大花红景天多糖的抗衰老作用

邓胜国 尹爱武 田 润 李探芳

(湖南科技学院，湖南 永州 425100)

大花红景天Rhodiola crenulata(Hook.f.et Thoms.)H.Ohba系景天科红景天属植物，目前，世界上有红景天90余种，我国蕴藏量和产量最大〔1〕。其含有黄酮类、有机酸、多糖及挥发油等多种成分〔2～5〕。研究表明红景天有抗肿瘤、抗辐射、抗疲劳及增强人体免疫能力等作用〔6～9〕。有文献报道红景天总甙〔10〕与红景天醇粗提物〔11〕有抗衰老作用。目前还未见红景天多糖的抗衰老作用，本研究旨在探讨红景天多糖的抗衰老作用。

1 材料与方法

1.1药物、动物、试剂及仪器 红景天购于邵东廉桥药材大市场，经湖南中医药高等专科学校田润博士准确鉴定，红景天为大花红景天的干燥根茎；超氧化物歧化酶(SOD)、丙二醛(MDA)试剂盒由南京建成生物工程公司所提供；D-半乳糖由Sigma公司提供(用生理盐水配成10%的浓度)。昆明种2月龄小白鼠80只，雌雄各半。体重18～22 g由广东省动物实验中心提供[SPF级动物]。饲养在温度(22±2)℃，恒湿(55±5)%的饲养环境中，标准饲料与自来水随机取食。Sartorius 电子天平。KD-2508-Ⅲ恒温冷冻切片机(厦门伯力电子科技有限公司)；DY89-Ⅱ组织匀浆机(浙江宁波新芝生物科技股份有限公司)；SHB-Ⅲ循环水式真空泵(郑州长城科工贸易有限公司)；N-1000S-WA旋转蒸发仪(日本EYELA)。

1.2方法

1.2.1红景天多糖溶液的制备 红景天多糖的提取纯化参照文献〔12～14〕。红景天加10倍量水加热回流提取60 min，过滤，滤渣加10倍量水再提取1次，合并2次滤液，减压浓缩至一定体积，然后加入95 %乙醇使溶液中乙醇浓度达80%，静置12 h，过滤浓缩至一定体积。在滤液中加入1/4体积的Sevage试剂(氯仿∶正丁醇=1∶1)，混匀，充分振荡30 min后，离心1 min(1 000 r/min)，分离水层和氯仿层，水层反复脱蛋白5次后减压浓缩，60℃干燥得纯化红景天多糖。经硫酸-苯酚法测定多糖的含量为71.2%。红景天多糖用生理盐水配成10 mg/ml的溶液。

1.2.2动物分组与给药 昆明种小白鼠随机分为空白组、模型组及红景天多糖低、中、高剂量组，每组16 只。空白组每日经颈背皮下注射0.5 ml生理盐水，其余各组每日经颈背部皮下注射5%D -半乳糖0. 5 ml，连续给药6 w〔15〕。给药10 d后，红景天多糖低、中、高剂量组每日灌胃给予红景天多糖溶液，给药量分别为100、150、200 mg/kg，空白组和模型组每天灌胃等量的生理盐水。

1.3生化指标及脾脏、胸腺指数测定 给药7 w后，称量小鼠体重并断头取血、分离血清，迅速取出小鼠脑、肝脏并用冰冷生理盐水清洗两次，然后用滤纸吸干并称其质量，将小鼠脑、肝脏剪碎后分别倒入匀浆瓶中迅速加入9倍体积量的生理盐水，匀浆，制备脑、肝组织匀浆。按测试盒所附方法测定SOD和MDA含量。摘取小鼠脾脏和胸腺，生理盐水洗净，滤纸吸干并称湿质量，计算脾脏指数和胸腺指数。

1.4小鼠脑神经元数的测定 取小鼠脑脑组织，用干冰快速冷冻，切片，10%甲醛液溶固定，石蜡包埋、切片，HE染色，常规透射电镜观察。每张切片上随机选取10个视野进行神经元计数，计算各组平均数。

2 结 果

2.1红景天多糖对衰老模型小鼠脾脏和胸腺指数的影响 与空白组比较，模型组小鼠脾脏、胸腺指数显著降低(P<0.01)。与模型组比较，红景天多糖各剂量组脾脏及胸腺指数显著增加(P<0.01，P<0.05)，且随剂量的增加而增加。见表1。

表1 红景天多糖对小鼠脾脏和胸腺指数的影响

2.2红景天多糖对血清、肝组织和脑组织SOD活力的影响 与空白组比较，模型组血清、肝组织、脑组织中SOD活性显著降低(P<0.01) ；与模型组比较，红景天多糖各剂量组血清、肝组织、脑组织中SOD活性显著增加(P<0.01，P<0.05)，且随高剂的增加而增加。见表2。

表2 血清、肝组织和脑组织SOD活力

2.3红景天多糖对血清、肝组织和脑组织MDA含量的影响 与空白组比较，模型组血清、肝组织、脑组织中MDA含量显著增加(P<0.01)；与模型组比较，红景天多糖各剂量组血清、肝组织、脑组织中MDA含量显著降低(P<0.01，P<0.05)，且随高剂的增加而减少。见表3。

2.4红景天多糖对小鼠脑神经元数的影响 与空白组比较，模型组小鼠脑神经元数显著降低(5 344±359 vs 7 384±681，P<0.01)；与模型组比较，红景天多糖高、中、低剂量组小鼠脑神经元数(6 741±654、6 459±604、5 770±575)显著增加〔P<0.01，P<0.05〕，且随高剂的增加而增加。

表3 血清、肝组织和脑组织MDA含量

3 讨 论

现代衰老学说认为，机体的衰老与自由基及其所诱导的脂质过氧化物对机体的损伤有关。本研究红景天多糖的抗衰老作用随剂量的增加而增强，结果提示，红景天多糖的抗氧化作用可能与提高SOD活性，增加清除机体自由基的机制有关。

4 参考文献

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