取卵日不同大小卵泡的获卵情况及卵母细胞质量差异分析

刘晓艳 陈志云 高彩凤

取卵日不同大小卵泡的获卵情况及卵母细胞质量差异分析

刘晓艳 陈志云 高彩凤

目的 探讨体外受精胚胎移植(IVF-ET)中, 取卵日卵泡直径与卵子回收率、相应卵泡获得的卵子质量、受精和卵裂的关系。方法 回顾性分析接受卵泡浆内单精子注射(ICSI)治疗的30个周期100个卵泡, 根据卵泡大小分为五组, 对五组的卵子回收率、卵母细胞的卵冠丘复合物(OCCC)评分、受精评分、卵裂评分进行比较和分析。结果 将穿刺卵泡分为五组, A组<16 mm、B组16~18 mm、C组18.5~20 mm、D组20.5~22 mm、E组>22 mm；五组的获卵率、OCCC评分、受精评分、卵裂评分差异均有统计学意义(P＜0.05)。结论 取卵日目标卵泡在16~22 mm之间成熟卵子回收率高并能获得高质量胚胎。

卵泡径线；卵母细胞；受精；卵裂

掌握合适的人绒毛膜促性腺激素(HCG)注射时机是获得高质量卵子, 提高临床妊娠结局的关键。HCG日决定主要看目标卵泡径线, 另外结合HCG日雌激素和孕激素水平。目标卵泡为何值时才是注射HCG的最佳时间,目前国内外尚无统一标准, 各文献报道也不一致。本研究主要探讨取卵日目标卵泡为何值时才能获得高质量的卵子。

1 资料与方法

1.1 一般资料 选择2013年6~12月在本院接受长方案ICSI治疗的30个周期100个卵泡患者进行穿刺抽吸, 年龄25~35岁。

1.2 超促排卵方案 治疗周期前的黄体中期应用长效GnRH-a(达菲林) 1.0~1.3 mg, 垂体达到降调后开始每天肌内注射Gn(果纳芬)150~300单位；期间根据卵泡生长速度及数量调整Gn用量, 当两个或两个以上卵泡直径≥18 mm停用Gn, 当天抽血查E2、LH、P, 10 pm注射HCG5000~10000IU；34~36 h后取卵, 之后进行ICSI, 授精后16~20 h观察受精情况, 72 h观察卵裂情况。

1.3 分组 ①取卵日行单个卵泡穿刺, 将穿刺卵泡分为五组, A组<16 mm、B组16~18 mm、C组18.5~20 mm、D组 20.5~22 mm、E组>22 mm；②从卵泡液中找到卵冠丘复合物(OCCC)并评分［1］, MII期、MI期、GV期分别评3、2、1分。③行单卵受精及单胚胎培养, 受精评分：Z1、Z2、Z3、Z4分别评为4、3、2、1分, 未受精为0分；卵裂评分分为5级, 1、2、3、4、5级分别评为5、4、3、2、1分, 未卵裂评0分。

1.4 统计学方法 采用SPSS17.0统计学软件进行处理分析,计量资料以均数±标准差( x-±s)表示, 采用t检验, 计数资料采用χ2检验。P<0.05表示差异具有统计学意义。

2 结果

2.1 五组卵泡直径与卵母细胞成熟度之间的关系 五组的获卵率分别为：90%、85%、90%、80%、50%；五组之间获卵率差异有统计学意义(χ2=13.50, P＜0.05)。五组卵泡液中成熟卵母细胞分别为11、14、17、15、10个, 各占其获卵总数的61%、82%、94%、94%、100%, 差异有统计学意义(χ2=12.01, P＜0.05)。

2.2 五组OCCC评分、受精评分及卵裂评分比较 五组OCCC评分、受精评分、卵裂评分差异有统计学意义(P＜0.05),见表1。

表1 不同径线卵泡获得卵子及OCCC评分、受精评分、卵裂评分比较( x-±s)

3 讨论

在IVF早期获取成熟卵子是一个挑战, 目前, 国外有报道至少有3个优势卵泡平均直径≥17 mm时用HCG［2］, 国内标准也不尽相同, 有的中心认为主导卵泡的平均直径有2个达到18 mm［3］给予HCG, 而有的认为至少有3个卵泡平均直径>15 mm［4］给HCG。本研究结果提示随着卵泡的增大获卵率降低, 但是卵子成熟度增加, A组虽然获卵率高, 但是小卵泡来源的卵母细胞不成熟、成熟卵受精率低、发育成高质量胚胎的能力下降, 可能由于卵泡大小和胞质成熟有关, 小卵泡来源的卵子其mRNA转录功能异常所致。E组获得卵母细胞100%成熟, 但获卵率低, 可能和卵泡径线过大有关, 超排周期卵泡发育过程中随着卵泡径线的增大卵母细胞发育过熟并导致卵母细胞的超微结构发生异常, 最终导致取不到卵。本研究还对各组卵母细胞的受精及卵裂胚胎进行评分, 发现差异有统计学意义, 说明随着卵泡径线的增加, 所获得的卵子受精评分越高, 胚胎质量越好。

总之, 本研究显示为了获得尽可能多的成熟卵子可适当推迟注射HCG时间, 但是不能无休止的推迟, 目标卵泡平均直径16~22 mm之间, 成熟卵子回收率高并能获得高质量胚胎。

［1］ 黄国宁.体外受精-胚胎移植实验室技术.北京:人民卫生出版社, 2012:238-241.

［2］ Fanchin R.Per-follice measurements indicate that anti-mullerian hormone secretion is modulated by the extent of follicular development and luteinization and may reflect qualitatively the ovarian follicular status.Fertility and Sterility, 2005,84(1):167-173.［3］ Xu YP, Cao YX, Zhang ZG, et al.Effects of follicular growth velocity on embryonic development and in vitro fertilization and embryo transfer cycles.Acta Universitatis Medicinalis Anhui, 2006, 41(4): 462-465.

［4］ 崔艳国,全松,邢福祺.COH周期中的卵泡径线大小与体外受精-胚胎移植妊娠率的相关性.广东医学, 2007,28(5):753-755.

Analysis of ovum acquisition rate on different sized follicles and oocyte quality difference

LIU Xiao-yan, CHEN Zhi-yun, GAO Cai-feng.
Reproductive Center, Huizhou People's Hospital, Huizhou 516000, China

Objective To investigate the the relationship between follicular diameter on the day of oocyte retrieval and egg recovery rate, the corresponding follicles obtained oocyte quality, fertilization and cleavage in vitro fertilization and embryo transfer (IVF-ET).Methods A retrospective analysis of accepting intra cytoplasmic sperm injection (ICSI) treatment for 30 cycles of 100 follicles, according to the size of follicles were divided into 5 groups, OCCC egg recovery rate in 5 groups, oocyte (OCCC) score, fertilization, cleavage score were compared and analyzed.Results The puncture follicles were divided into 5 groups, group A<16 mm, group B , 16~18mm, group C, 18.5~20 mm, group D 20.5~22mm, group E >22 mm; soocytes, fertilization rate, cleavage of OCCC score, cleavage score differences of 5 group were statistically significant (P＜0.05).Conclusion On the day of oocyte retrieval target follicle rate is high and can obtain high quality embryo mature egg recovery between 16~22 mm.

Follicular diameter; Oocyte; Fertilization; Cleavage

2014-03-13］

广东省惠州市科技计划课题(项目编号：003447915-0316025)

516000 广东省惠州市中心人民医院生殖中心