血清胸苷激酶1在食管鳞癌中的应用价值

徐 玥，孙国平

（安徽医科大学第一附属医院肿瘤内科，安徽 合肥 230022）

血清胸苷激酶1在食管鳞癌中的应用价值

徐 玥，孙国平

（安徽医科大学第一附属医院肿瘤内科，安徽 合肥 230022）

目的 探讨血清胸苷激酶1（thymidine kinase 1，TK1）在食管鳞癌患者中的检测水平及临床意义。方法 利用免疫增强化学发光法共检测100例食管鳞癌患者及60例健康成人血清 TK1（S-TK1）水平，40例患者术前及术后 TK1的变化，及100例患者血清TK1与TNM分期、淋巴结转移的关系。结果 食管鳞癌组S-TK1阳性率（P＜0.01）及TK1值（P＜0.001）明显高于健康对照组；术后组S-TK1阳性率（P＜0.01）及 TK1值（P＜0.001）均较术前组有所降低。TNMⅢ+Ⅳ期、有淋巴结转移者 S-TK1水平分别较Ⅰ+Ⅱ期（P＜0.05）、无淋巴结转移者（P＜0.05）高。结论 血清S-TK1检测在食管鳞癌患者的诊断、指导治疗、判断预后中均具有重要临床意义。

胸苷激酶1；食管癌；肿瘤标志物

食管癌发病率居中国各类恶性肿瘤第5位，死亡率居第4位。在我国，尤以食管鳞癌为主，食管鳞癌已成为我国卫生部确定的十大特色肿瘤之一。随着淋巴结清扫范围扩大、胸腔镜技术应用及放化疗等综合治疗手段日益更新，食管癌患者生存率及生活质量有所提高，但远期效果仍不尽如人意［1］。因此需要寻找更有效、更精确的早期筛查食管癌的方法，提高早期诊断率，进而改善患者预后，延长生存期。TK1（胸苷激酶1）是一种与 DNA合成和修复密切相关的酶，在恶性肿瘤患者中，血清TK1（S-TK1）大于95%的活性是来自恶性细胞。因此，S-TK1是肿瘤细胞增殖的良好指标［2］。

本实验利用免疫增强化学发光法共检测100例食管鳞癌患者及60例健康成人血清 TK1，随机抽取40例食管癌患者，随访其术后1个月血清 TK1。研究食管鳞癌患者与健康成人血清 TK1表达的差异，术前及术后 TK1的变化，及其与TNM分期、淋巴结转移的关系。

1 材料与方法

1.1 标本收集 食管鳞癌病例共100份，均来自安徽医科大学2013年 3—9月经术后病理证实患者。其中男性 68例，女性32例，年龄为 37～79岁。健康对照组共60例，均来自我院健康志愿者，其中男性 40例，女性20例，年龄 22 ～60岁。健康志愿者排除心、肺、肝、肾等重要疾病及肿瘤病史，排除明显增殖性疾病，如乳腺增生、前列腺增生、脂肪肝等，出血性外伤，女性排除生理期。所有样本均为受检者知情同意后采集。

1.2 方法 于清晨空腹采集受检者静脉血 2～4 mL（EDTA抗凝管），在3 h内3 000 r·min-1离心 10 min，取上层血浆300～400 μL，转移至EP管中，标号并置于 -20℃冰箱保存备检。采用深圳华瑞同康技术有限公司所提供的试剂盒及CIS-1型化学发光数字成像分析仪，利用免疫增强化学发光法检测 TK1。TK1＞2 pmol·L-1判断为阳性结果。

1.3 数据分析 使用 SPSS19.0软件，所测数据计量资料采用均数 ±标准差表示，均先行正态性检验。正态资料的两两比较采用独立样本或配对样本 t检验，非正态资料则行秩和检验，计数资料采用常规或配对 χ2检验。P＜0.05为差异有统计学意义。

2 结果

2.1 食管鳞癌组和健康对照组 S-TK1值的差异 食管鳞癌组 S-TK1阳性者73例，阳性率为 73%；健康对照组阳性者6例，阳性率为10%，食管癌组S-TK1阳性率明显高于健康对照组，差异均有统计学意义（P＜0.05），见表1。

2.2 术前组和术后组 S-TK1值的比较 在上述 100例食管鳞癌患者中随机抽取 40例，统计其术前及术后 S-TK1阳性率见表 2，术后组 S-TK1阳性率（χ2＝19.36＞χ2（0.01，1）＝6.63，P＜0.01）明显低于术前组。而术后组 S-TK1值（d± Sd＝1.27±1.55，P＜0.001）也较术前组有所降低，差异有统计学意义，见表2。

