联合顺铂。外周血调节性T细胞水平可以有效调节机体免疫功能，非小细胞肺癌患者的临床治疗具有重要的临床意义[1-2]。鉴于此，本研究总结了本院近年来采用盐酸吉西他滨联合顺铂治疗非小细胞肺癌的相关实践经验，以进一步探讨盐酸吉西他滨联合顺铂对非小细胞肺癌外周血调节性T细胞水平的影响，从而为相关临床研究提供依据和参考。

1 资料与方法

1.1 一般资料

本研究入选的病例均为本院2009年1月～2012年12月收治的非小细胞肺癌患者50例（非小细胞癌组），同期健康体检者34例（健康对照组），共计84例。其中男性54例，女性30例，年龄26～78岁，平均（48.64±12.34）岁。病理分型分型：鳞癌16例，腺癌32例，腺鳞癌2例。

1.2 化疗方案

化疗方案均采用GP方案：盐酸吉西他滨[国药准字：H20113286；生产厂家：齐鲁制药（海南）有限公司]1250 mg/m2静脉滴注30 min滴完，第1、8天；顺铂（国药准字：020813；生产厂家：齐鲁制药厂生产）30 mg/m2静脉滴注，第1～3天；以21 d为1个周期[3]。

1.3 观察指标

观察记录全部研究对象以及患者实施治疗前后CD4+CD25+Foxp3+/CD4+水平，并对相关数据进行统计学分析。

1.4 检测方法

所有观察对象均于清晨空腹抽取静脉血2 ml，EDTA抗凝。应用荧光直接标记法及流式细胞仪检测外周血单个核细胞膜表面CD3、CD4、CD8、CD25。取不同荧光标记的单克隆抗体各20 μl，分别加入100 μl肝素抗凝的外周血，室温下孵育15 min，然后加入红细胞裂解液，PBS液洗涤2次，用流式细胞仪（BD公司，FACS Calibur）检测，Cellquest软件分析数据，记录阳性细胞百分率，减去非特异对照值。

endprint

1.5 统计学处理

本研究所的数据均采用SPSS 18.0统计软件包进行处理，计量资料采用t检验，计数资料采用χ2检验，以P<0.05为差异有统计学意义。

2 结果

2.1 两组研究对象外周血调节性T细胞水平的比较

健康对照组的CD4+CD25+Foxp3+/CD4+显著低于非小细胞癌组，且组间差异有统计学意义（t=11.1601，P=0.0000）；非小细胞癌患者实施治疗后，较治疗前该项指标水平得到显著降低，且治疗前后比较差异有统计学意义（t=8.7492，P=0.0000）（表1）。

表1 两组研究对象外周血调节性T细胞水平的比较（%，x±s）

与健康对照组比较，*P=0.0000；与同组治疗前比较，#P=0.0000

2.2 不同类型非小细胞癌患者治疗前后的外周血调节性T细胞水平的比较

治疗前不同类型非小细胞癌患者的CD4+CD25+Foxp3+/CD4+均显著高于健康对照组，且组间差异有统计学意义（P<0.05）；不同类型患者实施治疗后，该项指标均得到显著改善，治疗前后比较差异有统计学意义（P<0.05）；不同类型患者治疗前以及治疗后该项指标水平差异均无统计学意义（P>0.05）（表2）。

表2 不同类型非小细胞癌患者治疗前后外周血调节性T细胞

水平的比较（%，x±s）

与健康对照组比较，*P<0.05；与同组治疗前比较，#P<0.05

3 讨论

肺癌是严重威胁人类生命健康一种较为常见的恶性肿瘤，从相关的临床统计数据上分析，肺癌发病率和死亡率增长最快。从发展趋势上分析，近50年来许多国家的相关病例报道结果均显示，目前肺癌的发病率和死亡率正呈现出明显的升高的趋势，肺癌患者人群规模逐年扩大[4-5]。因此，针对肺癌的相关临床研究具有重要的社会意义。

病理研究结果认为[5-6]，肺癌的发生与发展在一定程度上与机体的免疫功能状态具有一定的联系。细胞免疫实际上属于机体抗肿瘤免疫的重要机制，而在细胞免疫的过程中T细胞是重要的免疫调节细胞，在人体组织中发挥着重要的调节作用。

在20世纪90年代初，国外的相关研究学者就通过临床研究证实了CD4和CD25作为外周血调节性T细胞中的一类重要组成部分，在人体内不仅可以有效地对免疫性疾病的发生产生一定的抑制作用，同时对于肿瘤免疫的调节也能发挥一定的作用[7-8]。

