基于动态倍率系数法光纤药物溶出度过程分析奋乃静片溶出度

李建光， 张 露， 李新霞

(新疆医科大学药学院， 乌鲁木齐 830011)

溶出度是一种模拟口服固体制剂在胃肠中崩解和溶出的体外简易试验方法。通过体外溶出度试验研究，对药品的内在工艺品质进行评估[1]。目前国内外测定药物溶出度的方法仍然以手工取样测定为主，不仅操作繁杂，并且得到的数据不完整，人为误差较大，尤其对于小规格药物，误差影响更为显著，而且手工取样难以准确了解药物溶出的全过程[2]。光纤药物溶出度实时测定仪(FODT)集溶出度试验与分析检测于一体，通过光导纤维将光源信号直接导入溶出杯中，根据药物的光谱特性选择合适的探头，药物溶出过程浓度的变化引起光信号的改变，通过数学模型消除背景干扰，经软件系统编译后实现对药物溶出过程的原位和实时测定，可获得药物溶出度的过程溶出曲线，反映药物的真实溶出过程[3-4]。

奋乃静(Perphenazine)为吩噻嗪类的呱嗪衍生物，属于抗精神病药。奋乃静片规格很小，标示量为2 mg，相对累积溶出度100%时吸光度值为0.32，在预试验过程中发现辅料对样品吸光度值有干扰，且辅料的吸收不是恒定值，是1条有斜率的曲线。系数倍率法在组分的测定波长处建立系数倍率法数学模型，扣除辅料的吸收。本实验参照文献[5-10]的方法利用光纤药物溶出度实时测定仪，采用动态倍率系数法得到数学模型，实时扣除干扰，建立奋乃静片体外溶出度过程分析方法。

1 仪器与试药

紫外可见分光光度计(日本岛津，型号：2550)，光纤药物溶出度实时测定仪(新疆富科思生物技术发展有限公司，FODT-601型)，奋乃静片(江苏黄河药业股份有限公司,批号：130322)，奋乃静对照品(中国药品生物制品检定所，批号：100133-200602)，聚山梨酯80(南京威尔化工有限公司，批号：120824)，乙醇(分析纯批号：140128)，水为脱气蒸馏水，其他试剂均为分析纯。

2 方法与结果

2.1溶液的配制

2.1.1 溶出介质 称取30 g聚山梨酯80，加水定容至10 000 mL，摇匀即得0.3%聚山梨酯80溶液。

2.1.2 对照品溶液的配置 精密称取奋乃静对照品0.011 1 mg于50 mL量瓶中，加无水乙醇完全溶解稀释至刻度，分别精密量取1.5、2.5、3.5、4.5、5.0 mL置于250 mL量瓶中，用0.3%聚山梨酯80溶液定容至刻度，浓度分别为1.332、2.220、3.108、3.996、4.440 μg/mL，相当于奋乃静片相对累积溶出度为33.3%、55.5%、77.7%、99.9%、111.0%的系列对照品溶液。

2.2探头及测定波长的选择取相对累积溶出度为99.9%的奋乃静对照品溶液，于FODT-601对照品模式下，采用5 mm(10 mm光程)探头，在200～600 nm波长范围内扫描吸收光谱，结果奋乃静在259 nm波长处有最大吸收，吸光度为0.3～0.7，因此选择5 mm探头，测定波长为259 nm。

2.3系数倍率法消除辅料干扰取自身对照品溶液及此溶液过滤后的续滤液，在 FODT 系统进行紫外扫描(图1) 。

图1 自身对照品溶液过滤前后紫外吸收光谱

吸收光谱显示，过滤前有辅料的样品溶液在410～600 nm范围内，吸光度不为零而是1条吸光度逐渐减小的斜线，说明自身对照品溶液未过滤时溶液中有辅料的干扰，故以波长为横坐标，在同一波长处用未过滤溶液的吸光度值减去过滤后溶液的吸光度值，以此差值为纵坐标回归，可以得到辅料的吸收曲线。