2.3 S-TK1值和 TNM分期与淋巴结转移的关系 TNMⅠ

+Ⅱ期 S-TK1值与Ⅲ+Ⅳ期相比较低，差异有统计学意义（P＜0.05），见表3。淋巴结转移组S-TK1水平较无淋巴结转移组高，差异有统计学意义（P＜0.05），见表3。

表1 各组 S-TK1值比较

表2 40例食管癌患者术前与术后 S-TK1阳性例数比较

表3 TNM分期与淋巴结转移与 S-TK1关系

3 讨论

TK1是嘧啶补救途径中的一种细胞周期依赖性酶，并可催化一磷酸胸苷磷酸化，生成脱氧胸苷的三磷酸盐 dTTP （deoxy-thymidine-tri-phosphate）［3］。TK有两种形式：一种是胞浆形式（TK1），另一种是线粒体形式（TK2）［4］。TK1在非增殖细胞中水平很低，但在增殖细胞和肿瘤细胞的细胞周期中，从 G1晚期到 S晚期或G2早期显著增加，在有丝分裂期消失［2，5］，这可能是因为肿瘤细胞多在G2／S期死亡，而正常细胞多在 G1期死亡［6］。这使得 TK1成为细胞增殖和肿瘤生长的重要标志。S-TK1活性已被用来监测肿瘤转移的程度，并判断急、慢性白血病，肺癌、胃癌，膀胱癌和肾癌，乳腺癌和宫颈癌、恶性黑色素瘤等疾病的预后［7-8］。

本实验结果提示食管癌患者 S-TK1水平及阳性率均较健康对照组明显升高，这与肿瘤负荷，造成细胞增殖旺盛有关。而术后1个月患者 S-TK1水平及阳性率较术前明显降低，考虑为肿瘤负荷降低，细胞增殖率亦较术前有所降低导致。另外，TNM分期较晚，有淋巴结转移者 S-TK1水平较高，推测也与细胞增殖密切相关。

过去的研究表明TK1水平可评估手术及放化疗疗效，监测肿瘤局部及远处复发，因此在患者放化疗过程中可进行跟踪检测，以判断放化疗有效性，提高治疗效率［9-10］。有研究证实 S-TK1可预测乳腺癌患者无进展生存期（progression-free survival，PFS），并且是总生存期（overall survival，OS）的独立预后因素，显示出S-TK1在判断肿瘤患者预后方面的重要意义［11］。另外 TK1不具有器官特异性，已有相关报道指出，TK1结合器官或组织特异性的肿瘤标志物，或者联合3′-脱氧-3′-18F-氟代胸苷3′-deoxy-3′-［18F］-fluorothymidine（18F-FLT）PET／CT显像共同监测肿瘤疾病，可提高诊断的敏感性和特异性［12-14］，这为在体检中进行肿瘤的筛查提供了更便利的手段。

4 结论

本实验由于观察样本量及随访时间的限制，对于 S-TK1作为血清肿瘤标志物在全身多种肿瘤的诊断、疗效评估、判断预后、监测复发等方面的应用前景有待于进一步研究拓展。

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Application value of thymidine kinase 1 in esophageal squamous cell carcinoma

XU Yue，SUN Guo-ping
（Department of Oncology，The First Affiliated Hospital of Anhui Medical University，Hefei，Anhui 230022，China）

Objective To investigate the level and clinical significance of serum TK1 in patients with esophageal squamous cell carcinoma.Methods A hundred samples collected from esophageal cancer patients and 60 samples from healthy adults were measured for the level of serum TK1 by immune enhanced chemiluminescence method.Then the 40 patients’serum TK1 were compared before and after operation.Finally，we analyzed the correlation between the level of serum TK1 from 100 patients and the TNM stages，as well as lymph node metastasis.Results The positive rate（P＜0.01）and the level of TK1（P＜0.001）from esophageal cancer guoup and pre -operation group were higher than that from healthy group and post operation group，respectively.The level of TK1 fromⅢ+Ⅳstages and lymph node metastasis ones were also higher than that fromⅠ+Ⅱstages（P＜0.05）and lymph node metastasis-free ones（P＜0.05）.Conclusions Serum TK1 testing shows critical clinical significance in diagnosis，treatment and prognostic judgment of esophageal squamous cell carcinoma patients.

thymidine kinase 1（TK1）；esophageal cancer；tumor markers

10.3969／j.issn.1009-6469.2014.05.052

2013-11-29，

2013-12-28）

孙国平，男，主任医师，博士生导师，研究方向：肿瘤个体化治疗，E-mail：sunguoping＠ahmu.edu.cn