用酶联免疫吸附试验方法评价胶体金测试卡检测乙型肝炎病毒血清标志物的性能

刘淑芬 刘立群

(河北省迁西县人民医院检验科，河北 迁西 064300)

用酶联免疫吸附试验方法评价胶体金测试卡检测乙型肝炎病毒血清标志物的性能

刘淑芬 刘立群

(河北省迁西县人民医院检验科，河北 迁西 064300)

肝炎病毒，乙型；肝炎抗原，乙型；胶体金；酶联免疫吸附测定

在我国人群中，乙型肝炎病毒(HBV)感染率一直较高，尤其是20世纪80年代中期以前出生的人，HBV感染率超过10%[1]。目前，临床领域免疫检测乙肝五项的方法主要有凝聚试验、放射免疫测定(RIA)、酶联免疫吸附测定(ELISA)、免疫层析测定以及化学放光免疫测定(TR-FLA)[2]。其中ELISA测定乙肝五项指标具有灵敏度高、特异性好等优点，而被广泛应用于临床确诊检验。胶体金测试卡(GIGA)具有简便、快捷、不需要特殊仪器的优点，应用于急诊和人群筛查更加方便。因此，我们对比分析了ELISA检测方法和胶体金测试卡在检测乙肝五项中的符合率，结果如下。

1 材料与方法

1.1 样本 选取我院门诊和住院患者250例，男140例，女110例。

1.2 试剂 GIGA采用英科新创(厦门)科技有限公司产品。ELISA试剂盒购自北京万泰生物技术有限公司。2种试剂均在有效期内使用。

1.3 仪器 Thermo Multiskan MK3型酶标仪。

1.4 方法及结果判断

1.4.1 GIGA检测 采用免疫层析原理，其中乙肝表面抗原(HBsAg)、乙肝e抗原(HBeAg)为双抗体夹心法，乙肝表面抗体(HBsAb)为双抗原夹心法，乙肝e抗体(HBeAb)、乙肝核心抗体(HBcAb)为竞争抑制法，按说明书要求进行检测操作和判定结果。阳性结果判断：HBsAg、HBsAb、HBeAg测试卡的试纸条分别出现检测线和质控线，HBeAb、HBcAb测试卡的试纸条只出现质控线，判定为乙型肝炎阳性；测试卡未出现质控线为试剂失效。

1.4.2 ELISA检测 所有标本均用MK3型自动酶联免疫系统分析仪检测。测定HBsAg、HBsAb、HBeAg样本OD450nm值，计算S/CO≥阴性对照孔均值×2.1为阳性结果，反之为阴性结果；测定HBeAb、HBcAb样本OD450nm值，计算S/CO≥阴性对照孔均值×0.5为阴性结果，反之为阳性结果。

1.5 对比方法 以ELISA检测方法检测结果为参照标准，分别用ELISA法和GIGA法检测乙肝血清共250份，其中阳性200份，阴性50份。将2种方法对比检测的阳性血清标本按乙肝五项血清学指标分为8组。数据统计按照每种血清学指标的符合率计算。

2 结 果

分别用ELISA法和GIGA法检测乙肝血清共250份，其中阳性200份，阴性50份。按乙肝五项阳性血清指标分8组及阴性组，检测结果见表1。

表1 ELISA法和GIGA法检测乙肝五项血清指标结果 例

由表1可见，2种方法对比符合率情况，其中HBsAg符合率为98.2%(107/109)，HBsAb符合率为93.10%(54/58)，HBeAg符合率为100%(23/23)，HBeAb符合率为90.48%(76/84)，HBcAb符合率为93.06%(134/144)。而50例ELISA法阴性血清用GIGA法检测也同样全部阴性。

3 讨 论

HBV对人体有着广泛的危害，如引起人体免疫紊乱、慢性肝炎、肝硬化、肝肿瘤的发生[3]。目前，确诊检测HBV感染应以ELISA检测方法为准[4]。从我们统计的检测结果可以看出，在HBsAg、HBeAg 2项检测中，GIGA法与ELISA法的符合率较高分别为98.2%和100%。而在HBsAb、HBeAb、HBcAb 3项检测中，GIGA法与ELISA法的符合率相对要低一些，分别为93.10%、90.48%和93.06%。由于2种方法检测敏感度的差异，客观的决定了2种不同检测方法的不同用途。ELISA检测抗原(或抗体)在液相中经扩散作用，逐渐与固相表面的抗体(或抗原)结合，同时标记抗体(或抗原)也需要此过程形成标记抗原抗体复合物，中间需要洗涤显色等过程，检测时间较长。GIGA法不需要特殊设备，快速检测单个标本，易于观察结果，操作简便，特异性较高，能满足急诊的需要。在临床就诊的患者及小样本量的确诊时，必须应用灵敏度更高的ELISA方法进行乙肝五项的检测，以便于指导临床治疗和预防；对于大规模的人群筛查和急诊检测中，GIGA法的方便、快捷等优点就显得特别重要。但从实验结果表明，由于GIGA的原理及方法学差异，灵敏度稍低于ELISA，不适于住院患者和献血者，特别是手术患者的检测，且其成本高于ELISA。因此，实验室应根据需要，结合工作情况选用实验方法。

[1]韩丽蓉.乙型肝炎乙肝五项检查的临床意义[J].临床合理用药杂志，2012，5(8)：109.

[2]郝丽红，董志杰，吴佩，等.检验操作规程[M].2版.南京：京东大学出版社，1997：410-414.

[3]谢韵.浅述中医药对慢性乙型病毒性肝炎的治疗[J].医学美学美容：中旬刊，2013，(4)：130-131.

[4]赵秀英，陈俊梅，王文静，等.电化学发光法和ELISA法检测HBV表面抗体结果的比较与分析[J].北京医学，2011，(6)：461-463.

(本文编辑：石 康)

刘淑芬(1963—)，女，副主任技师，学士。从事临床检验工作。

R373.21；R392.11；R512.620.4

A

1002-2619(2014)11-1753-02

2014-03-17)