既往临床关于非小细胞肺癌的相关研究结果证实[9-10]，对于非小细胞肺癌患者来说，往往患者确诊时间相对较晚，因此临床有效的治疗措施和方法就是采用化疗。从临床治疗效果上分析，盐酸吉西他滨联合顺铂的临床治疗效果相关较好，已经成为抗肿瘤药物的首选。

本研究结果显示，健康对照组的CD4+CD25+Foxp3+/CD4+显著的低于非小细胞癌组，且组间差异有统计学意义；不同类型的非小细胞癌患者实施治疗后，较治疗前该项指标水平得到显著降低，差异均有统计学意义（P<0.05）。

综上所述，在临床实践过程中，选择盐酸吉西他滨联合顺铂的治疗方案可以显著调节非小细胞肺癌患者的外周血调节性T细胞水平，可有效调节患者肿瘤免疫耐受，从而显著改善患者的免疫功能，是临床治疗非小细胞肺癌的理想选择。

[参考文献]

[1]专家组，梁智勇.中国非小细胞肺癌患者表皮生长因子受体基因突变检测专家共识[J].中华病理学杂志，2011， 40（10）：700-702.

[2]蔡文科，石云，赵青.哺乳动物雷帕霉素靶蛋白表达与早期非小细胞肺癌预后的关系[J].中华肿瘤杂志，2014，36（2）：120-122.

[3]孙燕，吴一龙，李龙芸，等.吉非替尼或多西他赛治疗一线化疗失败的非小细胞肺癌的临床分析[J].中华肿瘤杂志，2011，33（5）：377-380.

[4]丛莹莹，刘美艳，蔡莉.胸腔灌注奈达铂与顺铂治疗非小细胞肺癌恶性胸腔积液的疗效比较[J].中华肿瘤杂志，2010，32（6）：467-469.

[5]钱亦淳，任斌辉，田艳艳，等.偶联西妥昔单抗的金纳米颗粒治疗非小细胞肺癌[J].中华实验外科杂志，2014，31（3）：580-583.

[6]徐磊，蒋峰，杨欣，等.非小细胞肺癌组织微小RNA-145表达及其与预后的关系[J].中华实验外科杂志，2014，31（1）：177-179.

[7]鞠立霞，周彩存，唐亮，等.吉非替尼获得性耐药的非小细胞肺癌细胞株PC9/AB2相关耐药机制研究[J].中华结核和呼吸杂志，2010，33（5）：354-358.

[8]王芳，付莎，汤涛，等.非小细胞肺癌表皮生长因子受体基因突变与临床病理特征的关系[J].中华病理学杂志，2011，40（10）：664-666.

[9]冯勤，李向红，陈钊，等.非小细胞肺癌表皮生长因子受体基因突变检测及其与临床病理特征的相关性[J].中华病理学杂志，2011，40（10）：660-663.

[10]赵静，朱焱，张丽，等.非小细胞肺癌表皮生长因子受体基因突变检测及其临床意义[J].中华病理学杂志，2011， 40（10）：671-674.

（收稿日期：2014-04-25本文编辑：林利利）

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1.5 统计学处理

本研究所的数据均采用SPSS 18.0统计软件包进行处理，计量资料采用t检验，计数资料采用χ2检验，以P<0.05为差异有统计学意义。

2 结果

2.1 两组研究对象外周血调节性T细胞水平的比较

健康对照组的CD4+CD25+Foxp3+/CD4+显著低于非小细胞癌组，且组间差异有统计学意义（t=11.1601，P=0.0000）；非小细胞癌患者实施治疗后，较治疗前该项指标水平得到显著降低，且治疗前后比较差异有统计学意义（t=8.7492，P=0.0000）（表1）。

表1 两组研究对象外周血调节性T细胞水平的比较（%，x±s）

与健康对照组比较，*P=0.0000；与同组治疗前比较，#P=0.0000

2.2 不同类型非小细胞癌患者治疗前后的外周血调节性T细胞水平的比较

治疗前不同类型非小细胞癌患者的CD4+CD25+Foxp3+/CD4+均显著高于健康对照组，且组间差异有统计学意义（P<0.05）；不同类型患者实施治疗后，该项指标均得到显著改善，治疗前后比较差异有统计学意义（P<0.05）；不同类型患者治疗前以及治疗后该项指标水平差异均无统计学意义（P>0.05）（表2）。

表2 不同类型非小细胞癌患者治疗前后外周血调节性T细胞

水平的比较（%，x±s）

与健康对照组比较，*P<0.05；与同组治疗前比较，#P<0.05

3 讨论

肺癌是严重威胁人类生命健康一种较为常见的恶性肿瘤，从相关的临床统计数据上分析，肺癌发病率和死亡率增长最快。从发展趋势上分析，近50年来许多国家的相关病例报道结果均显示，目前肺癌的发病率和死亡率正呈现出明显的升高的趋势，肺癌患者人群规模逐年扩大[4-5]。因此，针对肺癌的相关临床研究具有重要的社会意义。

