高效液相色谱法测定扶胃平胶囊中黄芩苷含量

郑美善，崔永学，崔 铉

（吉林省延边食品药品检验所，吉林 延吉 133000）

扶胃平胶囊是由黄芪、党参、丹参、吴茱萸、三七、枳壳、莪术、黄连等15味药组方的复方制剂，具有活血化瘀、祛腐生肌、消肿止痛、止血等功效，主要用于胃、十二指肠溃疡等症。本制剂的原质量标准无含量测定方法，为有效控制该制剂的质量，现采用高效液相色谱（HPLC）法对方中黄芪所含黄芪苷进行了含量测定，现报道如下。

1 仪器与试药

Younglin高效液相色谱仪，Younglin Autochro－2000工作站；CQX25－06型超声波清洗器（上海必能信超声有限公司）。黄芩苷对照品（中国药品生物制品检定所，供含量测定用，批号为110715－200514）；甲醇为色谱纯，水为超纯水，其他试剂均为分析纯；扶胃平胶囊（吉林省敦化市医院制剂室自制药剂，批号20110101，20110102，20110103）。

2 方法与结果

2．1 色谱条件与系统适用性试验

色谱柱：用十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂的kormasil C18柱（200 mm ×4．6 mm，5 μm）；流动相：甲醇 －水 －磷酸（47 ∶53 ∶0．2）；检测波长：280 nm；流速：1 mL ／min；进样量：10 μL，柱温：35℃。理论板数按黄芩苷峰计算不低于2 500。在此色谱条件下，色谱图见图1。

2．2 溶液制备

精密称取黄芩苷对照品适量，加甲醇制成每1 mL含60 μg的溶液，即得对照品溶液。取本品10粒的内容物，研细，取约1 g，精密称定，置具塞锥形瓶中，精密加入甲醇50 mL，密塞，称定质量，超声处理30 min，放冷，再称定质量，用甲醇补足减失的质量，摇匀，滤过，取续滤液，即得供试品溶液。

2．3 方法学考察

阴性对照试验：取按处方比例及工艺配制缺黄芩的阴性样品，按供试品溶液制备的方法制备阴性对照品溶液，按上述条件依法测定。结果表明，在黄芩苷峰位处，阴性对照品溶液无干扰，见图1。

线性关系考察：精密量取对照品贮备液（0．201 g／L）0．5，l．0，1．5，2．0，2．5，3 mL，分置 5 mL 容量瓶中，加甲醇稀释至刻度，摇匀，作为对照品溶液。精密吸取各对照品溶液10 μL，分别注入液相色谱仪，记录HPLC色谱图，以黄芩苷进样量为横坐标（X）、峰面积值为纵坐标（Y）绘制标准曲线。回归方程为Y＝0．000 1X＋0．006 3，r＝0．999 7（n＝6）。结果表明，黄芩苷在0．201 0 ～1．206 0 μg范围内与峰面积呈良好线性关系。

精密度试验：取同一对照品溶液10 μL进样测定，重复操作6次。结果黄芩苷峰面积积分值RSD为0．8%（n＝6），表明方法精密度良好。

图1 高效液相色谱图

稳定性试验：取同一批供试品溶液（批号为20110101），分别于 0，2，4，6，8 h 时测定，记录色谱图。结果的RSD＝0．8% （n＝5），表明供试品溶液在8 h内基本稳定。

重复性试验：取同一批供试品6份（批号为20110101），分别精密称定，按上述供试品溶液制备的方法和色谱条件测定。结果RSD为0．9%（n＝6），表明方法重复性良好。

加样回收试验：密称取己知含量的样品（批号为20110101，规格为 1．05 mg ／粒）0．5 g，精密称定，共取 6 份，分别精密加入黄芩苷对照品（0．041 9 g ／L）适量，按 2．2 项下方法制备，依法测定，计算回收率。结果见表1。

表1 黄芩苷加样回收试验结果（n＝6）

表2 样品含量测定结果（mg／粒）

2．4 样品含量测定

取3个批号的样品，依法测定，结果见表2。

3 讨论

取样品1 g，依法操作，对不同超声时间的提取效果进行了考察，结果超声30 min即可。

参照2010年版《中国药典（一部）》方法，分别用甲醇和70%乙醇，根据所得色谱峰的情况及回收率测定结果，确认用甲醇提取的分离效果更好。

黄芩为扶胃平胶囊中的主要药材之一。参考文献[1]用HPLC法测定扶胃平胶囊中的黄芩的主要成分黄芩苷的含量，出峰时间适宜，阴性对照无干扰，样品峰形和分离效果好。HPLC法简便、灵敏、重现性好，测定结果准确、可靠，可用于该制剂的含量测定和质量控制。

[1]国家药典委员会．中华人民共和国药典（一部）[M]．北京：化学工业出版社，2010：282．