胃泌素释放肽前体检测对小细胞肺癌诊治的意义

张海茂周爱凤张 蓉

（1 山东省青岛市肿瘤医院检验科，山东 青岛 266042；2 山东省青岛市中心医院检验科，山东 青岛 266042）

胃泌素释放肽前体检测对小细胞肺癌诊治的意义

张海茂1周爱凤2张 蓉2

（1 山东省青岛市肿瘤医院检验科，山东 青岛 266042；2 山东省青岛市中心医院检验科，山东 青岛 266042）

目的探讨血浆胃泌素释放肽前体（ProGRP）对小细胞肺癌（SCLC）的临床诊断价值。方法用化学发光法检测50例健康体检者、49例非小细胞肺癌（NSCLC）及50例初诊SCLC（局限期29例、广泛期21例）患者血浆ProGRP水平，评估血浆ProGRP诊断SCLC的临床价值。结果健康对照组、NSCLC组和SCLC组血浆ProGRP水平分别为34.3、39.1和403.1 ng/L；各组间血浆ProGRP差异均有统计学意义。局限期SCLC（LD-SCLC）组血浆ProGRP高于健康对照组，差别有统计学意义。广泛期SCLC（ED-SCLC）组血浆ProGRP高于LD-SCLC组，差别有统计学意义。以健康组为对照，ROC曲线上取约登指数最大点确定ProGRP临界值为36.9 ng/L，ProGRP的敏感度为88%，特异度为98%；以NSCLC组为对照，ROC曲线上取约登指数最大点确定ProGRP的临界值为62.9 ng/L，ProGRP的敏感度为82%，特异度为96%。结论血浆ProGRP检测可作为SCLC诊断、病情监测的敏感和特异性指标，可广泛应用于临床。

小细胞肺癌肺癌：胃泌素释放肽前体；病情监测；化学发光法；血浆

胃泌素释放肽前体（ProGRP）作为一种新兴的小细胞肺癌肿瘤标志物，受到了越来越多的重视。酶联免疫吸附试验（ELISA）是ProGRP相对经典的检测方法，对这方面的研究也较多。随着技术的不断革新，化学发光法检测ProGRP逐渐涌入了我们的视线。化学发光法具有高敏感度和特异度，可以及时检测，自主化程度更高，同时也大大缩短了检测时间。虽然，国内外专家学者一再强调血浆ProGRP较血清ProGRP有更高的稳定性，但对ProGRP的检测仍多使用血清标本。本研究旨在初步确立本实验室血浆ProGRP的临界值，并对血浆ProGRP在小细胞肺癌诊断中的价值进行探讨。

1 对象与方法

1.1 对象

①小细胞肺癌（SCLC）组：青岛中心医院病理确诊的SCLC初诊患者50例，男34例，女16例，中位年龄57（39～77）岁；其中按美国退伍军人管理局系统医院SCLC分期方法，局限期（1imited disease，LD）29例；广泛期（extensive disease，ED）21例。②非小细胞肺癌（NSCLC）组：同期本院经病理确诊的NSCLC患者49例，男35例，女14例，中位年龄51（45～78）岁。③健康对照组：同期本院健康体检者50例，男性31例，女性19例，中位年龄53岁。均为体格检查正常，肝肾功能正常和影像学检查无异常者。3组受试对象均无肾功能衰竭、甲状腺和前列腺肿瘤，各组问性别、年龄差异均无统计学意义（P均＞0.05）。

1.2 方法

①试剂与仪器：ProGRP试剂盒和ARCHITECT i2000SR化学发光免疫分析仪（美国雅培公司）。②标本采集：空腹采静脉血2 mL于EDTA抗凝管中，轻轻混匀，3500 g离心10 min，收集上层血浆于-70 ℃冰箱保存待测。③血浆ProGRP检测：用ARCHITECT i2000SR化学发光免疫分析仪及其配套ProGRP试剂盒、标准品和质控品测定血浆受试对象ProGRP水平，均严格按操作步骤进行。

1.3 统计学处理

用SPSS 13.0软件进行统计分析。因ProGRP检测数据呈偏态分布，用中位数及四分位数 [M（QR）]表示，多组间比较采用非参数Kruskal-wallis H检验；两组间比较用非参数Mann-Whitney U检验。用受试者工作特征曲线（ROC）确定血浆ProGRP诊断SCLC的临界值及曲线下面积（ROC-AUC）。以P＜0.05为差异有统计学意义。

2 结 果

2.1 各组血浆ProGRP水平比较

经非参数Kruskal-Wallis H检验，健康对照组、NSCLC组和SCLC组问血浆ProGRP水平差异均有统计学意义（H值为84.612，P＜0.001）。以Mann-Whitney U检验进行两两比较，SCLC组血浆ProGRP水平与健康对照组和NSCLC组比较（U值分别为97和212，P＜0.001），差异均有统计学意义。LD-SCLC组与健康对照组相比，差异有统计学意义。ED-SCLC组与LD-SCLC组相比，差异也有统计学意义。见表1。