病理研究结果认为[5-6]，肺癌的发生与发展在一定程度上与机体的免疫功能状态具有一定的联系。细胞免疫实际上属于机体抗肿瘤免疫的重要机制，而在细胞免疫的过程中T细胞是重要的免疫调节细胞，在人体组织中发挥着重要的调节作用。

在20世纪90年代初，国外的相关研究学者就通过临床研究证实了CD4和CD25作为外周血调节性T细胞中的一类重要组成部分，在人体内不仅可以有效地对免疫性疾病的发生产生一定的抑制作用，同时对于肿瘤免疫的调节也能发挥一定的作用[7-8]。

既往临床关于非小细胞肺癌的相关研究结果证实[9-10]，对于非小细胞肺癌患者来说，往往患者确诊时间相对较晚，因此临床有效的治疗措施和方法就是采用化疗。从临床治疗效果上分析，盐酸吉西他滨联合顺铂的临床治疗效果相关较好，已经成为抗肿瘤药物的首选。

本研究结果显示，健康对照组的CD4+CD25+Foxp3+/CD4+显著的低于非小细胞癌组，且组间差异有统计学意义；不同类型的非小细胞癌患者实施治疗后，较治疗前该项指标水平得到显著降低，差异均有统计学意义（P<0.05）。

综上所述，在临床实践过程中，选择盐酸吉西他滨联合顺铂的治疗方案可以显著调节非小细胞肺癌患者的外周血调节性T细胞水平，可有效调节患者肿瘤免疫耐受，从而显著改善患者的免疫功能，是临床治疗非小细胞肺癌的理想选择。

[参考文献]

[1]专家组，梁智勇.中国非小细胞肺癌患者表皮生长因子受体基因突变检测专家共识[J].中华病理学杂志，2011， 40（10）：700-702.

[2]蔡文科，石云，赵青.哺乳动物雷帕霉素靶蛋白表达与早期非小细胞肺癌预后的关系[J].中华肿瘤杂志，2014，36（2）：120-122.

[3]孙燕，吴一龙，李龙芸，等.吉非替尼或多西他赛治疗一线化疗失败的非小细胞肺癌的临床分析[J].中华肿瘤杂志，2011，33（5）：377-380.

[4]丛莹莹，刘美艳，蔡莉.胸腔灌注奈达铂与顺铂治疗非小细胞肺癌恶性胸腔积液的疗效比较[J].中华肿瘤杂志，2010，32（6）：467-469.

[5]钱亦淳，任斌辉，田艳艳，等.偶联西妥昔单抗的金纳米颗粒治疗非小细胞肺癌[J].中华实验外科杂志，2014，31（3）：580-583.

[6]徐磊，蒋峰，杨欣，等.非小细胞肺癌组织微小RNA-145表达及其与预后的关系[J].中华实验外科杂志，2014，31（1）：177-179.

[7]鞠立霞，周彩存，唐亮，等.吉非替尼获得性耐药的非小细胞肺癌细胞株PC9/AB2相关耐药机制研究[J].中华结核和呼吸杂志，2010，33（5）：354-358.

[8]王芳，付莎，汤涛，等.非小细胞肺癌表皮生长因子受体基因突变与临床病理特征的关系[J].中华病理学杂志，2011，40（10）：664-666.

[9]冯勤，李向红，陈钊，等.非小细胞肺癌表皮生长因子受体基因突变检测及其与临床病理特征的相关性[J].中华病理学杂志，2011，40（10）：660-663.

[10]赵静，朱焱，张丽，等.非小细胞肺癌表皮生长因子受体基因突变检测及其临床意义[J].中华病理学杂志，2011， 40（10）：671-674.

（收稿日期：2014-04-25本文编辑：林利利）

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1.5 统计学处理

本研究所的数据均采用SPSS 18.0统计软件包进行处理，计量资料采用t检验，计数资料采用χ2检验，以P<0.05为差异有统计学意义。

2 结果

2.1 两组研究对象外周血调节性T细胞水平的比较

健康对照组的CD4+CD25+Foxp3+/CD4+显著低于非小细胞癌组，且组间差异有统计学意义（t=11.1601，P=0.0000）；非小细胞癌患者实施治疗后，较治疗前该项指标水平得到显著降低，且治疗前后比较差异有统计学意义（t=8.7492，P=0.0000）（表1）。

