HPLC法测定天王补心丸丹参中丹参素钠的含量

2014-07-05孙雪

中国药物经济学 2014年2期

孙雪

孙雪

目的测定天王补心丸丹参中丹参素钠的含量。方法用HPLC法定量测定天王补心丸中丹参的含量。结果丹参素钠的线性范围为12.8µg·mL-1～128.0µg·mL-1（r=0.9991，n=5）；平均回收率为94.6%。结论该方法准确可靠，可用于天王补心丸丹参中丹参素钠的含量测定。

HPLC法；天王补心丸；丹参素钠

天王补心丸的检验方法现收载于《中国药典》2010年版二部[1]，由丹参等十六味中药组成，其中丹参作为主药，但该版药典未对丹参进行定量检测，本实验采用HPLC法测定天王补心丸丹参中丹参素钠的含量。

1 仪器与试药

1.1 仪器 Agilent1100高效液相色谱仪；BP110S电子天平。

1.2 试药甲醇为色谱纯，水为纯化水，其它试剂为分析纯；丹参素钠对照品（批号：11085-201205，中国药品生物制品检定所）；天王补心丸（赤峰丹龙药业有限公司，批准文号：国药准字 Z15021315，生产批号：20120908）。

2 含量测定

2.1 色谱条件[2]C18 200mm×4.65µm；以甲醇-1%冰醋酸（20:80）为流动相；检测波长为281nm；检测器：Agilent1100 DAD检测器；工作站型号：G2170AA G2180AA；柱温35℃。进样量：10µl；流速：1.0ml/min，见图1。

图1 王补心丸HPLC色谱图（a.对照品；b.样品；c阴性对照）

2.2 对照品溶液的制备精密称定丹参素钠对照品适量，加甲醇配成每1ml含丹参素64µg，即得。

2.3 供试品溶液的制备取本品大蜜丸1.1g，置锥形瓶中，加50%甲醇加热回流5h，放冷，过滤，至20ml的量瓶中，加 50%甲醇至刻度，进样前就0.45µm滤过。

2.4 阴性对照溶液的制备按处方比例制成阴性对照品，同供试品的制备方法制成阴性对照溶液。

2.5 线性关系的考查精密称定丹参素钠对照品0.01288g，置100ml容量瓶中，加50%甲醇溶解至刻度，摇匀，做为贮备溶液，分别吸取1、2、3、5、10ml，置10ml容量瓶中，分别加甲醇稀释至刻度，摇匀。按上述色谱条件测定，得回归方程：Y=1.45 ×104X－9.955×103，r=0.9991。结果表明，丹参素钠在12.8µg·mL-1～128.0µg·mL-1范围内具有良好的线性关系。

2.6 精密度试验精密吸取上述对照溶液10µl，连续进样5次，记录峰面积，RSD为0.75%（n=5）。结果表明仪器具有良好的精密度。

2.7 重复性试验取供试品（批号：101102），照2.1方法配制5份供试液，按上述条件测定，每丸含丹参按丹参素钠计，大蜜丸为0.560mg，RSD为0.45%（n=5）。结果表明重复性良好。

2.8 稳定性试验精密吸取同一批供试品溶液各10µl，分别在0、3、6、9、12、18h测定峰面积值的变化，结果RSD为0.8%。

2.9 加样回收率试验精密称取已知丹参素钠含量的天王补心丸（批号：120507）6份，每份称重约为 0.55g，分别精密加入丹参素钠对照品溶液（0.28mg/ml）1.0ml，照2.3制备待测溶液，按2.1测定，结果平均回收率为94.6%，RSD为1.9%。测定结果见表1。