2.4方法学考察

2.4.1 标准曲线的建立 取上述系列浓度对照品溶液在FODT-601对照品模式下6个通道分别测定吸光度值(n=6)，以吸光度为横坐标，以相对百分浓度为纵坐标进行线性回归，1～6通道回归方程及相关系数分别为：Y=304.56X+5.069 6，r=0.998 9；Y=298.82X+7.013 5，r=0.999 3；Y=302.0 9X+3.811 3，r=0.999 3；Y=302.9 2X+4.165 0，r=0.998 0；Y=300.49X+4.417 5，r=0.998 5；Y=297.47X+3.447 5，r=0.998 2。

2.4.2 精密度试验 将“2.2”项下系列浓度标准溶液在FODT“溶出度测定”模式下，输入标准曲线方程，采用FODT 测定，考察日内、日间精密度，结果日内精密度分别为1.98%、2.25%、2.46%、3.04%、2.58%；日间精密度分别为3.32%、2.85%、3.50%、4.02%、3.26%。

2.4.3 回收率试验 称取5片奋乃静片，精密称定，平均片重为0.104 88 g，精密称取药品粉末0.105 62 g置于500 mL量瓶中，超声40 min使其充分溶解，溶出介质稀释至刻度，摇匀，即得自身对照品溶液，相对百分浓度为100.7%。以3份自身对照品溶液作为本底，分别加高中低浓度为3.108、3.996、4.440 μg/mL的对照品溶液，采用FODT测定，经计算回收率分别为99.3%、99.7%、100.2%，相对标准偏差(RSD)分别为1.20%、1.85%、2.45%(n=6)。

2.5奋乃静片溶出度过程分析奋乃静片溶出度测定条件参照《中国药典》奋乃静片溶出度的检测方法与条件[11]，转篮法，温度：(37±0.30)℃，转速：100 r/min，溶媒：500 mL，0.3%聚山梨酯80溶液，溶出时间：45 min。

FODT采用倍率系数法用于消除辅料的干扰，在溶出度模式下输入标准曲线，将6片奋乃静片同时放入溶出杯中，所有操作均由计算机控制，FODT 测定奋乃静片的溶出度，监测120 min，获得溶出曲线。奋乃静片光纤实时溶出度曲线显示，奋乃静片在0～5 min时基本没有溶出，5～25 min时快速释放，25 min时5片药已基本完全溶出，相对百分溶出度均在80%以上，但有1片药溶出63%，30 min后溶出曲线已基本走平，药片完全溶出，见图2；同时于17、60 min进行手动取样，平行操作，按照《中国药典》方法测定药物溶出度，进行对照实验。手动取样时取样针位置均在光纤探头同一水平面上，取样后溶液均用0.45 μm滤头过滤，并弃去前2 mL滤液，作为供试品溶液，照紫外可见分光光度法，在259 nm的波长处测定吸光度，计算每片药的溶出量，与光纤检测的溶出度值比较其差值。奋乃静片在上述3个时间点处手动取样测定吸光度，经计算溶出度后与光纤比较，得出差值。在10 min时光纤与手动平均相差4.15%，误差较大，原因是此时药片快速溶出，手动取样与光纤检测时间不可能完全一致，在微小的时间差内药片溶出迅速，故产生较大误差，而FODT为计算机操作，实时检测药物吸光度，避免了人为操作产生的误差，精准反映药片实时溶出结果。在17 min时药物平均相对百分溶出度已达到77%，药物基本溶出，光纤与手动平均仅相差1.90%。60 min时药物平均相对百分溶出度已达到95%，药物完全溶出，光纤与手动平均仅相差1.53%，见表1。

图2 奋乃静片光纤实时溶出度曲线

表1 FODT与紫外分光光度法溶出百分率比较/%

3 结论

FODT 法测定溶出度时光纤探头始终处于溶出液中，溶出液为一浑浊体系，辅料对测定药物的吸光度造成干扰，采用动态倍率系数法可消除辅料对测定值的干扰。

奋乃静片在5～10 min时溶出度快速达到40%，溶出速率较快，人工取样在这一时间段很难做到取样一致；而FODT法探头始终处于溶出液中，每 10 s采集1次数据，保证了数据获取的一致性。

奋乃静片的标示量很小，100%溶出时最大浓度为4 μg/mL，在过滤和稀释过程很少的吸附就会引入较大的误差。FODT法采用数学模型，无需取样，减少了稀释等操作带来的误差。本研究为快速释放及小规格药物溶出度过程分析提供了一种可以借鉴的方法。

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