鹿角胶的抗炎镇痛作用研究

张婧卓,林 ,律广富,李 娜,常志达,王建玮,杨 擎,林 贺

(长春中医药大学,长春 130117)

鹿角胶是鹿科动物梅花鹿或马鹿的角煎熬而成的胶块，又称“鹿角仙胶”，始载于《神农本草经》，主产于东三省及北京、上海等地。本品味甘、咸，性温，具有温补肝肾，益精血，止血的功效[1]。近年来研究发现鹿角胶有增加白细胞，治疗大脑水肿等作用，用于治疗癌症化疗后的后遗症。临床还应用于治疗血小板减少症、白细胞减少症、再生障碍性贫血等，能使血象及临床症状均获得不同程度的好转[2]，本研究旨在通过建立炎症和疼痛模型以探讨其抗炎、镇痛作用，为开辟新的用药途径、扩大其临床应用提供科学依据。

1 材料与方法

1.1 动物及饲养条件 健康昆明种小鼠，清洁级，体质量18～22 g，雌雄皆用；健康SD大鼠，雄性，清洁级，体质量180～220 g，以上动物均由吉林大学实验动物中心提供，许可证：SCXK(吉)-2013-0005。室内光照为自然昼夜交替，温度为15～25 ℃，相对湿度为45%～65%，通风良好，环境相对安静。自由摄食及饮水。

1.2 药品、试剂及仪器 鹿角胶(长春中医药大学研发中心提供)；阿司匹林泡腾片(规格:0.5 g/片，阿斯利康制药有限公司);JA2003B电子天平(上海越平科技仪器有限公司)；RB-200智能热板仪(四川成都泰盟科技有限公司)；SH-耳肿打孔器(上海嘉适科学仪器有限公司)；PV200-足跖容积测量仪(山东泰盟科学仪器有限公司)。

1.3 分组及给药剂量 耳廓肿胀分组:取60只雄性昆明小鼠随机分为5组，每组12只；足跖肿胀组：取30只雄性SD大鼠随机分为5组，每组6只；热板法分组：取热板法筛选合格的60只雌性昆明小鼠随机分为5组，每组12只；醋酸扭体分组：50只雄性昆明小鼠随机均分为5组，4个实验均设正常对照组(生理盐水组)，阳性药对照组(阿斯匹林0.2 g/kg)，鹿角胶高、中、低剂量组,其高、中、低剂量组浓度分别为0.6、0.3、0.1 g/kg。

1.4 对二甲苯所致小鼠耳廓肿胀的影响[3-4]各组小鼠灌胃给予相应受试物，连续7 d，末次给药1 h后，于小鼠右耳正反两面均匀涂抹二甲苯0.02 mL/只致炎,左耳不涂二甲苯为对照。致炎1h后将小鼠颈椎脱臼处死，用直径6 mm的打孔器分别在小鼠左右耳同一部位打下圆耳片，精密称量，右耳与左耳质量之差即为肿胀度，计算小鼠耳廓肿胀抑制率。耳肿胀抑制率(%)=(正常对照组平均耳肿胀度-给药组平均耳肿胀度)/正常对照组平均耳肿胀度×100%。

1.5 对角叉菜胶致足跖肿胀的影响[5]各组大鼠连续灌胃给予相应受试物7 d，第8天于大鼠右后足掌心向踝关节方向皮下注射1%角叉菜胶混悬液0.1 mL/只致炎，在致炎后的2，4，6 h分别测量足跖容积。

1.6 对热板法致痛的影响[6]取筛选过的合格小鼠(痛阈值在5～30 s内)，分组及给药方法同1.3项下，连续灌胃给予相应受试物7 d，于末次给药后1，2，4 h分别将小鼠逐只放于(55.0±0.5) ℃热板仪上，记录小鼠舔后足反应所需时间(疼痛反应潜伏期)作为小鼠的痛阈值，如痛阈值超过60 s，即停止测试而按60 s计。

1.7 对醋酸致小鼠扭体反应的影响[7]各组小鼠连续灌胃给予相应受试物7 d，于末次给药1 h后，小鼠腹腔注射0.8%，冰醋酸0.1 mL/10 g，记录小鼠扭体潜伏期及10 min内各组小鼠出现扭体反应的次数。

