白背毛木耳枝条菌种的制作

徐兵，戴蔡荣，郑丽雪，汤文，冀宏

（常熟理工学院生物与食品工程学院，江苏常熟215500）

白背毛木耳枝条菌种的制作

徐兵，戴蔡荣，郑丽雪，汤文，冀宏*

（常熟理工学院生物与食品工程学院，江苏常熟215500）

用3种不同材质的枝条为材料制作白背毛木耳枝条菌种，然后用制作的枝条进行菌种扩大栽培。以菌丝长满袋时间为指标，考查菌丝对不同材质枝条的吃料深度，确定了经过打毛处理的竹筷为白背毛木耳袋栽的最适宜枝条，枝条接种根数为2根。在培养温度26℃下，以竹筷为枝条菌种的菌包平均生产周期为21 d，相比传统栽培方式缩短了16 d。

白背毛木耳；枝条菌种；制作

白背毛木耳 （Auricularia polytricha）隶属于担子菌亚门、层菌纲、木耳目、木耳科、木耳属中的毛木耳种[1]，20世纪末由台湾地区引进，是国际市场需求的主要毛木耳品种[2]。

在食用菌袋栽时利用枝条菌种栽培是一种新兴技术，任桂梅[3]等的研究表明：枝条种与木屑种相比，枝条种菌丝生长速度更快、长势更好，且单位接种量是后者的1.5倍～2倍。吴华军等[4]采用的长枝条菌种法具有发菌快、周期短、菌龄整齐一致，接种方便且成本低等优点。姜涛[5]等报道了用枝条菌种生产香菇栽培种较传统的生产方法具有以下优势：①操作简便，感染率低；②菌龄上下一致，菌种纯度高，抗杂力强；③培养周期短，节省燃料；④扩繁指数提高2倍～3倍。

本实验以白背毛木耳为研究对象，通过比较不同枝条制作的枝条菌种生产食用菌的生产周期，筛选出适宜的枝条及接种量来完善枝条菌种栽培技术，以期为枝条菌种在生产中的应用提供参考。

1 材料与方法

1.1 材料

1.1.1 供试菌种

白背毛木耳：常熟理工学院微生物学实验室提供。

1.1.2 枝条材质

木筷、竹筷、一次性筷子。

1.1.3 培养基

斜面培养基：PDA培养基[6]。

制种栽培料：木屑40%、棉籽壳50%、麸皮8%、石膏粉1%、石灰粉1%，含水量60%。

扩培栽培料：棉籽壳44%、木屑42%、麸皮10%、生石灰2%、石膏粉1%、葡萄糖1%，含水量60%。

1.2 方法

1.2.1 枝条预处理

将3种不同材质的枝条统一截成7.5 cm，用1%的生石灰水浸泡4 d～5 d，使枝条吸透水。然后将半数的每种枝条进行打毛，使枝条表面变粗糙。

1.2.2 菌种活化

配制PDA培养基，分装试管，灭菌后摆斜面。接种白背毛木耳菌种后，置于26℃霉菌培养箱培养，当菌丝长满斜面即完成了菌种活化。

1.2.3 制种栽培

1.2.3.1 拌料

按照比例，备齐合适重量的材料，进行拌料。先把锯木屑平铺在底层，再倒入麸皮，最后是棉籽壳，将石灰粉充分搅拌溶解后，倒入料堆，用脚踩实。最后将石膏粉搅拌溶解，倒入料堆，加水至60%的含水量。

1.2.3.2 发酵

搅好的基料要堆放在室外发酵一周。将料堆修成平顶，然后拍实表面，再用竹杆将料堆从顶到底穿一些孔，这样可以避免料堆内部厌氧菌的过度繁殖，酸性过高。发酵周期为一周，其间每隔2天将料堆翻动一次[7]。一周之后，发酵好的基料就可以装袋了。

1.2.3.3 装袋

将发酵好的栽培料装袋。装袋时每袋插入50根枝条，且枝条处于栽培料中央，表面被基料覆盖。

1.2.3.4 灭菌接种

将栽培种袋放入蒸汽灭菌锅内121℃灭菌2 h。灭菌完成后，等袋温降到33℃以下，开始接种，每袋接种量为1.5 cm2。

1.2.3.5 培养

将接种好的栽培袋置于26℃的霉菌培养箱内培养。当菌丝长满袋后就可以进行扩大栽培了。在进行扩培时，每种材质的枝条随机取5根观察菌丝附着情况，测量并统计菌丝吃料深度。

1.2.4 扩大栽培

1.2.4.1 拌料同制种期

1.2.4.2 发酵同制种期

1.2.4.3 装袋

将发酵好的栽培料装袋。装袋时要注意每袋插入一根试管，制孔用于接下来接种枝条菌种。

1.2.4.4 灭菌接种

灭菌同制种期，接种时，每种枝条菌种均分别接1、2、3、4根。

1.2.4.5 培养

将接种好的栽培袋置于26℃的霉菌培养箱内培养，考查菌丝满袋时间。

2 结果与分析

2.1 制种期结果

图1 制种期菌丝长满袋时间Fig.1 The time of mycelia overgrowing the bag for seed production period

表1 白背毛木耳菌丝在枝条上的附着密集程度Table 1 Adhesion intensity in the branches of Auricularia Polytricha hyphae

