太行山区柴胡品质分析研究※

刘艳丽 王永艳 孔增科

(河北省邯郸市食品药品检验中心，河北 邯郸 056002)

制剂与质量控制

太行山区柴胡品质分析研究※

刘艳丽 王永艳1孔增科△

(河北省邯郸市食品药品检验中心，河北 邯郸 056002)

柴胡；柴胡皂甙；色谱法,薄层；色谱法,高压液相；中药鉴定

柴胡为伞形科植物柴胡BepleurumchineseDC.或狭叶柴胡BepleurumscorzonerifoliumWild.的干燥根，收载于《中华人民共和国药典》2010年版一部，是一种常用的中药材。性味辛、苦、微寒，归肝、胆、肺经，具有疏散退热、疏肝解郁、升举阳气的功效，主要用于感冒发热，寒热往来，胸胁胀痛，月经不调，子宫脱垂，脱肛等症。太行山区为柴胡主产地，药材资源丰富，品质优良。本研究对流通市场柴胡及太行山不同产地采集的柴胡进行质量比较研究分析，结果如下。

1 薄层定性分析

1.1 仪器与试药 ZF-2型三用紫外仪(上海电子仪器厂)。硅胶G薄层板(青岛海洋化工厂分厂)；5批药材(产地：甘肃；涉县栽培；武安石河湾；山西吉县；武安琅矿)；柴胡皂苷a对照品(中国药品生物制品检定所，批号：110777-200507)；柴胡皂苷d对照品(中国药品生物制品检定所，批号:110778-200506)；柴胡对照药材(中国食品药品检定研究院，批号：120992-201108)；乙酸乙酯、乙醇,甲醇均为分析纯，水为纯化水。

1.2 方法与结果

1.2.1 供试品溶液的制备 分别取各样品柴胡粉末(过四号筛)约0.5g，加甲醇20mL，超声处理10min，滤过，滤液浓缩至5mL，作为供试品溶液。

1.2.2 对照品溶液的制备 取柴胡皂苷a对照品与柴胡皂苷d对照品，加甲醇制成每mL各含0.5mg的混合溶液，作为对照品溶液。

1.2.3 对照药材溶液的制备 同“1.2.1供试品溶液的制备”制成对照药材溶液。

1.2.4 薄层定性 按照薄层色谱法(《中华人民共和国药典》一部 附录Ⅵ B)试验，吸取上述溶液各5μL，分别点于同一硅胶G薄层板上，以乙酸乙酯-乙醇-水(8∶2∶1)为展开剂，展开，取出，晾干，喷以2%对二甲氨基苯甲醛的40%硫酸溶液，在60℃加热至斑点显色清晰，分别置日光和紫外光灯(365nm)下检视。供试品色谱中，在与对照药材色谱和对照品色谱相应的位置上，显相同的荧光斑点。 见封3，图1。

2 柴胡皂苷a和柴胡皂苷d的定量分析

2.1 仪器与试药 Waters e2695高效液相色谱仪(美国)；Empower工作站；waters 2498型紫外检测器；XS105型电子天平(瑞士梅特勒)。甲醇、浓氨均为分析纯，乙腈为色谱纯，水为纯化水，柴胡皂苷a对照品(中国药品生物制品检定所， 批号：110777-200507)；柴胡皂苷d对照品(中国药品生物制品检定所，批号:110778-200506)；5批药材(产地：甘肃；涉县栽培；武安石河湾；山西吉县；武安琅矿)。

2.2 方法与结果

2.2.1 色谱条件及系统性试验 以乙腈为流动相A，以水为流动相B，进行梯度洗脱，0～50min，A：25%～75%，B：90%～10%；50～55min，A：25%；B为75%，延时10min，Sunfire C18(250mm×4.6mm,5μm)为固定相，波长为210nm，柱温：30℃，进样量：20μL。在上述色谱条件下，对照品和供试品的色谱图见图2。

2.2.2 对照品溶液的制备 精密称取柴胡皂苷a对照品0.01053g与柴胡皂苷d对照品0.01323g，置25mL量瓶中，用甲醇溶解并稀释至刻度，摇匀，作为混合对照品溶液。

2.2.3 供试品溶液的制备 分别取各样品柴胡细粉(过四号筛)约0.5g，精密称定，置具塞锥形瓶中，加入5%浓氨试液的甲醇溶液25mL，密塞，30℃水温超声处理30min，滤过，用甲醇20mL分2次洗涤容器及药渣，洗液与滤液合并，回收溶剂至干。残渣加甲醇溶解，转移至5mL量瓶中，加甲醇至刻度，摇匀，滤过，取续滤液即得。