2 结果

2.1 鹿角胶对二甲苯所致小鼠耳廓肿胀的影响 与正常对照组比较，鹿角胶高、中剂量对二甲苯引起的小鼠耳廓肿胀有抑制作用(P<0.05)，其中鹿角胶高剂量组活性最强，其肿胀抑制率为45.41%，见表1。

表1 鹿角胶对二甲苯致小鼠耳廓肿胀的影响

注：与正常对照组比较，#P<0.05，##P<0.01。

2.2 鹿角胶对角叉菜胶所致足跖肿胀度的影响 与正常对照组比较，致炎后2h，鹿角胶高、中剂量组均对角叉菜胶所致足跖肿胀度有极显著抑制作用(P<0.01)，低剂量组对其肿胀有明显抑制作用(P<0.05)；致炎后4 h,鹿角胶高、中剂量均对角叉菜胶所致足跖肿胀度有明显抑制作用(P<0.05)。见表2。

表2 鹿角胶对角叉菜胶致大鼠足跖肿胀的影响

注：与正常对照组比较，#P<0.05，##P<0.01

2.3 鹿角胶对热板法所致小鼠疼痛的影响 与正常对照组比较，鹿角胶高剂量组在药后1,2 h小鼠舔足时间延长(P<0.05)，鹿角胶中剂量组2 h后小鼠舔足时间延长(P<0.05)，说明鹿角胶具有镇痛作用。见表3。

表3 鹿角胶对小鼠热板致痛实验的影响

注：与正常对照组比较，#P<0.05，##P<0.01

2.4 鹿角胶对醋酸致小鼠扭体反应的影响 与正常对照组相比，无论是潜伏期还是扭体次数，鹿角胶高剂量组均有统计学意义(P<0.05)。见表4。

表4 对小鼠醋酸扭体反应的影响

注：与正常对照组比较，#P<0.05，##P<0.01

3 小结

本研究采用二甲苯致小鼠耳廓肿胀和角叉菜胶致大鼠足跖肿胀2种非特异性炎症模型评价鹿角胶对早期急性炎症的影响；以醋酸致小鼠扭体和热板法2种用于镇痛药粗筛的经典常用方法评价鹿角胶的镇痛作用。本实验结果显示，与正常对照组比较，除鹿角胶低剂量组的镇痛作用和对耳肿胀的抑制作用无统计学意义外，各剂量的鹿角胶均有显著的抗炎和镇痛作用(P<0.05，P<0.01)。鹿角胶高剂量在二甲苯所致小鼠耳廓肿胀及角叉菜胶所致足跖肿胀度抗炎实验和热板法镇痛实验中均显示显著的药理活性。数据分析可见，鹿角胶的抗炎镇痛作用与浓度不成正比关系，但很明显其高剂量的抗炎镇痛作用要比低剂量和中剂量的抗炎镇痛作用好很多。本实验结果提示鹿角胶有明显的抗炎、镇痛作用，为扩大鹿角胶的临床应用范围和进一步的研究提供了科学依据。

[1]任仁安.中药鉴定学[M].上海:上海科学技术出版社,1986:124.

[2]陈富军,白克杰,方玉先,等.略述鹿角胶的临床应用及现代研究[J].光明中医,2002,17(5):50-51.

[3]陈奇.中药药理实验方法学[M].北京:人民卫生出版社,1994:70.

[4]徐叔云,卞如濂,陈修.药理实验方法学[M].3版.北京:人民卫生出版社,2002:882.

[5]李春子,李雪婷,王沛,等.痛风宁抗炎镇痛抗痛风作用研究[J].长春中医药大学学报,2010,26(5):651-652.

[6]刘齐林,何欢,赵士彦,等.痛风灵抗炎、镇痛、抗痛风作用研究[J].中国实验方剂学杂志,2009,15(2):74-75.

[7]张啸环.桂枝附子汤的抗炎镇痛作用试验研究[J].长春中医药大学学报,2007,23(5):17-18.