表1 各组血浆ProGRP水平比较[ M（P25～P75 ）]

2.2 ProGRP诊断SCLC的敏感性和特异性

利用受试者工作特征曲线（ROC曲线），以健康组为对照，获得ProGRP临界点分别为36.9 ng/L：以NSCLC组为对照，获得ProGRP临界点62.9 ng/L，见表2。

表2 ProGRP诊断SCLC的敏感性和特异性比较

3 讨 论

胃泌素释放肽（GRP）是一种具有促胃泌素分泌作用的生物活性肽，1978年首次从猪胃细胞分离出来[1]。它由27个氨基酸组成，是健康人脑、胃肠的神经纤维以及胎儿肺的神经内分泌组织存在的激素。Maruno等[2]证明，GRP是SCLC组织的重要产物，也是SCLC的重要肿瘤标志物。但GRP在血浆中半衰期短，临床不易检测，这使得GRP无法应用于SCLC的临床检测。胃泌素释放肽前体（ProGRP）是GRP的前体结构，普遍存在于非胃窦组织、神经纤维、脑和肺的神经内分泌细胞中。ProGRP因部分氨基酸残基的不同分为3种分子亚型，它们有共同的C端序列ProGRP（31-98），能代表GRP水平和GRP基因表达，是一种新的SCLC肿瘤标志物[3]。

有研究表明，由于凝血过程中产生的内源性蛋白酶对ProGRP的降解作用，使得血浆ProGRP的检测比血清更稳定。Nordlund等认为以血浆作为检测标本更能提高其测定值的临床可靠性[4]。本次研究即采用血浆样本，减少了分析前误差。Kamata等[5]报道肾功能衰竭的患者中血清ProGRP水平升高。相关研究显示，当患者血浆肌酐浓度＞141 μmol/L时，血浆ProGRP浓度开始升高[6]。同时，有研究表明，在肾功能障碍患者中，由于肾小球对ProGRP的通透性降低，致使其血中浓度上升，52.2%慢性肾功能衰竭患者可出现血清ProGRP升高，引起ProGRP假阳性。故本次试验中同时检测受试标本肾功，以排除肾衰竭患者，保证结果的准确性。另外，有研究显示，结直肠癌、前列腺癌和髓样甲状腺癌患者也可能出现血清ProGRP升高，故本次试验的受试对象排除上述肿瘤。

本研究中，SCLC组血浆ProGRP明显高于健康对照组和NSCLC组，各组间比较差异有统计学意义。ED-SCLC组与LD-SCLC组相比，差异也有统计学意义。提示，血浆ProGRP对小细胞肺癌的诊断、病情监测有重要的临床价值。

目前，Pro-GRP尚没有普遍适用的参考值范围和临界值[7]。利用受试者工作特征曲线（ROC曲线），以健康组为对照，获得ProGRP临界点分别为36.9 ng/L：以NSCLC组为对照，获得ProGRP临界点62.9 ng/L。本次试验以健康组为对照，血浆ProGRP诊断SCLC的敏感性和特异性分别为88%和98%；以NSCLC组为对照，血浆ProGRP诊断SCLC的敏感性和特异性分别为82%和96%。说明设定的血浆ProGRP界值能较好地满足临床和实验室需求。

总之，化学发光法血浆ProGRP检测可作为SCLC诊断、病情监测的敏感和特异性指标，具有特异性强、灵敏度高，可实时监测等优势，可广泛应用于临床。

[1] McDonald TJ,Nilsson G,Vagne M,et a1.A gastrin releasing peptide from the porcine non-antral gastric tissue[J].Gut,1978,19(9):767-774.

[2] Maruno K,Yamaguchi K,Abe K,et al.Immunoreactive gastrinreleasing peptide as a specific tumor marker in patients with small cell lung carcinoma[J].Cancer Res,1989,49(3):629-632.

[3] 杨静静,黄猛,杨佳锦.胃泌素释放肽前体的研究进展[J].国际检验医学,2013,34(3):337-338..

[4] Nordlund MS,Bjerner J,Warren DJ,et a1.Progastrin releasing peptide:stability in plasma/serum and upper reference limit[J]. Tumour Biol,2008,29(3):204-210.

[5] Kamata K,Uxhida M,Takeuchi Y,et al.Increased serum concentrations of pro-grastrin-releasing peptide in patients with renal dysfunction[J].Nephrol Dial Transplant,1996,11(7):1267-1270.

[6] Molina R,Auge JM,Alicarte J,et a1.Pro-gastrin-releasing peptide in patients with benign and malignant diseases[J].Tumour Biol,2004,25(1/2):56-61.

[7] Bubanovig G,Pavigevi～R,Franjevig A.Determining the cut-of of pm-gastrin releasing peptide(ProGRP)in lung cancer according topopulation characteristics[J].Coil Antropol,2008,32(4):1155-l164.

R734.2

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1671-8194（2014）27-0228-02