2.2.4 线性关系的考察 取上述混合对照品溶液，分别进样5、10、20、30、50μL于高效液相色谱仪中，按上述色谱条件进行峰面积测定，以对照品浓度(mg/mL)为横坐标，峰面积为纵坐标，进行线性回归，柴胡皂苷d回归方程：Y=5E+06X+36462,r=0.999 9，结果表明柴胡皂苷d在0.1323mg/mL～1.323mg/mL浓度范围内线性关系良好。柴胡皂苷a回归方程：Y=9E+06X+509 48,r=0.999 9，结果表明柴胡皂苷d在0.1053mg/mL～1.053mg/mL浓度范围内线性关系良好。

图2 柴胡高效液相色谱图

0柴胡皂苷a、d标准品；1膜缘柴胡(甘肃)；2柴胡(涉县栽培)；3柴胡(武安石河湾)；4柴胡(山西吉县)；5柴胡(武安琅矿)

2.2.5 精密度试验 精密吸取上述混合对照品溶液20μL，重复进样5次，测定峰面积，柴胡皂苷a、柴胡皂苷d的相对标准偏差(RSD)分别为0.2%、0.2%。

2.2.6 重复性试验 取同一批供试品5份按上述供试品溶液制备方法和色谱条件进行测定，测得柴胡皂苷a、柴胡皂苷d的含量分别为1.211mg/g、2.842mg/g。

2.2.7 稳定性试验 精密吸取同一批供试品溶液20μL，每隔2h进样，共测定5次，其RSD为1.2%。

2.2.8 加样回收率试验 精密称取6份已知含量的供试品细粉约0.25g，再分别精密加混合对照品溶液1mL，按供试品溶液的制备方法和色谱条件下进行测定，柴胡皂苷a、d平均回收率为97.26%、97.83%，RSD分别为0.9%、0.7%。结果见表1。

2.2.9 样品含量测定 取样品,按上述供试品溶液制备方法制备，精密量取供试品溶液和对照品溶液20μL,注入高效液相色谱仪测定。结果见表2。

表1 回收率测定结果

表2 样品测定结果

3 讨 论

3.1 根据薄层色谱发现，与柴胡对照药材、混合对照品比较，5批柴胡在相应的位置上均含有有效活性成分柴胡皂苷a、d，其中山西吉县产柴胡斑点清晰，颜色深，其次是武安石河湾产柴胡、涉县产栽培柴胡、武安琅矿产柴胡、甘肃产膜缘柴胡，其他色斑比较深浅有所不同，说明5批柴胡药材所含成分有所差异。

3.2 通过采用液相色谱法定量测定柴胡皂苷a、d含量比较发现，涉县栽培柴胡比甘肃产膜缘柴胡中柴胡皂苷a、d的含量高出几倍，太行山区产柴胡皂苷a、d含量比《中华人民共和国药典》规定含量普遍偏高，说明太行山区产柴胡品种优良，质量上乘。

3.3 近年来药品流通市场上出售的柴胡甘肃产膜缘柴胡占较大份额，本研究通过实验数据分析比较，其所含柴胡皂苷a、d的量低于《中华人民共和国药典》规定，应引起药品生产、经营、使用机构和药品监督单位的重视。

[1]国家药典委员会.中华人民共和国药典2010年版(一部)[S].北京：中国医药科技出版社，2010: 263-264.

[2]李竞,高英，李海龙，等.太行山区柴胡中总皂苷及柴胡皂苷a、d的含量测定[J].中国医药导报,2013,10(8):124-126，129.

[3]李竞,高英，王振华，等.柴胡的质量评价研究[J].北方药学,2013， 10(6):8-10.

[4]付正良，孔增科.涉县野生柴胡资源与品质研究报告[C]//第二届全国中药商品学术大会论文集.陇西：中国商品研究编辑委员会，2011：171-175.

(本文编辑：董军杰)

※ 项目来源：河北省邯郸市科学技术研究与发展计划项目(编号：1113108018)

刘艳丽(1973—)，女，副主任药师,学士。从事药品检验及标准研究工作。

R282.5;R282.71;R284.1

A

1002-2619(2014)11-1698-03

2014-04-08)

△ 通讯作者： 河北省邯郸市食品药品检验中心，河北 邯郸 056002

1 河北省邯郸市第一医院药剂科，河北 邯郸 056001