表1 两组研究对象外周血调节性T细胞水平的比较（%，x±s）

与健康对照组比较，*P=0.0000；与同组治疗前比较，#P=0.0000

2.2 不同类型非小细胞癌患者治疗前后的外周血调节性T细胞水平的比较

治疗前不同类型非小细胞癌患者的CD4+CD25+Foxp3+/CD4+均显著高于健康对照组，且组间差异有统计学意义（P<0.05）；不同类型患者实施治疗后，该项指标均得到显著改善，治疗前后比较差异有统计学意义（P<0.05）；不同类型患者治疗前以及治疗后该项指标水平差异均无统计学意义（P>0.05）（表2）。

表2 不同类型非小细胞癌患者治疗前后外周血调节性T细胞

水平的比较（%，x±s）

与健康对照组比较，*P<0.05；与同组治疗前比较，#P<0.05

3 讨论

肺癌是严重威胁人类生命健康一种较为常见的恶性肿瘤，从相关的临床统计数据上分析，肺癌发病率和死亡率增长最快。从发展趋势上分析，近50年来许多国家的相关病例报道结果均显示，目前肺癌的发病率和死亡率正呈现出明显的升高的趋势，肺癌患者人群规模逐年扩大[4-5]。因此，针对肺癌的相关临床研究具有重要的社会意义。

病理研究结果认为[5-6]，肺癌的发生与发展在一定程度上与机体的免疫功能状态具有一定的联系。细胞免疫实际上属于机体抗肿瘤免疫的重要机制，而在细胞免疫的过程中T细胞是重要的免疫调节细胞，在人体组织中发挥着重要的调节作用。

在20世纪90年代初，国外的相关研究学者就通过临床研究证实了CD4和CD25作为外周血调节性T细胞中的一类重要组成部分，在人体内不仅可以有效地对免疫性疾病的发生产生一定的抑制作用，同时对于肿瘤免疫的调节也能发挥一定的作用[7-8]。

既往临床关于非小细胞肺癌的相关研究结果证实[9-10]，对于非小细胞肺癌患者来说，往往患者确诊时间相对较晚，因此临床有效的治疗措施和方法就是采用化疗。从临床治疗效果上分析，盐酸吉西他滨联合顺铂的临床治疗效果相关较好，已经成为抗肿瘤药物的首选。

本研究结果显示，健康对照组的CD4+CD25+Foxp3+/CD4+显著的低于非小细胞癌组，且组间差异有统计学意义；不同类型的非小细胞癌患者实施治疗后，较治疗前该项指标水平得到显著降低，差异均有统计学意义（P<0.05）。

综上所述，在临床实践过程中，选择盐酸吉西他滨联合顺铂的治疗方案可以显著调节非小细胞肺癌患者的外周血调节性T细胞水平，可有效调节患者肿瘤免疫耐受，从而显著改善患者的免疫功能，是临床治疗非小细胞肺癌的理想选择。

[参考文献]

[1]专家组，梁智勇.中国非小细胞肺癌患者表皮生长因子受体基因突变检测专家共识[J].中华病理学杂志，2011， 40（10）：700-702.

[2]蔡文科，石云，赵青.哺乳动物雷帕霉素靶蛋白表达与早期非小细胞肺癌预后的关系[J].中华肿瘤杂志，2014，36（2）：120-122.

[3]孙燕，吴一龙，李龙芸，等.吉非替尼或多西他赛治疗一线化疗失败的非小细胞肺癌的临床分析[J].中华肿瘤杂志，2011，33（5）：377-380.

[4]丛莹莹，刘美艳，蔡莉.胸腔灌注奈达铂与顺铂治疗非小细胞肺癌恶性胸腔积液的疗效比较[J].中华肿瘤杂志，2010，32（6）：467-469.

[5]钱亦淳，任斌辉，田艳艳，等.偶联西妥昔单抗的金纳米颗粒治疗非小细胞肺癌[J].中华实验外科杂志，2014，31（3）：580-583.

[6]徐磊，蒋峰，杨欣，等.非小细胞肺癌组织微小RNA-145表达及其与预后的关系[J].中华实验外科杂志，2014，31（1）：177-179.

[7]鞠立霞，周彩存，唐亮，等.吉非替尼获得性耐药的非小细胞肺癌细胞株PC9/AB2相关耐药机制研究[J].中华结核和呼吸杂志，2010，33（5）：354-358.

[8]王芳，付莎，汤涛，等.非小细胞肺癌表皮生长因子受体基因突变与临床病理特征的关系[J].中华病理学杂志，2011，40（10）：664-666.

[9]冯勤，李向红，陈钊，等.非小细胞肺癌表皮生长因子受体基因突变检测及其与临床病理特征的相关性[J].中华病理学杂志，2011，40（10）：660-663.

[10]赵静，朱焱，张丽，等.非小细胞肺癌表皮生长因子受体基因突变检测及其临床意义[J].中华病理学杂志，2011， 40（10）：671-674.

（收稿日期：2014-04-25本文编辑：林利利）

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