由图1可以看出，一次性筷子、竹筷、木筷的栽培袋菌丝长满袋的时间分别为30、28、34 d，竹筷制种所耗时间最短。

由表1可以看出，当菌丝长满袋后，随机抽取的6种枝条中，木筷上的菌丝密集程度最高，附着力最强，最不易脱落，而且菌丝在木筷内延伸的最深；竹筷上菌丝较密集，附着力一般，不易脱落，吃料深度最浅；一次性筷子上菌丝较少，附着力低，易脱落，吃料深度居中。其中经过打毛处理的枝条上菌丝多于未经处理的枝条，附着力高于后者。

2.2 扩培期结果

扩培期结果如图2～图7。

综合图2～图7，当枝条菌种接种量越大时，菌丝长满袋的时间越短。当枝条接种量分别为2、3、4根时，菌丝长满袋的时间差在4d以内。从接种枝条成本、操作简便性等方面综合考虑，2根枝条菌种是适宜的接种量。

图2 一次性筷子接种数与菌丝长满袋时间的关系Fig.2 The relationship between the inoculated number of disposable chopsticks and the time of mycelia overgrowing the bag

图3 一次性筷子（打毛）接种数与菌丝长满袋时间的关系Fig.3 The relationship between the inoculated number of disposable chopsticks after dealing with the rough machining and the time of mycelia overgrowing the bag

图4 竹筷接种数与菌丝长满袋时间的关系Fig.4 The relationship between the inoculated number of bamboo chopsticks and the time of mycelia overgrowing the bag

由图8可以看出，当接种量为2根时，接种竹筷（打毛）的菌包菌丝长满袋时间最短。传统白背毛木耳生产方式菌丝长满袋时间为30 d～40 d，利用打毛竹筷枝条菌种生产时平均时间为21 d，平均可以缩短16 d。

3 结论

木筷枝条种菌丝吃料深度最大、附着力最强，但生产周期过长，而且使用木筷与森林环保相悖。竹筷枝条种生产周期相对最短，而且竹筷来源广泛、价格低廉，所以经过打毛处理的竹筷是白背毛木耳枝条种栽培的适宜枝条，适宜的接种量为每袋菌包2根枝条菌种。

图5 竹筷（打毛）接种数与菌丝长满袋时间的关系Fig.5 The relationship between the inoculated number of bamboo chopsticks after dealing with the rough machining and the time of mycelia overgrowing the bag

图6 木筷接种数与菌丝长满袋时间的关系Fig.6 The relationship between the inoculated number of chopsticks and the time of mycelia overgrowing the bag

图7 木筷（打毛）接种数与菌丝长满袋时间的关系Fig.7 The relationship between the inoculated number of chopsticks after dealing with the rough machining and the time of mycelia overgrowing the bag

利用枝条菌种栽培食用菌有着许多优点，例如由于枝条菌种接种工序简单，所以能克服其它菌种常规接种存在的一些问题，加之接种后，发菌时间短，又大大降低了杂菌污染的危险性。调查显示，应用该技术的农村栽培户，结果污染率最高为7%，是一项很值得推广的新技术[8]。相信将来枝条菌种袋栽食用菌的技术会得到长足发展，使食用菌栽培更加规模化。

图8 接种量为2根时各枝条种菌丝长满袋时间Fig.8 The time of mycelia overgrowing the bag when inoculum size were two branchs

[1]吕作舟.食用菌栽培学[M].北京:高等教育出版社,2006

[2]冀宏,李智,郑丽雪.白背毛木耳菌丝体深层发酵工艺优化[J].食品科学,2010,31(23):204-209

[3]任桂梅,乔文兰,贺晓龙.废筷子制作食用菌枝条菌种初探[J].安徽农业科学,2005,33(11):2039

[4] 吴华军,康先坡,张振喜,等.香菇长枝条菌种生产技术[J].中国食用菌,1998,17(4):32-33

[5] 姜涛,张忠伟,薛建臣,等.香菇枝条菌种的制作与应用技术[J].农业与技术,2007,27(1):125

[6]郑丽雪,胡耀辉,齐斌.酿酒酵母生产谷胱甘肽的培养条件的研究[J].食品科学,2007,28(10):391-394

[7] 李会杰,刘巧宁,马俊江,等.利用枝条菌种高效栽培平菇[J].食用菌,2011(3):45-46

[8]倪琪,李书生,汪婉芳,等.金针菇枝条菌种预防生产中病害技术初探[J].中国食用菌,1990,9(6):21-22

Branch Strains Production of Auricularia Polytricha

XU Bing，DAI Cai-rong，ZHENG Li-xue，TANG Wen，JI Hong*
（College of Biology and Food Engineering，Changshu Institute of Technology，Changshu 215500，Jiangsu，China）

The branches of the three kinds of different materials were used to make branch strains. Then the branch strains were used to expand the cultivation.Using the time of mycelia overgrowing the bag as index，the depth of materials were examined for different branchs.The result showed that the best branchs were bamboo chopsticks after dealing with the rough machining.Inoculum size were two chopsticks.Under the conditions of 26℃，The average production cycle of hyphae package was 21 days，shorten the 16 days compared with the traditional methods.

Auricularia Polytricha；branch strains；production

10.3969/j.issn.1005-6521.2014.19.031

2014-02-28

白背毛木耳特色品种选育及液体菌种关键技术研究与示范（CN201308）；白背毛木耳生产关键技术及规模化应用（JHB2012-49）作者简介：徐兵（1982—），男（汉），实验师，学士，研究方向：食用菌学。

*通信作者：冀宏（1969—），男（汉），教授，博士，研究方向：食、药用菌工程技术研究及现代农业技术经济与管理。